大家碰到过膜蛋白在胞质中染色的吗?# Biology - 生物学v*a2012-01-24 08:011 楼很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到过吗?
s*s2012-01-24 08:013 楼你用的和文献上是一种细胞么?nuclear【在 v***a 的大作中提到】: 很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear: 的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到: 过吗?
v*d2012-01-24 08:014 楼1 膜蛋白在ER里合成,golgi里修饰 最后运到目的地。2 细胞内到处都是膜3 抗体只有少数1部分能用来染色,还有特异性的问题。最好通过比较文献和overexpress tagged protein 来确定抗体是不是可靠好用nuclear【在 v***a 的大作中提到】: 很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear: 的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到: 过吗?
v*a2012-01-24 08:015 楼我做了好几个膜蛋白,都出现类似的情况。抗体有识别cytoplasmic的,也有识别extracellular的。我用的methanol固定的。是固定剂的缘故吗【在 n***w 的大作中提到】: 这个蛋白有其他的pool吗? 还是就在膜上?如果是这样,你抗体识别哪个部分?: 你怎么处理你样品的?PFA固定还是Methanol?
v*a2012-01-24 08:016 楼不是……但是有一个做的膜蛋白的染色跟一篇JCB的paper上的一样,核周染色很深(但细胞不是同一种)。这个能算match吗?不知道如果写paper如何解释?【在 s******s 的大作中提到】: 你用的和文献上是一种细胞么?: : nuclear
v*a2012-01-24 08:017 楼多谢!学习了。【在 v*********d 的大作中提到】: 1 膜蛋白在ER里合成,golgi里修饰 最后运到目的地。: 2 细胞内到处都是膜: 3 抗体只有少数1部分能用来染色,还有特异性的问题。最好通过比较文献和: overexpress tagged protein 来确定抗体是不是可靠好用: : nuclear