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Trypsin EDTA

Trypsin EDTA# Biology - 生物学

s*e2011-12-06 08:12

1 楼

上周出去开会一个星期，长途自己开车过去的，会上前几天准备自己的talk竞争一个
junior investigator award，觉得自己还很有希望，后面几天就是提心吊胆，最后也
没有拿到，又长途开回来。
这个星期一直在写proposal,不知道为啥每天都觉得很累，非常的疲惫。我也每天回家
下午晚上的时候锻炼一下，但是还是觉得疲惫。
大家有啥建议没？我老婆说是因为卧室的家具有味道，去年在Macy's买的。

d*d2011-12-06 08:12

2 楼

grace period期间，还能工作么？但是non paid，以后再补回来，这样的能行么？

l*o2011-12-06 08:12

3 楼

之前的贴子上了主页，非我所愿，只好放弃。请版主删除之前那个贴子，我在该贴后有
跟贴说明。
发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:40:56 2013, 美东)
哈哈，
如果别的网友判断出我是女妄想狂，那这个判断可能是非常合情合理的。
因为，我绝大多数根据证据，都还没摆出来讲呢。
你就不同了，你是知情人啊。这样评价，岂不是太搞笑了？！
另外，RAY只写了一句“清华出你这号人”，就被你夸大成了“千年”“资深”妄想“
狂”。
须知，这三对引号里的词所表现出来的情况，那得有多经年累月的积累实践，才能享得
啊！
RAY，你居然只用了一句话，就获得了这样深厚的评价。dreamfly实在是太……了（因
写时实在不知如何形容，只好省略号了。）

r*a2011-12-06 08:12

4 楼

最近在做组织的FACS，用Trypsin和collagenase处理
我用的是10X Trypsin EDTA，后来发现EDTA是Trypsin和collagenase的抑制剂
Trypsin Inhibitors:
* Pancreatic-, soybean-, lima bean-, and egg white- trypsin inhibitors (
see section on Trypsin Inhibitors)
* DFP
* Aprotinin
* Ag+
* Benzamidine
* EDTA
Collagenase Inhibitors:
* EDTA, EGTA
* Cysteine, histidine
* DTT
* 2-mercaptoethanol
* o-phenanthroline
* Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+
* Not inhibited by DFP or serum
(White and White 1997)
然后，我加了CaCl2，它既可以抑制EDTA，又是collagenase的激活剂...不幸的是，做
流式的时候，facs flow回流了一点，马上就形成了大量的絮状沉淀...我的样品就这样
毁啦:(
我就不解了，这些公司怎么把trypsin和EDTA放在一起呢？
我知道，一般消化培养的细胞用PBS加EDTA处理一下，去掉这些二价离子，然后用
trypsin消化细胞，效果很好。但是也没有一起用啊！
各位前辈可不可以解释一下，两个在一起是为了什么目的啊？然后再给一点关于组织流
式时，怎么分离细胞的建议啊！折腾了很长时间了...

f*h2011-12-06 08:12

5 楼

身体累，说明你需要休息和调整。
建议你花一星期去vacation, 手机不开，网络不上，电视不看。
估计回来症状全无。

【在 s**********e 的大作中提到】

: 上周出去开会一个星期，长途自己开车过去的，会上前几天准备自己的talk竞争一个
: junior investigator award，觉得自己还很有希望，后面几天就是提心吊胆，最后也
: 没有拿到，又长途开回来。
: 这个星期一直在写proposal,不知道为啥每天都觉得很累，非常的疲惫。我也每天回家
: 下午晚上的时候锻炼一下，但是还是觉得疲惫。
: 大家有啥建议没？我老婆说是因为卧室的家具有味道，去年在Macy's买的。

l*o2011-12-06 08:12

6 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: --（1）一只母狗——恶口骂僧累世转狗
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Feb 21 04:04:52 2013, 美东)
谢谢您发文解释。：）

