z*i
2 楼
有人试过在Alexandria, VA walk in么?多谢!
f*g
3 楼
如题 谢谢
H*3
4 楼
我的情况跟前一段时间讨论的一个情况不同。
转基因植物携带overexpression promoter+gene+c terminal GFP,转到野生型里建立
过量表达突变体。基因是核编码的叶绿体蛋白,蛋白N末端一个小酞段引导蛋白
targeting到叶绿体内行使功能。根据抗性筛选到homozygotes,confocal下检测到GFP信
号在叶绿体里,非常阳性。DNA genotyping和RT-PCR检测到基因插入正常,mRNA正常,
现在的问题是western用anti-GFP抗体无法检测到全长蛋白,只有GFP大概27kD左右的
信号。因为是未知蛋白,没有特异性抗体,突变体性状也没有发表过,所以无法确定是
否融合蛋白正确表达。我唯一能想到的是蛋白合成后,送到叶绿体内被降解了。可是即
使有降解,不会全都降解吧。
请大家给点意见,好不容易建立的突变体,实在不想放弃。
转基因植物携带overexpression promoter+gene+c terminal GFP,转到野生型里建立
过量表达突变体。基因是核编码的叶绿体蛋白,蛋白N末端一个小酞段引导蛋白
targeting到叶绿体内行使功能。根据抗性筛选到homozygotes,confocal下检测到GFP信
号在叶绿体里,非常阳性。DNA genotyping和RT-PCR检测到基因插入正常,mRNA正常,
现在的问题是western用anti-GFP抗体无法检测到全长蛋白,只有GFP大概27kD左右的
信号。因为是未知蛋白,没有特异性抗体,突变体性状也没有发表过,所以无法确定是
否融合蛋白正确表达。我唯一能想到的是蛋白合成后,送到叶绿体内被降解了。可是即
使有降解,不会全都降解吧。
请大家给点意见,好不容易建立的突变体,实在不想放弃。
C*n
5 楼
问一下,你知道discover的网站吗?
谢谢!
谢谢!
h*y
6 楼
Yes, you can. Just bring your finger print notice and ID with you.
y*n
7 楼
降解 is very possible.
H*g
10 楼
How big is the linker region between your gene of interest and the GFP?
h*y
11 楼
I went before the new year in the middle in the middle of the day and there
were hardly anybody there. It took me less than 10 mins to get it done. Try
to go in the middle of the day.
were hardly anybody there. It took me less than 10 mins to get it done. Try
to go in the middle of the day.
H*3
12 楼
20 amino acids. Is it important?
i*2
14 楼
从FP地点看,上面两位应该是偶NOVA老乡啊.哈哈.老乡好!!
z*r
15 楼
是不是VA的人多,FP慢阿? 要等70天才拿到FP也太恐怖了
相关阅读
如何写book chapterhelp: crosslink co-immunoprecipitation【请问】大家参加过microRNA有关的会议吗多谢NIBS刚刚面试的新PI,有没有你认识的饶毅和方XX柱子跑干了International summer school on Ageingpaper的第二作者有用么?八卦几个 Berislav Zlokovic,Maiken Nedergaard,Costantino Iadecola急问:Postdoc fellowship 免税吗,H1b请教一下研究microRNA相关的一些问题,多谢蛋白晶体结构分析该发在哪个杂志上?国内生物民工对海外的冲击西南医学中心求一篇文献,谢谢!请教adenovirus infection 293 细胞Paper求助请教一下做过 mRNA-Protein co-Immunoprecipitation沉淀的人指导一下。讨教DNASTAR的seqbuilder请教如何测 brian extracellular glutamate concentration