请教一个在zebrafish里面表达HA-tag protein的问题# Biology - 生物学
l*y
1 楼
手里有4张，Sony，CO，Freedom 和 Amazon，看着BA 很眼馋想申请。我知道Citi 好像
一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
多谢！
一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
多谢！
x*B
2 楼
小三儿是什么，就是那种借口插足别人生活并且还可能借机上位的，作为正宫的储备的
种子选手，这一批人你想用钱去满足他们是不可能的 。
对没错，人家最开始跟 你的时候或许就是想要赚钱捞油水，但是渐渐时间长了，她就
能给你整出一个大幺蛾子来。
前段时就在南京街头出现了原配暴打小三的事件，人家老公全程护着小三，现在小三已
经不怕人家知道她是小三了，为啥？因为她只要能上位就可以了。
而人男的看重这些小三的是什么，样貌身材，因为她们最会的就是满足男人的成就感和
征服感、
她觉得自己比那些援交的身份要高尚的多，他们嫩拴住男人的不仅仅是钱，还有心。
她们具有发展的潜力，还可以往上爬，那个南京被暴打的小三，为什么会被打，还不是
自己故意去挑衅原配，事情闹的这么大，那男的还能偶回旋的余地吗？最后还不是离婚
，自己可以上位，中间好好扮演好自己的白莲花的角色就万事大吉了。
其实小三这行业还真的不是谁都可以活下来的，有的人活下来就是靠演员的自我修养，
似乎有钱的话面子也就到了。
但是作为一个人，连最起码的羞耻心都没有，我是觉得可悲啊 你能明白吗？像现在的
许多人一样，把不知羞耻当作时尚漂亮，这真的是时代发展的悲哀……
古人说知耻而后勇，连羞耻都不知道，不是要一代代烂下去吗？你要把罪责归咎于人被
环境塑造的这个话题，我觉得未必吧。到底塑造我们的是我们自己还是环境。
种子选手，这一批人你想用钱去满足他们是不可能的 。
对没错，人家最开始跟 你的时候或许就是想要赚钱捞油水，但是渐渐时间长了，她就
能给你整出一个大幺蛾子来。
前段时就在南京街头出现了原配暴打小三的事件，人家老公全程护着小三，现在小三已
经不怕人家知道她是小三了，为啥？因为她只要能上位就可以了。
而人男的看重这些小三的是什么，样貌身材，因为她们最会的就是满足男人的成就感和
征服感、
她觉得自己比那些援交的身份要高尚的多，他们嫩拴住男人的不仅仅是钱，还有心。
她们具有发展的潜力，还可以往上爬，那个南京被暴打的小三，为什么会被打，还不是
自己故意去挑衅原配，事情闹的这么大，那男的还能偶回旋的余地吗？最后还不是离婚
，自己可以上位，中间好好扮演好自己的白莲花的角色就万事大吉了。
其实小三这行业还真的不是谁都可以活下来的，有的人活下来就是靠演员的自我修养，
似乎有钱的话面子也就到了。
但是作为一个人，连最起码的羞耻心都没有，我是觉得可悲啊 你能明白吗？像现在的
许多人一样，把不知羞耻当作时尚漂亮，这真的是时代发展的悲哀……
古人说知耻而后勇，连羞耻都不知道，不是要一代代烂下去吗？你要把罪责归咎于人被
环境塑造的这个话题，我觉得未必吧。到底塑造我们的是我们自己还是环境。
G*Y
3 楼
买了能下载国内的高清720p，1080p之类的电影吗？
在网上看国内的电影太模糊了。
在网上看国内的电影太模糊了。
b*b
4 楼
不知道为什么，每次听老师的歌，都想哭。
现在在听这首歌：
http://fc.5sing.com/6737369.html
这首歌版上很多人唱过，可是听歌想哭的感觉还是第一次。
也许，歌唱的能感人，需要生活。
现在在听这首歌：
http://fc.5sing.com/6737369.html
这首歌版上很多人唱过，可是听歌想哭的感觉还是第一次。
也许，歌唱的能感人，需要生活。
t*y
5 楼
对棒球一窍不通。
二垒：Kiss?
本垒: Sex?
郑重声明不是坑。
二垒：Kiss?
本垒: Sex?
郑重声明不是坑。
l*z
6 楼
昨天进ＢＩＯＳ的时候，看到有个选项是关于ＣＰＵ的Ｈｙｐｅｒ Ｔ，默认是
disable的,这个打开不打开没有什么影响吧? 多谢了.
disable的,这个打开不打开没有什么影响吧? 多谢了.
w*y
7 楼
我把3xHA的tag接到蛋白的N端, 然后做了in vitro transcription得到了mRNA. 接着把
mRNA注射到了鱼的卵里,另外准备了一些uninjected fish作为negative control, 一段
时间后做western观察蛋白表达情况. 我发现在那些negative control的样品里也有带,
而且量还不少, 大概在75KD 左右. 我试过两个不同的 anti-HA的抗体, 结果都一样.
