c*b
2 楼
4年前买的洗衣机，最近开始甩干时声音刺耳。大家有过这种情况吗？是因为地面不平
？已经过了保修期了，值得请人来修吗？还是扔了买个新的算了？听说洗衣机都能用上
10年，如果4年就淘汰有点不值。大家又和建议？多谢先。
？已经过了保修期了，值得请人来修吗？还是扔了买个新的算了？听说洗衣机都能用上
10年，如果4年就淘汰有点不值。大家又和建议？多谢先。
v*a
3 楼
【 以下文字转载自 TVChinese_1 俱乐部 】
发信人: viamedia (Mens conscia recti), 信区: TVChinese_1
标 题: 今年的舞林争霸，跳水节目什么时候出来啊
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 26 18:01:33 2014, 美东)
还有那个龙门镖局2？
发信人: viamedia (Mens conscia recti), 信区: TVChinese_1
标 题: 今年的舞林争霸，跳水节目什么时候出来啊
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 26 18:01:33 2014, 美东)
还有那个龙门镖局2？
V*n
4 楼
恳请大家帮忙。
在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
内聚集，持续时间大概几个小时。
不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
内聚集，持续时间大概几个小时。
不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
c*b
5 楼
自己顶一下。
d*r
6 楼
据说去年参加跳水节目的男女星星这一年没有一个怀孕产子的，怀疑和跳水有关，今年
可能就不办了。
【在 v******a 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 TVChinese_1 俱乐部 】
: 发信人: viamedia (Mens conscia recti), 信区: TVChinese_1
: 标 题: 今年的舞林争霸，跳水节目什么时候出来啊
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 26 18:01:33 2014, 美东)
: 还有那个龙门镖局2？
可能就不办了。
【在 v******a 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 TVChinese_1 俱乐部 】
: 发信人: viamedia (Mens conscia recti), 信区: TVChinese_1
: 标 题: 今年的舞林争霸，跳水节目什么时候出来啊
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 26 18:01:33 2014, 美东)
: 还有那个龙门镖局2？
T*e
7 楼
lipid raft?
p*r
8 楼
什么声音？是drum撞到机壳的声音，衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，还是指甲刮黑板
的声音？
【在 c*b 的大作中提到】
: 4年前买的洗衣机，最近开始甩干时声音刺耳。大家有过这种情况吗？是因为地面不平
: ？已经过了保修期了，值得请人来修吗？还是扔了买个新的算了？听说洗衣机都能用上
: 10年，如果4年就淘汰有点不值。大家又和建议？多谢先。
的声音？
【在 c*b 的大作中提到】
: 4年前买的洗衣机，最近开始甩干时声音刺耳。大家有过这种情况吗？是因为地面不平
: ？已经过了保修期了，值得请人来修吗？还是扔了买个新的算了？听说洗衣机都能用上
: 10年，如果4年就淘汰有点不值。大家又和建议？多谢先。
V*n
9 楼
如果是lipid raft，似乎可以用超速离心fractionation分离。不过不确定蛋白聚集区
域是否是lipid raft。
域是否是lipid raft。
w*g
10 楼
衣服不平衡?
【在 p****r 的大作中提到】
: 什么声音？是drum撞到机壳的声音，衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，还是指甲刮黑板
: 的声音？
【在 p****r 的大作中提到】
: 什么声音？是drum撞到机壳的声音，衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，还是指甲刮黑板
: 的声音？
c*k
11 楼
你说的这个区域多大啊？
c*b
12 楼
不是衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，也不是碰撞，像是零件摩擦尖叫刺耳的声音。并
不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
V*n
13 楼
老板不让上图。只能干讲了。
聚集区不固定，大的占细胞外周的１／３，小的有１／２０。
这是二维的情况。三维球面的状况就不太好描述了。
聚集区不固定，大的占细胞外周的１／３，小的有１／２０。
这是二维的情况。三维球面的状况就不太好描述了。
w*g
14 楼
马达没油了?
【在 c*b 的大作中提到】
: 不是衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，也不是碰撞，像是零件摩擦尖叫刺耳的声音。并
: 不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
【在 c*b 的大作中提到】
: 不是衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，也不是碰撞，像是零件摩擦尖叫刺耳的声音。并
: 不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
s*y
15 楼
你也许可以试着transient crosslink,
然后免疫共沉淀， 分析出来的东西再挑几个出来用免疫荧光来重复肯定一下
【在 V********n 的大作中提到】
: 恳请大家帮忙。
: 在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
: 内聚集，持续时间大概几个小时。
: 不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
然后免疫共沉淀， 分析出来的东西再挑几个出来用免疫荧光来重复肯定一下
【在 V********n 的大作中提到】
: 恳请大家帮忙。
: 在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
: 内聚集，持续时间大概几个小时。
: 不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
c*a
16 楼
solution:
use ear plugs.
【在 c*b 的大作中提到】
: 不是衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，也不是碰撞，像是零件摩擦尖叫刺耳的声音。并
: 不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
use ear plugs.