如果您的忏悔是基于迷信，末学我恕难接受。：）
比如，您是否亲见自己前世不可计数的错事？：）
我判断您并不真知自己前世错事。故此，我不肯接受您空中楼阁的忏悔，但我赞叹和随
喜您的忏悔和谦虚的心态！
J真地该向您学习您的这种精神。我不要求他向我道歉，但是我建议他向您学习您忏悔
的态度。
您的网名并不出名，但是，相比之下，您无故向我忏悔的行为，与大名鼎鼎的J在我心
目中知错死撑的形象相比，形成两个极端。果然于佛法修行中，不可看貌于外相。您的
忏悔令我赞叹，而J的死撑令我厌恶。我建议J多多与您亲近向您学习请教。：）
我所写是增补，因有感买椟还珠之意而写。各人有各人的缘法，读者自会各有所得。
此生不向今生度,更待何生度此身。
您末段所写，我不作其他实际具体应答，空谈无益。

d*n2011-12-06 08:12

7 楼

同感，很累，心累，什么都不想做。每天对着电脑发呆。连看八卦都觉得索然无味。

【在 s**********e 的大作中提到】

l*o2011-12-06 08:12

8 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: --（1）一只母狗——恶口骂僧累世转狗
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 09:49:53 2013, 美东)
“善护口业”——jessie911写这四个字令我有些悲从中来。
请大家看看我，一个曾经深居简出、深信佛法的人，一个曾发愿不伤害别人的人，如今
在网上正在做什么？写到这里，不禁潸然泪下。
大家看我这样如今被人以害度我，牵出我不修的无常命运。岂能不悚然而惊！网友趁着
还有向佛之心，多尽力吧。也算送我一些福气。
我被J等所害，早就不打坐了。于网上求证，或许造下口业。
原因何在？
一者自身业障，
二者对境是J、QXC。
我不欲在网上求证，我曾主动布施以期弥补我于网上求证对对方所带来的负面影响，我
曾主动布施以期感得对方以直心真实语回应我。我一直坚持私下求证至今。
我所求不是为了指责谁，我所求不是为了最终一定要让J和QXC承认做过什么。
我所求的只有真相。只不过，真相是他们做过什么或者没有做过什么。
我在淘宝买的东西今天到，因误会，故与卖家沟通良久，最后真相清楚之后，我向对方
道歉。难道我和对方沟通的目的就是为了让他们补寄我本来以为会有的切割片打磨片
吗？当然不是，因为真相刚刚清楚，我就立即道歉。
我不欲在网上过多的讲解，不欲赞己贬他（纵然可能会流露出这样的文字，但我会留意
），我甚至在网上自毁声誉，难道，我为的是求证出一个我想要的结果吗？当然不是，
我为的是求证出到底真相是什么？！只不过我因自身所知根据证据，对真相到底如何，
有一个大致的判断罢了，外加个人喜恶的反应，而这些是人之常情。
网上求证，发心稍有不正，后果就可能会很严重。我希望J当年向WaiChi求证远程治病
的心态如果完全正确，我希望能够与之一脉相承。

h*w2011-12-06 08:12

9 楼

这种情况一般拿一个GRANT就好了,去年这时候我也差不多情况,拿了以后就好了,然后又
是快一年啥也没有,估计到年底前拿不到下一个我又会这样了...
坚持住,有些坚持不住的最后要么拿不到T,要么拿了T就开始混了..

l*o2011-12-06 08:12

10 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:48:58 2013, 美东)
你明知RAY不是我。
你与我通过电话，亲耳听到过我的声音。
RAY呢？你与RAY通过电话吗？
我记得NUN还请RAY帮她放东西放了好久呢。
你这样妄语，是发泄还是什么？你难道在版上、尤其是WISDOM版上，以佛子的身份公开
妄语？
建议你速速反省，如有妄语，忏悔为上！

E*e2011-12-06 08:12

11 楼

我也是新PI一名，我想云老师所说甚是，熬到第一个grant会好一些，但是压力是常态
。我有时侯就把它当做一个过程，如果自己真的适合这行自然会survive，如果真的弄
得鸡飞狗跳血肉模糊也对不起自己，毕竟只是一份工而已。看看世界杯，喝喝酒吧。
天下风云出我辈，一入江湖岁月催。
皇图霸业谈笑中，不胜人生一场醉。

【在 s**********e 的大作中提到】

l*o2011-12-06 08:12

12 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 10:46:46 2013, 美东)
谢谢！
看到你的文字，我心里开心。：）
嘿嘿，谁有反对我的看法，请多多发表意见。象bigfool这样批评我的人越多，我越开
心。
感谢您！
哈哈，lila，我是不是很心宽呢？

f*e2011-12-06 08:12

13 楼

没用，看前几天云老师的度假后心情贴。。。

【在 f*******h 的大作中提到】

: 身体累，说明你需要休息和调整。
: 建议你花一星期去vacation, 手机不开，网络不上，电视不看。
: 估计回来症状全无。

l*o2011-12-06 08:12

14 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:02:10 2013, 美东)
你去投诉好了。
版主自然会给我申诉的机会，那时我自然会出示证据。
这么好一个洗刷你的机会，你可别错过！
当然，我知道你若投诉是因为“龌龊”，我自然会有证据备索。
你若投诉肯定不是因为“光明”，哈哈。

o*c2011-12-06 08:12

15 楼

深有同感!今年又是颗粒无收.感觉就一个字:累.
不光身体累,心更累.持续的焦虑让我这几年衰老了10岁都不止.

