s*t
2 楼
是不是必须得用maxi?mini的质量不能做细胞转染?
另外,G418, puro没用完,是放回-20,还是可以放在4度?能stable多久?
多谢!
另外,G418, puro没用完,是放回-20,还是可以放在4度?能stable多久?
多谢!
g*a
3 楼
Same question. I sent email to him/her, no reply.
w*2
5 楼
如果有明确的虚假宣传引起的纠纷,果版会考虑对当事人进行封禁。
j*g
7 楼
Get my refund as Amazon gift card. Perhaps she/he is super busy these days..
.
.
d*g
9 楼
got my refund a few days after ordering, got the case today. He/she is a
nice person.
Not a high qualify and possible scratched Iphone 5 paint. Freebie quality.
nice person.
Not a high qualify and possible scratched Iphone 5 paint. Freebie quality.
q*d
13 楼
恩,俺的钱也还没退。。。
s*y
14 楼
如果你要转的是类似Hela, HEK293T 这些大众化的细胞的话,
我亲手做过,用lipofectamine能转。如果你担心内毒素的话,
在做miniprep 的时候额外多洗两次(一次用buffer PB,
然后70%ETOH 洗的这一步多洗一次)
唯一要注意的是大部分mini-prep 出来的质粒浓度比较低,
如果浓度太低(低于50ng/ul) 的话要浓缩。
和线性,而maxi的去除了内毒素,且
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是吗?多谢
: 不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差,因为没有去掉内毒素,有较多开环和线性,而maxi的去除了内毒素,且
: 多为超螺旋,更适合转细胞
: 还有G418和puro该怎么保存?
我亲手做过,用lipofectamine能转。如果你担心内毒素的话,
在做miniprep 的时候额外多洗两次(一次用buffer PB,
然后70%ETOH 洗的这一步多洗一次)
唯一要注意的是大部分mini-prep 出来的质粒浓度比较低,
如果浓度太低(低于50ng/ul) 的话要浓缩。
和线性,而maxi的去除了内毒素,且
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是吗?多谢
: 不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差,因为没有去掉内毒素,有较多开环和线性,而maxi的去除了内毒素,且
: 多为超螺旋,更适合转细胞
: 还有G418和puro该怎么保存?
a*d
16 楼
Try endotoxin removal solution from Sigma if you worry about endotoxin.
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&N5=SE
G418 and puromycin solution should be stable for weeks at 4 degree.
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&N5=SE
G418 and puromycin solution should be stable for weeks at 4 degree.
g*3
17 楼
如果你担心的不是mini prep的DNA quantity,那么mini prep是可以的。mini prep的
kit也有好几种,你可以选哪种transfection grade的,没有问题。
http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
我以前用过,但不知道是不是这个kit。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi?mini的质量不能做细胞转染?
: 另外,G418, puro没用完,是放回-20,还是可以放在4度?能stable多久?
: 多谢!
kit也有好几种,你可以选哪种transfection grade的,没有问题。
http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
我以前用过,但不知道是不是这个kit。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi?mini的质量不能做细胞转染?
: 另外,G418, puro没用完,是放回-20,还是可以放在4度?能stable多久?
: 多谢!
h*y
18 楼
mini kit 可以啊。碱法用酚氯仿抽下做transfection都可以。
要包子!
要包子!
g*5
19 楼
qiagen,invitrogen,fermentus,sigma的小抽试剂盒都用过,hek 没有问题。
A*y
21 楼
Seriously, I though mini, midi, and maxi just telling you the prep size.
Use a quality kit not a kit from an unknown company. Qiagen is my preferred
one.
Use a quality kit not a kit from an unknown company. Qiagen is my preferred
one.
r*y
22 楼
我们用macherey-nagel的,非常好比其他的都便宜 而且他们可以单独买column单独买
buffer。
【在 g*********3 的大作中提到】
: 如果你担心的不是mini prep的DNA quantity,那么mini prep是可以的。mini prep的
: kit也有好几种,你可以选哪种transfection grade的,没有问题。
: http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
: 我以前用过,但不知道是不是这个kit。
buffer。
【在 g*********3 的大作中提到】
: 如果你担心的不是mini prep的DNA quantity,那么mini prep是可以的。mini prep的
: kit也有好几种,你可以选哪种transfection grade的,没有问题。
: http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
: 我以前用过,但不知道是不是这个kit。
m*e
23 楼
mini prep的没用过,但是有高质量的mini的提质粒的kit完全可以转,也是Qiangen的
,效果很好的
,效果很好的
c*i
24 楼
可以啊,至少HEK293可以,我一般用400ng或800ng转100,000cells,没问题的。
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