l*n
2 楼
比如credit limit 1000,听说每月花250以上会伤信用,真的假的?
z*3
3 楼
《千古一帝---李世民》
《宋太祖 ----赵匡胤》
《汉光武帝 ---刘秀》
《七子八婿满床笏---郭子仪》
《宋太祖 ----赵匡胤》
《汉光武帝 ---刘秀》
《七子八婿满床笏---郭子仪》
d*o
4 楼
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: dakandao (大熊宝宝), 信区: Military
标 题: 带了一万解放军精兵和装备回到战国时代结果更惨
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 19:45:19 2010, 美东)
回去后才发现带的都是精锐电子战部队,全是价值数亿的电磁干扰的设备 连一支老
套筒、汉阳造都冒得
发信人: dakandao (大熊宝宝), 信区: Military
标 题: 带了一万解放军精兵和装备回到战国时代结果更惨
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 19:45:19 2010, 美东)
回去后才发现带的都是精锐电子战部队,全是价值数亿的电磁干扰的设备 连一支老
套筒、汉阳造都冒得
n*a
5 楼
為什麼糾正自己的思想見解,有那麼重要?這是因為,人的一切行為,都受著
思想的支配。思想不改變,行為就不會發生改變,行為不改變,業果也就不會改變,業
果不改變,就依然擺脫不了輪迴之苦。所以不去修正思想,修行就根本無從談起。要獲
得解脫,必須從源頭下手,修正自己的思想見解。
敬錄自 益西彭措堪布官方微博
http://weibo.com/yixipengcuo
思想的支配。思想不改變,行為就不會發生改變,行為不改變,業果也就不會改變,業
果不改變,就依然擺脫不了輪迴之苦。所以不去修正思想,修行就根本無從談起。要獲
得解脫,必須從源頭下手,修正自己的思想見解。
敬錄自 益西彭措堪布官方微博
http://weibo.com/yixipengcuo
i*s
6 楼
三四个月前买的,昨天用的时候invalid
难道也会过期吗?还是只能在中文office上用?
难道也会过期吗?还是只能在中文office上用?
s*r
7 楼
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,
能不能保质期长一点。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是
先得灌一些OCT。或者新鲜肠子能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
都是小白问题,请多指教。
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,
能不能保质期长一点。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是
先得灌一些OCT。或者新鲜肠子能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
都是小白问题,请多指教。
g*z
9 楼
如果现在你的分数很低,只有好处
n*a
11 楼
無論做任何事情,首先要由意識去設計藍圖,然後由身和口去按圖施工。其中
意識是決定一切的主宰。因此,訓練、調整、調伏意識,是人生最重要的工作之一。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://www.weibo.com/cichengluozhu
意識是決定一切的主宰。因此,訓練、調整、調伏意識,是人生最重要的工作之一。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
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M*s
13 楼
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。
n*a
17 楼
自律、平等、寬容、積極、慈悲、智慧、放下、遵守因果、少欲知足、利益他
人、無條件地奉獻等等。這些都是大乘佛法的教學內容。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://www.weibo.com/cichengluozhu
人、無條件地奉獻等等。這些都是大乘佛法的教學內容。
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v*a
19 楼
赞
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
n*a
23 楼
學佛以後,可以找到人生的方向、奮鬥的目標、生存的意義。每一天都能過得
很充實,除了物質生活以外,還可以享受來自心靈的快樂,擁有積極的人生觀和光明的
前途。
敬錄自 慈誠羅珠堪布的微博
http://weibo.com/cichengluozhu
很充實,除了物質生活以外,還可以享受來自心靈的快樂,擁有積極的人生觀和光明的
前途。
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l*z
25 楼
赞专业!
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
C*n
27 楼
不要在听jb说了。如果你care,自己搞清楚。
s*o
29 楼
Office和Windows的都买过四五个,用到现在都没出过什么问题。第一次使用的时候可
以在线激活,之后重装系统什么的都需要电话激活。
买过一个Office 2011的码,放了一个多月才用,激活不了,联系卖家又换了一个,激
活了。
以在线激活,之后重装系统什么的都需要电话激活。
买过一个Office 2011的码,放了一个多月才用,激活不了,联系卖家又换了一个,激
活了。
s*r
30 楼
太感谢了。
我就是收集tissue作染色。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,
是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
我就是收集tissue作染色。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,
是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
学用途先freeze.
一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
,传统做法就是糖溶液浸泡。
如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
充盈到腔内。
没固定的组织切片一般大家如何固定,固定好的片子能不能长期保存。
关于切片的post-fix,现在用的基本有两类方法,1。 以4%PFA为主的配方,机理大致
是蛋白凝固,优点是固定效果好,缺点是会有交联。
2. 丙酮等有机溶剂浸泡,机理大致是蛋白凝固和脱水,优点组织形态好且无交联,缺
点不能室温长期保存,低温保存以后染色效果也不好。切片长期保存,无所谓固定不固
定,低温就行了。
如果要染lacZ的话是不是冰冻之前不固定。
最好不要,即使后固定也要控制时间和温度,因为长时间固定会降低lacZ活性,甚至失
活,那样敏感性就降低了,不好。
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
o*a
32 楼
不一定是statement balance的,各个银行提交balance记录的时间不一样,如果没记错
的话,Chase好像是在statement date的14天前提交。理论上在那个时候只要keep low
balance就可以了。但个人觉得最好还是尽量让oustanding balance保持得比较低,一
花比较大的就马上pay。如果用external account还过去的话,就不要等那个balance出
来再pay,可以直接push进去。
的话,Chase好像是在statement date的14天前提交。理论上在那个时候只要keep low
balance就可以了。但个人觉得最好还是尽量让oustanding balance保持得比较低,一
花比较大的就马上pay。如果用external account还过去的话,就不要等那个balance出
来再pay,可以直接push进去。
l*i
35 楼
肠子这样的组织 能不能石蜡包埋切片 应该一样可以看到lacz
【在 s******r 的大作中提到】
: 太感谢了。
: 我就是收集tissue作染色。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
: 话,
: 是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
:
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
【在 s******r 的大作中提到】
: 太感谢了。
: 我就是收集tissue作染色。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
: 话,
: 是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
:
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
u*n
37 楼
不是我多消费银行才有的赚吗?