【在 c*b 的大作中提到】
: 不是衣服在机器里面哐啷哐啷的声音，也不是碰撞，像是零件摩擦尖叫刺耳的声音。并
: 不是一直响，只有甩干达到最高速度的时候才有。
V*n
17 楼
多谢。
这个蛋白一般情况下在膜上均匀分布。刺激后聚集。我尝试过刺激前后的细胞抽提膜蛋
白，然后IP，跑电泳，银染色。可惜没有特异性东西出来。如果CROSSLINK，不知道能有多大改善。
IF图片里现象很明显。每次我和老板都对着图片感慨，要是能一刀把聚集区切出来就好
了。
这个蛋白一般情况下在膜上均匀分布。刺激后聚集。我尝试过刺激前后的细胞抽提膜蛋
白，然后IP，跑电泳，银染色。可惜没有特异性东西出来。如果CROSSLINK，不知道能有多大改善。
IF图片里现象很明显。每次我和老板都对着图片感慨，要是能一刀把聚集区切出来就好
了。
T*J
18 楼
哪儿能加油？
【在 w*******g 的大作中提到】
: 马达没油了?
【在 w*******g 的大作中提到】
: 马达没油了?
C*e
19 楼
刺激前后的细胞抽提膜蛋白，然后IP，跑电泳，银染色。可惜没有特异性东西出来
——这个不奇怪吧，如果蛋白表达什么没有变化只是位置变化了的话
我觉得可以试一下crosslinking
好好选择spacer distance
平时蛋白均匀分布，大概距离多远
选个比那个距离小的spacer
富集的时候就应该能crosslink上了
不过如果蛋白富集区有很多种不同的蛋白的话
分析起来会比较痛苦
也可以选择带s--s的可以reverible的crosslinker
这样跑变性胶就能看
不要做MS
能有多大改
善。
【在 V********n 的大作中提到】
: 多谢。
: 这个蛋白一般情况下在膜上均匀分布。刺激后聚集。我尝试过刺激前后的细胞抽提膜蛋
: 白，然后IP，跑电泳，银染色。可惜没有特异性东西出来。如果CROSSLINK，不知道能有多大改善。
: IF图片里现象很明显。每次我和老板都对着图片感慨，要是能一刀把聚集区切出来就好
: 了。
——这个不奇怪吧，如果蛋白表达什么没有变化只是位置变化了的话
我觉得可以试一下crosslinking
好好选择spacer distance
平时蛋白均匀分布，大概距离多远
选个比那个距离小的spacer
富集的时候就应该能crosslink上了
不过如果蛋白富集区有很多种不同的蛋白的话
分析起来会比较痛苦
也可以选择带s--s的可以reverible的crosslinker
这样跑变性胶就能看
不要做MS
能有多大改
善。
【在 V********n 的大作中提到】
: 多谢。
: 这个蛋白一般情况下在膜上均匀分布。刺激后聚集。我尝试过刺激前后的细胞抽提膜蛋
: 白，然后IP，跑电泳，银染色。可惜没有特异性东西出来。如果CROSSLINK，不知道能有多大改善。
: IF图片里现象很明显。每次我和老板都对着图片感慨，要是能一刀把聚集区切出来就好
: 了。
l*e
20 楼
可能是皮带需要润滑，打开拿块肥皂抹抹。应该是和汽车发动时刺耳的声音差不多吧，
【在 T**J 的大作中提到】
: 哪儿能加油？
【在 T**J 的大作中提到】
: 哪儿能加油？
s*e
21 楼
特异性地分离某些细胞膜区域的方法一般只能基于脂类组成的差异来进行，富含胆固醇
和鞘磷脂的lipid rafts可以通过低温下用特定的去污剂增溶非lipid rafts的方法进行
纯化。你可以读几篇分离lipid rafts的文献然后试试，如果你的蛋白应激反应是向
lipid rafts聚集的话就能够分离出来————不过这个可是靠人品的。
和鞘磷脂的lipid rafts可以通过低温下用特定的去污剂增溶非lipid rafts的方法进行
纯化。你可以读几篇分离lipid rafts的文献然后试试，如果你的蛋白应激反应是向
lipid rafts聚集的话就能够分离出来————不过这个可是靠人品的。
T*J
22 楼
天呢
【在 l******e 的大作中提到】
: 可能是皮带需要润滑，打开拿块肥皂抹抹。应该是和汽车发动时刺耳的声音差不多吧，
【在 l******e 的大作中提到】
: 可能是皮带需要润滑，打开拿块肥皂抹抹。应该是和汽车发动时刺耳的声音差不多吧，
r*g
23 楼
你用免疫荧光检查的，不就是你的目标蛋白聚集吗？你是怀疑抗体吗？还要分析什么组
分？我觉得重要的是要把该蛋白的聚集和功能联系起来啊。
还有，你确定这种聚集是特异的吗？有没有看其它类似膜蛋白在受到同样刺激后也
聚集？
【在 V********n 的大作中提到】
: 恳请大家帮忙。
: 在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
: 内聚集，持续时间大概几个小时。
: 不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
分？我觉得重要的是要把该蛋白的聚集和功能联系起来啊。
还有，你确定这种聚集是特异的吗？有没有看其它类似膜蛋白在受到同样刺激后也
聚集？
【在 V********n 的大作中提到】
: 恳请大家帮忙。
: 在做一个膜蛋白。现象是免疫荧光看到的。某种刺激下，这个膜蛋白会在膜上特定区域
: 内聚集，持续时间大概几个小时。
: 不知道有什么技术可以分离出膜上的聚集区域，然后分析组分。
O*d
24 楼
rebalance your wash load.
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