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Tag个蛋白之后的Western Blot问题

Tag个蛋白之后的Western Blot问题# Biology - 生物学

g*t2012-01-31 08:01

1 楼

手上有现金10万，现准备买个房，已经快进入contract了
contract上写的首付10万，但是这个房子便宜，只要20万，所以可以首付10万也可以首
付5万，
考虑不太久的将来，还会买二房，现在应该怎么办？
选择1：首付10万，30年贷款，买二房时抵押贷款付首付
选择2：首付10万，15年贷款，买二房时抵押贷款付首付
选择3：首付 5万，30年贷款，买二房时直接付首付
应该怎么选择呢？

c*e2012-01-31 08:01

2 楼

不是休眠hibernate。
从“开始”选择stand by以后，先黑下屏，然后就自动wake up了。
以前还可以的，不知道什么时候就不行了。goole了一下说去掉网卡的wake up功能，试
了也不行。
请教怎么办？

M*22012-01-31 08:01

3 楼

这个问题困扰了些日子
有没有可能测序结果是对的，结果WB测不出来（肯定不是抗体问题）？
有没有可能用TAG的抗体测出来（比如GFP），但是用蛋白本身的抗体测不出来？
这种情况是不是就只能重做了？
谢谢

c*l2012-01-31 08:01

4 楼

option 3

c*e2012-01-31 08:01

5 楼

5个包子答谢第一个帮助解决问题的朋友。

b*n2012-01-31 08:01

6 楼

你的针对目的蛋白的抗体是自己做的吧，可能效价不够
能检测到重组蛋白是因为重组蛋白的量比内源性蛋白高几个数量级
这里面可能的原因
一是蛋白本身免疫原性不强
二是抗体制备中的问题，比如你制备重组蛋白（抗原）加了detergent，这会干扰打兔
子的抗体的效价。
针对Tag的抗体是优化的，效价一般有保证

【在 M*****2 的大作中提到】

: 这个问题困扰了些日子
: 有没有可能测序结果是对的，结果WB测不出来（肯定不是抗体问题）？
: 有没有可能用TAG的抗体测出来（比如GFP），但是用蛋白本身的抗体测不出来？
: 这种情况是不是就只能重做了？
: 谢谢

g*r2012-01-31 08:01

7 楼

二房来出租?

【在 g*********t 的大作中提到】

: 手上有现金10万，现准备买个房，已经快进入contract了
: contract上写的首付10万，但是这个房子便宜，只要20万，所以可以首付10万也可以首
: 付5万，
: 考虑不太久的将来，还会买二房，现在应该怎么办？
: 选择1：首付10万，30年贷款，买二房时抵押贷款付首付
: 选择2：首付10万，15年贷款，买二房时抵押贷款付首付
: 选择3：首付 5万，30年贷款，买二房时直接付首付
: 应该怎么选择呢？

u*n2012-01-31 08:01

8 楼

电脑无法待机问题是经常碰到的问题，一般是由于电脑中毒，电脑启动程序没装好等等
的原因导致的
1. 电源管理方案设置不当，导致“待机”选项灰色！
这个问题是因为高级电源选项没有打开，你可以在控制面包上打开，打开之后问题可解
决！
2. 设备驱动器如光驱正在使用中，应该将光驱中的光碟取出。
3. 驱动程序安装问题，可以重装主板驱动以及其他的驱动程序。
4. 用户禁用了虚拟内存。针对这个原因，只需重新启用虚拟内存就可以排除故障。
5.系统的临时空间不足。特别是如果电脑的C盘剩余空间小于电脑的物理内存容量时，
就更有可能出现这个故障。想解决这个问题，就需要进行合理的分区，保证系统分区有
足够的剩余空间，也就是说至少要保证系统分区的剩余硬盘空间为物理内存的两倍以上。
6. 检查是否有待机的权限，登录用户是否为管理员！
7. 待机文件损坏，导致系统无法打击！
8. 电脑电源硬件故障，这个问题最好换个电源！

M*22012-01-31 08:01

9 楼

抗体均是公司买来的
不是自己制备的
大家没有遇到过这种问题么？？

k*u2012-01-31 08:01

10 楼

养二奶吧。

【在 g********r 的大作中提到】

: 二房来出租?

l*g2012-01-31 08:01

11 楼

这么多原因。一一试过，差不多累死了。
花这么多时间，要是律师或医生的话，挣的钱可以买几个高端电脑了。

【在 u******n 的大作中提到】

: 电脑无法待机问题是经常碰到的问题，一般是由于电脑中毒，电脑启动程序没装好等等
: 的原因导致的
: 1. 电源管理方案设置不当，导致“待机”选项灰色！
: 这个问题是因为高级电源选项没有打开，你可以在控制面包上打开，打开之后问题可解
: 决！
: 2. 设备驱动器如光驱正在使用中，应该将光驱中的光碟取出。
: 3. 驱动程序安装问题，可以重装主板驱动以及其他的驱动程序。
: 4. 用户禁用了虚拟内存。针对这个原因，只需重新启用虚拟内存就可以排除故障。
: 5.系统的临时空间不足。特别是如果电脑的C盘剩余空间小于电脑的物理内存容量时，
: 就更有可能出现这个故障。想解决这个问题，就需要进行合理的分区，保证系统分区有

v*a2012-01-31 08:01

12 楼

会不会是因为抗体target的sequence和你要检测的不一致？或者就是蛋白的活性啊、
conformation在你的recombinant protein和抗体之间不一致

【在 M*****2 的大作中提到】

l*h2012-01-31 08:01

13 楼

老吴,过分.

【在 k**u 的大作中提到】

: 养二奶吧。

u*n2012-01-31 08:01

14 楼

巴菲特每分钟能赚4.3万港元,你码这些废话，他用来买白粉都食si你啦。

【在 l****g 的大作中提到】

: 这么多原因。一一试过，差不多累死了。
: 花这么多时间，要是律师或医生的话，挣的钱可以买几个高端电脑了。

k*u2012-01-31 08:01

15 楼

你是谁嘛，亮一亮身份。我认识你么？

【在 l*******h 的大作中提到】

: 老吴,过分.

D*o2012-01-31 08:01

16 楼

搜我前面的帖子。用mce standby tool试试

，试

【在 c****e 的大作中提到】

: 不是休眠hibernate。
: 从“开始”选择stand by以后，先黑下屏，然后就自动wake up了。
: 以前还可以的，不知道什么时候就不行了。goole了一下说去掉网卡的wake up功能，试
: 了也不行。
: 请教怎么办？

l*g2012-01-31 08:01

17 楼

一点都没有针对你的意思，只是感叹Windows不给力，一不小心就又被言多必失了，躺
着也要中枪。

【在 u******n 的大作中提到】

: 巴菲特每分钟能赚4.3万港元,你码这些废话，他用来买白粉都食si你啦。