B*e
41 楼
上次不是有个大厨说灌到那种靠挤的塑料瓶子里么?
K*5
45 楼
扒出来以后有个瓶颈啊 上面还有个拧下来的盖子
z*e
46 楼
是的,一方面银行希望你花钱,完全没有balance和还款记录是负面影响。
但是另一方面,你借债越多,银行风险越高,所以balance占credit limit高于某个百
分比也是负面影响。
但是另一方面,你借债越多,银行风险越高,所以balance占credit limit高于某个百
分比也是负面影响。
x*n
49 楼
如果只有一个账号,当然是真的。
revolving account,比如2个账号,1k和9k,花了3k,就是3k除以10k=30%,25%-50%,
不扣分也不加分。低于25%,加分。
revolving account,比如2个账号,1k和9k,花了3k,就是3k除以10k=30%,25%-50%,
不扣分也不加分。低于25%,加分。
M*s
52 楼
先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。
s*r
54 楼
谢谢,大包子奉上。
还有一个小疑问,切好的片子可以直接-80C保存吧,不用先室温Dry吧。
先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。
【在 M******s 的大作中提到】
: 先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
: 续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
: 和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
: 所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
: 织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
还有一个小疑问,切好的片子可以直接-80C保存吧,不用先室温Dry吧。
先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
话,是不是不固定,不泡蔗糖,直接速冻也没有问题。
这个问题是因为酶含量高,对于低温保存组织是没有问题的,80度冰柜里基本没有活性
了,不用担心,切片时间短,切完冻起来也没事,但是要用以前从冰箱里拿出来就要尽
快做。
【在 M******s 的大作中提到】
: 先染lacz再石蜡包埋再切,形态会非常好,缺点也很突出,就是已经处理过,就不能连
: 续切片做近似原位比较了,比如切十张sections第一lacz第二he第三ihc....这样第一
: 和最后相差不过0.1mm,基本可以认为是同一位置,形态也差不多,肉眼看是一样的。
: 所以如果多用途组织不适合先染lacz再石蜡包埋。
: 如果我没有理解错的话,不固定的组织,就不用泡蔗糖溶液了吧。
: 对,没有固定的组织绝对不能泡,会烂掉
: 要是泡蔗糖溶液,我看一般说是等组织沉到溶液里,这个一般大概会要多长时间。
: 固定后泡糖,实际上光沉底是不够的,尤其对于大块组织是这样,不过小组织24h,大组
: 织48h,中间换一到二次液体,基本就可以了
: 还有一个肠子的问题,看到有人说肠组织很容易autolysis,我如果想看其中的lacZ的
M*s
56 楼
要室温 air dry, 1 到2h 就可以,否则可能会有冰晶,形态会破坏掉
M*s
58 楼
我们用室温真空, 10分钟就好
普通air dry, 薄片30分,厚片1小时,振动机切片2小时,你这个半到一小时
普通air dry, 薄片30分,厚片1小时,振动机切片2小时,你这个半到一小时
A*0
60 楼
赞专业!赞耐心!大赞!
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
cryoprotection
【在 M******s 的大作中提到】
: Mouse tissue请问大家一般是先fix,还是先frozen?
: 看是什么目的用途,传统组织学用途先fix,其他用途例如dna,rna 或不适于fix的组织
: 学用途先freeze.
: 一般组织在-80C冰箱能不能长期存放,固定之后冰冻,能不能保质期长一点。
: 当然能长期放,固定或许保质期会长,但这不是重点,重点还是你的目的和组织的用途
: ,另外一点一定要注意,fix后的组织要冰冻保存,一定要经过tissue cryoprotection
: ,传统做法就是糖溶液浸泡。
: 如果直接冰冻,那些有空腔的组织比如肠子,胃是不是先得灌一些OCT。或者新鲜肠子
: 能像福尔马林固定那样切开,再卷成卷后冰冻。
: 都可以,其实因为要切成段再冻到oct里,不必纵向切开,也不必专门去灌,oct自然会
g*z
61 楼
BBB有种油瓶挺好的:
http://www.bedbathandbeyond.com/product.asp?SKU=12132395
【在 g****a 的大作中提到】
: 实在不行只能这样了
http://www.bedbathandbeyond.com/product.asp?SKU=12132395
【在 g****a 的大作中提到】
: 实在不行只能这样了
S*9
63 楼
绝对专业
收藏
收藏
M*5
64 楼
收藏
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