请问有人在zebrafish里面表达过HA-tag的蛋白么, 有没有看到这种情况呢?
mRNA注射到了鱼的卵里,另外准备了一些uninjected fish作为negative control, 一段
时间后做western观察蛋白表达情况. 我发现在那些negative control的样品里也有带,
而且量还不少, 大概在75KD 左右. 我试过两个不同的 anti-HA的抗体, 结果都一样.
请问有人在zebrafish里面表达过HA-tag的蛋白么, 有没有看到这种情况呢?
i*d
8 楼
预感到要有人跳出来说
谁说citi只能拿四张卡
老子有多少多少张卡
【在 l**y 的大作中提到】
: 手里有4张，Sony，CO，Freedom 和 Amazon，看着BA 很眼馋想申请。我知道Citi 好像
: 一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
: 多谢！
谁说citi只能拿四张卡
老子有多少多少张卡
【在 l**y 的大作中提到】
: 手里有4张，Sony，CO，Freedom 和 Amazon，看着BA 很眼馋想申请。我知道Citi 好像
: 一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
: 多谢！
l*e
9 楼
呵呵，你情感比较容易投入。
y*n
10 楼
开。
不开亏了。但也看你什么cpu。
不开亏了。但也看你什么cpu。
s*y
11 楼
请问你试过的两种Ab 都具体是什么公司的，Cat# 是什么？我个人觉得单克隆的可能会
好一点。
好一点。
F*y
12 楼
多少张没有规定，但是总CL有，申请速度也有
a*u
13 楼
呵呵，不要紧的，
想哭就哭，呵呵，
哭完了就好了。
听歌感动和看电影感动是一样的。
【在 b***b 的大作中提到】
: 不知道为什么，每次听老师的歌，都想哭。
: 现在在听这首歌：
: http://fc.5sing.com/6737369.html
: 这首歌版上很多人唱过，可是听歌想哭的感觉还是第一次。
: 也许，歌唱的能感人，需要生活。
想哭就哭，呵呵，
哭完了就好了。
听歌感动和看电影感动是一样的。
【在 b***b 的大作中提到】
: 不知道为什么，每次听老师的歌，都想哭。
: 现在在听这首歌：
: http://fc.5sing.com/6737369.html
: 这首歌版上很多人唱过，可是听歌想哭的感觉还是第一次。
: 也许，歌唱的能感人，需要生活。
l*z
14 楼
是i5的4核的
【在 y*******n 的大作中提到】
: 开。
: 不开亏了。但也看你什么cpu。
【在 y*******n 的大作中提到】
: 开。
: 不开亏了。但也看你什么cpu。
n*w
15 楼
你的目的条带应该是多少？
你试过anti-你的target protein吗？
HA的话，我用过millipore的，背景挺多的。。。。我觉得抗体可能会bind到一些非特
异性的major bands。。。
你试过anti-你的target protein吗？
HA的话，我用过millipore的，背景挺多的。。。。我觉得抗体可能会bind到一些非特
异性的major bands。。。
b*g
16 楼
I have 6, so it should be fine. Just go ahead and give a try, good luck!
【在 l**y 的大作中提到】
: 手里有4张，Sony，CO，Freedom 和 Amazon，看着BA 很眼馋想申请。我知道Citi 好像
: 一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
: 多谢！
【在 l**y 的大作中提到】
: 手里有4张，Sony，CO，Freedom 和 Amazon，看着BA 很眼馋想申请。我知道Citi 好像
: 一个人最多能拿4张卡，不知道Chase 有没有类似的规定？
: 多谢！
b*b
17 楼
我又不是没听过歌， 我要是听一次歌哭一次，还能听歌吗？
我很喜欢老师的歌，实在是每首都很感人很感人。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，你情感比较容易投入。
我很喜欢老师的歌，实在是每首都很感人很感人。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，你情感比较容易投入。
y*n
18 楼
那开不开都无所谓。
【在 l****z 的大作中提到】
: 是i5的4核的
【在 l****z 的大作中提到】
: 是i5的4核的
z*n
19 楼
真情流露，用心唱得歌总是会打动人!
t*r
20 楼
对！真情最重要！！！
【在 z******n 的大作中提到】
: 真情流露，用心唱得歌总是会打动人!
【在 z******n 的大作中提到】
: 真情流露，用心唱得歌总是会打动人!
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