牛人们，如何一次同时敲除N个基因，就像做克隆一样，一次整10 - 未名空间MITBBS历史存档

牛人们，如何一次同时敲除N个基因，就像做克隆一样，一次整10# Biology - 生物学

y*32012-02-15 08:02

1 楼

发几个最近吃的菜，看到变叔给我发的包纸了，感动ING
还有谢谢大家的祝福，宝很健康，就是现在忙滴不行了
这几个菜很久很久没吃了，尤其是炸藕荷，就简单说说面筋塞肉和炸藕荷
面筋塞肉：
用比较肥的肉馅，多打水打油放鸡蛋，味道较重，拿筷子塞到面筋里
然后就用烧红烧肉的方法，你懂的
炸藕荷：
同样先调肉馅同上，然后调面糊糊，稍稠，需加葱末上色
片好的藕中间夹肉馅，过面糊糊进油锅
新鲜炸出来的皮外脆里肉嫩，超香的

s*o2012-02-15 08:02

2 楼

比如说AT&T的pull是不是影响小一点啊，毕竟这个hard pull说明不了我在四处寻求资
金啥的
要是一样的话那就悲剧了，最近几个月被AT&T hard pull了好几回

h*n2012-02-15 08:02

3 楼

听说交了485后最好不要更换地址？
办perm的时候呢？最近要开始办，又要搬家，而且短期内可能还要搬。是不是应该留个
朋友的永久地址呢？

m*r2012-02-15 08:02

4 楼

【以下文字转载自 WaterWorld 讨论区】
发信人: nengneng (nengneng), 信区: WaterWorld
标题: 昨天hiking在森林里采到了个灵芝
发信站: BBS 未名空间站 (Sun May 16 08:10:10 2010, 美东)
不过和国内的不一样，我采到的灵芝没有把，好像上面的那一大片直接在根部连接到朽
木上的。
这个灵芝我怎么处理才能让他风干从而未来不会烂掉呢？(或者不处理也不会烂？因为
很硬，和树干的硬度没什么区别。)
美国的灵芝算什么种类，有药用价值吗？

q*d2012-02-15 08:02

5 楼

谁有简单易行的方法，需要敲除很多基因，一个个的来还不累死人!这方法到底有木有
啊，目标菌是Saccharomyces cerevisiae.谢谢！

B*e2012-02-15 08:02

6 楼

青菜好翠绿啊

【在 y****3 的大作中提到】

: 发几个最近吃的菜，看到变叔给我发的包纸了，感动ING
: 还有谢谢大家的祝福，宝很健康，就是现在忙滴不行了
: 这几个菜很久很久没吃了，尤其是炸藕荷，就简单说说面筋塞肉和炸藕荷
: 面筋塞肉：
: 用比较肥的肉馅，多打水打油放鸡蛋，味道较重，拿筷子塞到面筋里
: 然后就用烧红烧肉的方法，你懂的
: 炸藕荷：
: 同样先调肉馅同上，然后调面糊糊，稍稠，需加葱末上色
: 片好的藕中间夹肉馅，过面糊糊进油锅
: 新鲜炸出来的皮外脆里肉嫩，超香的

g*g2012-02-15 08:02

7 楼

最好不搬家，或是有个相对固定的地址。
不然基本上收不到USCIS的东西

z*n2012-02-15 08:02

8 楼

是这种吗?
http://www.healthline.com/blogs/outdoor_health/uploaded_images/amanita_musca
ria-770480.jpg
是的话就要恭喜你了. 吃了马上飞升!

【在 m*******r 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 WaterWorld 讨论区】
: 发信人: nengneng (nengneng), 信区: WaterWorld
: 标题: 昨天hiking在森林里采到了个灵芝
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun May 16 08:10:10 2010, 美东)
: 不过和国内的不一样，我采到的灵芝没有把，好像上面的那一大片直接在根部连接到朽
: 木上的。
: 这个灵芝我怎么处理才能让他风干从而未来不会烂掉呢？(或者不处理也不会烂？因为
: 很硬，和树干的硬度没什么区别。)
: 美国的灵芝算什么种类，有药用价值吗？

s*s2012-02-15 08:02

9 楼

以前貌似学过，yeast能够做单倍体mate？能做genetics就是筛呗
不知道直接ko怎么做？homo rec?

