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求推荐胶回收试剂盒

求推荐胶回收试剂盒# Biology - 生物学

K*U2011-08-04 07:08

1 楼

父母2年前在北京签证已被拒签2次了，最近准备再签证，我听说好像出国旅游下，
对他们签证有帮助。欧洲旅游太贵了，不知道去韩国或者日本也可以有利签证。求
有经验的XDJM给点建议。
另外父母最近也刚买了套房子，但是只交了三分之一的钱做订金，房子还没盖好，没
有房产证，是不是可以去售楼那里开个证明，这样也算有个房子，不知道签证官认
不认？

P*e2011-08-04 07:08

2 楼

呵呵

s*82011-08-04 07:08

3 楼

用过qiagen,好像回收率挺低的,
我以前喜欢用zymo,但是最近做了几次,有时很好有时不行,不知大家都是用的那个公司
的?
以前在国内用过玻璃奶回收,不知这边哪里可以买到啊?

K*U2011-08-04 07:08

4 楼

S*e2011-08-04 07:08

5 楼

你看是这个吗
Qiagen cat# 20021

r*e2011-08-04 07:08

6 楼

关键是当时为什么被拒签啊？还具了两次。是有什么硬伤还是运气问题啊。纯出国旅游
不见得对症下药吧

【在 K****U 的大作中提到】

: 父母2年前在北京签证已被拒签2次了，最近准备再签证，我听说好像出国旅游下，
: 对他们签证有帮助。欧洲旅游太贵了，不知道去韩国或者日本也可以有利签证。求
: 有经验的XDJM给点建议。
: 另外父母最近也刚买了套房子，但是只交了三分之一的钱做订金，房子还没盖好，没
: 有房产证，是不是可以去售楼那里开个证明，这样也算有个房子，不知道签证官认
: 不认？

s*82011-08-04 07:08

7 楼

好像是啊,还真不知道qiagen就有这个东西.不过这个beads回收的elution体积一般都挺
大的是吧?还是想找一个好用的kit.Zymo 的kit可以elute 在6ul elution buffer里,但
是就是有时候work的不是很好.

【在 S******e 的大作中提到】

: 你看是这个吗
: Qiagen cat# 20021

K*U2011-08-04 07:08

8 楼

前2次签证就看了下房产证还问了下出国旅游过没，也没说原因就被拒签了，当时房子
是10年前单位分的很便宜，房产证上只写了4万块。我也7年没回国了，估计这也跟拒
签有关系。我今年过年刚回国了一次，想让父母在签证试试。

S*e2011-08-04 07:08

9 楼

elution体积一般15-25ul吧，我用过，觉得还不错

N22011-08-04 07:08

10 楼

Zymo kit is very reliable. I always use their columns.
How do you do it?

【在 s********8 的大作中提到】

: 好像是啊,还真不知道qiagen就有这个东西.不过这个beads回收的elution体积一般都挺
: 大的是吧?还是想找一个好用的kit.Zymo 的kit可以elute 在6ul elution buffer里,但
: 是就是有时候work的不是很好.

s*s2011-08-04 07:08

11 楼

你要体积小，就买Qiagen的MinElute, 10ul体积

【在 s********8 的大作中提到】

e*e2011-08-04 07:08

12 楼

Fermentas有， K0513 Silica Bead DNA Gel Extraction Kit, 效果挺好

s*82011-08-04 07:08

13 楼

Just follow the protocol.
These columns used to work well for me. Now that I moved to a new lab and
ordered their kits, the miniprep kit works really well, but gel purification
kit has caused problems. Sometimes I have ethanol carryover (that is, the
wash buffer failed to completely pass through the column during the second
spin and ends up coming down when I elute). Some times the yield is low or I
have guanidine carry-over.But when it works, it works really well. Seems to
me some of these columns are deficient.I just don't know which columns are
good and which are not.
I think I'll call them and ask why.

【在 N2 的大作中提到】

: Zymo kit is very reliable. I always use their columns.
: How do you do it?

s*82011-08-04 07:08

14 楼

谢谢推荐！

【在 s******s 的大作中提到】

: 你要体积小，就买Qiagen的MinElute, 10ul体积

s*82011-08-04 07:08

15 楼

多谢推荐！回头试试这个。

【在 e**e 的大作中提到】

: Fermentas有， K0513 Silica Bead DNA Gel Extraction Kit, 效果挺好

n*w2011-08-04 07:08

16 楼

I used pcr clean up and gel purification kit from promega, I felt it's good.

m*h2011-08-04 07:08

17 楼

How about the efficiency?
I am right now using the kit from Qiagen.
I got about 30-40% yield most of the time.

good.

【在 n***w 的大作中提到】

: I used pcr clean up and gel purification kit from promega, I felt it's good.

j*x2011-08-04 07:08

18 楼

很久很久没做胶回收了，但是Qiagen的Qiaquick印象中还是不错的，得率应该在50%的
样子。其实胶回收得率的关键在跑胶而不在kit，各家柱纯化kit的效率基本都在90%以
上，但是很多时候一个样品从上胶到切下来就已经损失了50%甚至更多了。
不过QIAquick有个缺点，就是溶胶buffer的用量是3倍gel slice的体积，稍微大一些的
gel slice就得分好几次离心，这点很不爽，所以后来就换成Fermentas家的GeneJET，1
倍gel slice的体积的溶胶buffer，效率也很好，还便宜。

C*e2011-08-04 07:08

19 楼

我也是从Qiagen换到Zymo的
还不错啊

【在 s********8 的大作中提到】

: 用过qiagen,好像回收率挺低的,
: 我以前喜欢用zymo,但是最近做了几次,有时很好有时不行,不知大家都是用的那个公司
: 的?
: 以前在国内用过玻璃奶回收,不知这边哪里可以买到啊?

C*e2011-08-04 07:08

20 楼

Fermentas家的GeneJET，记下啦，谢谢推荐！
不过你说的从胶上切下来就损失50%是什么意思呢？

，1

【在 j****x 的大作中提到】

: 很久很久没做胶回收了，但是Qiagen的Qiaquick印象中还是不错的，得率应该在50%的
: 样子。其实胶回收得率的关键在跑胶而不在kit，各家柱纯化kit的效率基本都在90%以
: 上，但是很多时候一个样品从上胶到切下来就已经损失了50%甚至更多了。
: 不过QIAquick有个缺点，就是溶胶buffer的用量是3倍gel slice的体积，稍微大一些的
: gel slice就得分好几次离心，这点很不爽，所以后来就换成Fermentas家的GeneJET，1
: 倍gel slice的体积的溶胶buffer，效率也很好，还便宜。

s*s2011-08-04 07:08

21 楼

我qiagen手动有时候也有问题，但是用qiacube同样的kit就没问题。
应该还是条件问题。比如胶没有全溶。不放心的QG两遍，PE两遍，放干
一分钟，加55C预热EB洗脱
s

s*82011-08-04 07:08

22 楼

下午给zymo的tech support打了电话,他告诉我说1)ethanol carryover可能是因为我的
离心机速度不够高(这倒是有可能,我们实验室的离心机有够老). 2)guanidine
carryover是很常见的,一般都是因为溶胶的buffer粘在column下面的tip上了.预防的办
法是第一次离心后再把column放到一个新的collection tube里面再转一次.然后再wash
.不过一般的guanidine carryover不影响下游操作.