【在 h*****w 的大作中提到】

: 这种情况一般拿一个GRANT就好了,去年这时候我也差不多情况,拿了以后就好了,然后又
: 是快一年啥也没有,估计到年底前拿不到下一个我又会这样了...
: 坚持住,有些坚持不住的最后要么拿不到T,要么拿了T就开始混了..

l*o2011-12-06 08:12

16 楼

发信人: ray (嗡嘛呢呗咪吽), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:54:04 2013, 美东)
别说那个。。说来惭愧。东西还在我这里。。有空该寄了

【在 l*****o 的大作中提到】

: 发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
: 标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
: 发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:02:10 2013, 美东)
: 你去投诉好了。
: 版主自然会给我申诉的机会，那时我自然会出示证据。
: 这么好一个洗刷你的机会，你可别错过！
: 当然，我知道你若投诉是因为“龌龊”，我自然会有证据备索。
: 你若投诉肯定不是因为“光明”，哈哈。

g*h2011-12-06 08:12

17 楼

welcome to this profession.

【在 s**********e 的大作中提到】

l*o2011-12-06 08:12

18 楼

发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 08:57:21 2013, 美东)
你是不是J，佛菩萨真实知道；这里修出神通的人可知；没神通的人，可以凭自己的判
断。甚至连mitbbs版务，都可以凭你的IP来源等内部信息做出判断（此贴后的IP来源不
算）。
我一直强调的是，我判断你是J。而你对我的求证，并没有表现出多少正常之处！
我请你直面解释：
http://www.mitbbs.ca/article_t/Wisdom/31290431.html
2009年中旬danalake对J的看法：J是单纯纯洁的人
我相信lila你肯定可以解释得非常完美。:)
我另请问你，你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？

J*e2011-12-06 08:12

19 楼

macys的家具确实有味，我们去年买了两套 bed sets，好大的味，全退了。
后来留了套macys餐桌，还是问了网上某些买过的人有没有味道，人说没有，于是就没
cancel，结果deliver了以后还是味很大，懒的退了，直接扔到house外面的shed里面散
味去了。
听你这么说，看样子散一年都会有味啊。。。sigh
真有味的话，还是不要在里面住了，长期对身体不好。你老婆说的是对的。

【在 s**********e 的大作中提到】

y*n2011-12-06 08:12

20 楼

看样子，偶好像错过了啥热闹。

【在 l*****o 的大作中提到】

: 之前的贴子上了主页，非我所愿，只好放弃。请版主删除之前那个贴子，我在该贴后有
: 跟贴说明。
: 发信人: linxiao (临潇), 信区: Wisdom
: 标题: Re: 春节快乐，顺便做个小小的民意调查
: 发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 22 11:40:56 2013, 美东)
: 哈哈，
: 如果别的网友判断出我是女妄想狂，那这个判断可能是非常合情合理的。
: 因为，我绝大多数根据证据，都还没摆出来讲呢。
: 你就不同了，你是知情人啊。这样评价，岂不是太搞笑了？！
: 另外，RAY只写了一句“清华出你这号人”，就被你夸大成了“千年”“资深”妄想“

o*e2011-12-06 08:12

21 楼

累的时候就不要锻炼了，没事儿到外面走走，睡足觉。另外不要说太多话，很耗气，我
有个老师说没课的时候他能一天就说8句话。

l*o2011-12-06 08:12

22 楼

lila, 我请你直面解释：
http://www.mitbbs.ca/article_t/Wisdom/31290431.html
2009年中旬danalake对J的看法：J是单纯纯洁的人
我另请问你，你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？