【在 q*****d 的大作中提到】

: 谁有简单易行的方法，需要敲除很多基因，一个个的来还不累死人!这方法到底有木有
: 啊，目标菌是Saccharomyces cerevisiae.谢谢！

y*32012-02-15 08:02

10 楼

【在 y****3 的大作中提到】

: 发几个最近吃的菜，看到变叔给我发的包纸了，感动ING
: 还有谢谢大家的祝福，宝很健康，就是现在忙滴不行了
: 这几个菜很久很久没吃了，尤其是炸藕荷，就简单说说面筋塞肉和炸藕荷
: 面筋塞肉：
: 用比较肥的肉馅，多打水打油放鸡蛋，味道较重，拿筷子塞到面筋里
: 然后就用烧红烧肉的方法，你懂的
: 炸藕荷：
: 同样先调肉馅同上，然后调面糊糊，稍稠，需加葱末上色
: 片好的藕中间夹肉馅，过面糊糊进油锅
: 新鲜炸出来的皮外脆里肉嫩，超香的

c*n2012-02-15 08:02

11 楼

据说网上申请改了新地址，也还会送到旧地址去

【在 h*********n 的大作中提到】

: 听说交了485后最好不要更换地址？
: 办perm的时候呢？最近要开始办，又要搬家，而且短期内可能还要搬。是不是应该留个
: 朋友的永久地址呢？

c*o2012-02-15 08:02

12 楼

和嗑药那种飞升有区别吗？

【在 z*****n 的大作中提到】

: 是这种吗?
: http://www.healthline.com/blogs/outdoor_health/uploaded_images/amanita_musca
: ria-770480.jpg
: 是的话就要恭喜你了. 吃了马上飞升!

q*d2012-02-15 08:02

13 楼

mate 有点儿耽误时间，先得生孢又得拆孢的，用多个marker一次同时缺失几个吧，效
率又不一定能够保证。就是不知道有啥高级手段，我想KO哪几个基因，只要设计好，一
次就搞定，至少得挑3个转化子，有一个正确的，要不然就太费劲了！

【在 s******s 的大作中提到】

: 以前貌似学过，yeast能够做单倍体mate？能做genetics就是筛呗
: 不知道直接ko怎么做？homo rec?

y*32012-02-15 08:02

14 楼

【在 y****3 的大作中提到】

: 发几个最近吃的菜，看到变叔给我发的包纸了，感动ING
: 还有谢谢大家的祝福，宝很健康，就是现在忙滴不行了
: 这几个菜很久很久没吃了，尤其是炸藕荷，就简单说说面筋塞肉和炸藕荷
: 面筋塞肉：
: 用比较肥的肉馅，多打水打油放鸡蛋，味道较重，拿筷子塞到面筋里
: 然后就用烧红烧肉的方法，你懂的
: 炸藕荷：
: 同样先调肉馅同上，然后调面糊糊，稍稠，需加葱末上色
: 片好的藕中间夹肉馅，过面糊糊进油锅
: 新鲜炸出来的皮外脆里肉嫩，超香的

c*s2012-02-15 08:02

15 楼

别吓LZ，我搬过两次家，都正确的寄到现有的地址，但是不排除USCIS范错。

z*n2012-02-15 08:02

16 楼

http://english.chinatibetnews.com/TibetdDiscovery/attachement/jpg/site2/2009
0615/0016d391de740ba08ac709.jpg
这种也不错, 就是效果差点, 用米酒冲服三次有效.

【在 m*******r 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 WaterWorld 讨论区】
: 发信人: nengneng (nengneng), 信区: WaterWorld
: 标题: 昨天hiking在森林里采到了个灵芝
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun May 16 08:10:10 2010, 美东)
: 不过和国内的不一样，我采到的灵芝没有把，好像上面的那一大片直接在根部连接到朽
: 木上的。
: 这个灵芝我怎么处理才能让他风干从而未来不会烂掉呢？(或者不处理也不会烂？因为
: 很硬，和树干的硬度没什么区别。)
: 美国的灵芝算什么种类，有药用价值吗？

s*t2012-02-15 08:02

17 楼

试试antisense morpholino oligo ,发育学斑马鱼等都用morpholino同时knock down几
个基因

s*n2012-02-15 08:02

18 楼

这不是馒头么？

【在 y****3 的大作中提到】

f*u2012-02-15 08:02

19 楼

办perm和140和你没关系，你也收不到什么。所以该搬就搬，等交485时，尽量少半或不
搬，USCIS的人IQ是没有下限的。

z*n2012-02-15 08:02

20 楼

磕药那种档次太低, 晋朝的时候都被玩烂了.

【在 c*******o 的大作中提到】

: 和嗑药那种飞升有区别吗？

q*d2012-02-15 08:02

21 楼

谢谢，我们是knock out，就是把这个基因完全从基因组里删除掉，不知道这个方法行
不行？

【在 s*******t 的大作中提到】

: 试试antisense morpholino oligo ,发育学斑马鱼等都用morpholino同时knock down几
: 个基因

y*32012-02-15 08:02

22 楼

馍馍比馒头稍硬，有嚼劲

【在 s**n 的大作中提到】

: 这不是馒头么？

r*f2012-02-15 08:02

23 楼

买了房子的路过。。。

m*r2012-02-15 08:02

24 楼

。。。俺轉來的，俺沒嗑过。
俺這就去hiking看看。

s*t2012-02-15 08:02

25 楼

不行，因为morpholino是作用在RNA上

【在 q*****d 的大作中提到】

: 谢谢，我们是knock out，就是把这个基因完全从基因组里删除掉，不知道这个方法行
: 不行？

p*y2012-02-15 08:02

26 楼

baozi

r*s2012-02-15 08:02

27 楼

同路过

【在 r****f 的大作中提到】

: 买了房子的路过。。。

e*p2012-02-15 08:02

28 楼

什么意思，这难道是大麻？

h*n2012-02-15 08:02

29 楼

没有

v*02012-02-15 08:02

30 楼

lz幸福阿.我也期盼着我婆婆的到来呢.我lg说我婆婆特会做面食, 还有炸油条阿,糖糕
阿 ,...烧饼也会....