a*q2011-12-06 08:12

23 楼

Costco的躺椅，散了两年的味了，还是没有全消。Macys的一个桌子到还好。

【在 J*******e 的大作中提到】

: macys的家具确实有味，我们去年买了两套 bed sets，好大的味，全退了。
: 后来留了套macys餐桌，还是问了网上某些买过的人有没有味道，人说没有，于是就没
: cancel，结果deliver了以后还是味很大，懒的退了，直接扔到house外面的shed里面散
: 味去了。
: 听你这么说，看样子散一年都会有味啊。。。sigh
: 真有味的话，还是不要在里面住了，长期对身体不好。你老婆说的是对的。

l*a2011-12-06 08:12

24 楼

我在不了解你的真实动机之前,不会配合你的任何要求.
我对你一无所知,我根本搞不明白你要干什么.
也不明白为什么把我牵涉进去.
我和J的区别这样明显,真是不好说你什么了.
我过去的那些只言片语什么都说明不了,我没啥要解释.
而且都过去好几年了,中共都换届了,王立军都夜
逃美国令事馆了,薄希来的老婆都杀人被抓了,
赵本山都不上春晚了,李双江的儿子都犯事了,
....不是你不明白,这世界变化快.

【在 l*****o 的大作中提到】

: lila, 我请你直面解释：
: http://www.mitbbs.ca/article_t/Wisdom/31290431.html
: 2009年中旬danalake对J的看法：J是单纯纯洁的人
: 我另请问你，你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？

d*y2011-12-06 08:12

25 楼

有人还以为你说要走就会真消失呢，哈哈！
太不了解这些一起灌过水的ID了

【在 l**a 的大作中提到】

: 我在不了解你的真实动机之前,不会配合你的任何要求.
: 我对你一无所知,我根本搞不明白你要干什么.
: 也不明白为什么把我牵涉进去.
: 我和J的区别这样明显,真是不好说你什么了.
: 我过去的那些只言片语什么都说明不了,我没啥要解释.
: 而且都过去好几年了,中共都换届了,王立军都夜
: 逃美国令事馆了,薄希来的老婆都杀人被抓了,
: 赵本山都不上春晚了,李双江的儿子都犯事了,
: ....不是你不明白,这世界变化快.

l*a2011-12-06 08:12

26 楼

我早就说过我根本就不行的.
我说过我无名无姓,不值得提起,我不和这里的人比,
这里的人真的都半斤八两,都不咋样.
我好歹见过厉害的,我根本就不能比的.
没办法比,徳和根基差的太远.
我好歹有自知之明,我很差的,我不是故意谦虚.
我说的是实话.
各方面都不行的....十万八千里,我好歹知道这点.
所以,我说这里没什么意思.

【在 d******y 的大作中提到】

: 有人还以为你说要走就会真消失呢，哈哈！
: 太不了解这些一起灌过水的ID了

r*n2011-12-06 08:12

27 楼

你网上乱骂不咋样，最好不要在家人孩子面前也那样。

【在 d******y 的大作中提到】

: 有人还以为你说要走就会真消失呢，哈哈！
: 太不了解这些一起灌过水的ID了

l*o2011-12-06 08:12

28 楼

lila, 我请你直面解释：
http://www.mitbbs.ca/article_t/Wisdom/31290431.html
2009年中旬danalake对J的看法：J是单纯纯洁的人
lila的回答：我过去的那些只言片语什么都说明不了,我没啥要解释.不是你不明白,这
世界变化快.
请直接解释。别说虚言。
我另请问你，你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？
另外，你和J的区别确实非常明显，但也有类似与相同处，印象中我未明言。故：
你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？

【在 l**a 的大作中提到】

l*a2011-12-06 08:12

29 楼

你是跟WAICHI学过根法的GYFM弟子吗?
你和WAICHI现在有联系吗?

【在 l*****o 的大作中提到】

: lila, 我请你直面解释：
: http://www.mitbbs.ca/article_t/Wisdom/31290431.html
: 2009年中旬danalake对J的看法：J是单纯纯洁的人
: lila的回答：我过去的那些只言片语什么都说明不了,我没啥要解释.不是你不明白,这
: 世界变化快.
: 请直接解释。别说虚言。
: 我另请问你，你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？
: 另外，你和J的区别确实非常明显，但也有类似与相同处，印象中我未明言。故：
: 你是否同意我将所有你知的信息公开于网上？

r*n2011-12-06 08:12

30 楼

好玩，大家都跟老七学。

【在 l**a 的大作中提到】

: 你是跟WAICHI学过根法的GYFM弟子吗?
: 你和WAICHI现在有联系吗?