h*n2012-02-15 08:02

31 楼

思路清晰，谢谢！

【在 f*********u 的大作中提到】

: 办perm和140和你没关系，你也收不到什么。所以该搬就搬，等交485时，尽量少半或不
: 搬，USCIS的人IQ是没有下限的。

e*p2012-02-15 08:02

32 楼

还是毒蘑菇？

l*12012-02-15 08:02

33 楼

Oxford nanopore based NGKOT
details please go to
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31637503.html
8F
and down floors.

【在 q*****d 的大作中提到】

: 谁有简单易行的方法，需要敲除很多基因，一个个的来还不累死人!这方法到底有木有
: 啊，目标菌是Saccharomyces cerevisiae.谢谢！

F*t2012-02-15 08:02

34 楼

好婆婆
妖子mm太幸运了

r*l2012-02-15 08:02

35 楼

我当年改了地址，但是还寄到旧地址。根据大家的反馈，改了地址没用的居多，你可能
运气比较好。

【在 c******s 的大作中提到】

: 别吓LZ，我搬过两次家，都正确的寄到现有的地址，但是不排除USCIS范错。

y*32012-02-15 08:02

36 楼

谢谢歪歪
到时候要上PP看吖～～～也让偶眼馋一把哈哈

【在 v********0 的大作中提到】

: lz幸福阿.我也期盼着我婆婆的到来呢.我lg说我婆婆特会做面食, 还有炸油条阿,糖糕
: 阿 ,...烧饼也会....

b*u2012-02-15 08:02

37 楼

有pending case换地址,必需两步都要走
If you have moved, you need to follow two different steps:
* Step 1: File a Form AR-11 (This changes your address in our master
database.);
* Step 2: If you have a pending case, you must also file a Change of
Address online or call our National Customer Service Center at (800) 375-
5283. (This changes your address for the specific application you have
submitted.)
Please note that if you are a non-U.S. citizen and you have a pending case,
you must complete both steps to make sure that you comply with the
regulations and so we can reach you at your correct address.

y*32012-02-15 08:02

38 楼

忘了说了，还要谢谢加州老妖童鞋，豆豆妈
谢谢两只猫，以及所有的伙伙们～～
还有谁漏了？
呵呵，怎么感觉那么像是拿奖感言
对了，还要谢谢挡中央什么的，哈哈哈

【在 F*******t 的大作中提到】

: 好婆婆
: 妖子mm太幸运了

a*x2012-02-15 08:02

39 楼

正解

,

【在 b****u 的大作中提到】

: 有pending case换地址,必需两步都要走
: If you have moved, you need to follow two different steps:
: * Step 1: File a Form AR-11 (This changes your address in our master
: database.);
: * Step 2: If you have a pending case, you must also file a Change of
: Address online or call our National Customer Service Center at (800) 375-
: 5283. (This changes your address for the specific application you have
: submitted.)
: Please note that if you are a non-U.S. citizen and you have a pending case,
: you must complete both steps to make sure that you comply with the

R*s2012-02-15 08:02

40 楼

恭喜恭喜，　馋死这个炸藕荷了．．．

【在 y****3 的大作中提到】

: 发几个最近吃的菜，看到变叔给我发的包纸了，感动ING
: 还有谢谢大家的祝福，宝很健康，就是现在忙滴不行了
: 这几个菜很久很久没吃了，尤其是炸藕荷，就简单说说面筋塞肉和炸藕荷
: 面筋塞肉：
: 用比较肥的肉馅，多打水打油放鸡蛋，味道较重，拿筷子塞到面筋里
: 然后就用烧红烧肉的方法，你懂的
: 炸藕荷：
: 同样先调肉馅同上，然后调面糊糊，稍稠，需加葱末上色
: 片好的藕中间夹肉馅，过面糊糊进油锅
: 新鲜炸出来的皮外脆里肉嫩，超香的

B*g2012-02-15 08:02

41 楼

第3次

【在 a***x 的大作中提到】

: 正解
:
: ,

a*92012-02-15 08:02

42 楼

mark

,

【在 b****u 的大作中提到】

: 有pending case换地址,必需两步都要走
: If you have moved, you need to follow two different steps:
: * Step 1: File a Form AR-11 (This changes your address in our master
: database.);
: * Step 2: If you have a pending case, you must also file a Change of
: Address online or call our National Customer Service Center at (800) 375-
: 5283. (This changes your address for the specific application you have
: submitted.)
: Please note that if you are a non-U.S. citizen and you have a pending case,
: you must complete both steps to make sure that you comply with the