genotyping digestion buffer# Biology - 生物学
f*i
1 楼
前天申的，昨天citi identitymonitor告诉我TU被pull了，因为以前的hard集中在EX，
正感到高兴呢，今天就被告知EX也被pull了。希望不要到了明天，发现EQ也被pull了…
…
正感到高兴呢，今天就被告知EX也被pull了。希望不要到了明天，发现EQ也被pull了…
…
s*a
2 楼
已经register了一家daycare,和Owner谈的时候给我们的是一周的rate，然后交了
registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
请问大家的经验是什么？谢谢！
registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
请问大家的经验是什么？谢谢！
f*i
3 楼
长期潜水，收益很多，汇报回馈。
140 485 同时， no pp.
RD: 10/13/2009
PD: 10/13/2009
RFE: 12/26/2009
RFE RD: 2/23/2010
AD:3/11/2010
Back Ground:
PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
Citation: 1,600
International and national awards: 4
Media Report: more than 20 major medias in US and China.
RFE 内容相当于从新问了一遍。 Laoda555的帖子很有帮助，感谢。
祝大家都好运！
140 485 同时， no pp.
RD: 10/13/2009
PD: 10/13/2009
RFE: 12/26/2009
RFE RD: 2/23/2010
AD:3/11/2010
Back Ground:
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Citation: 1,600
International and national awards: 4
Media Report: more than 20 major medias in US and China.
RFE 内容相当于从新问了一遍。 Laoda555的帖子很有帮助，感谢。
祝大家都好运！
S*h
4 楼
【 以下文字转载自 USANews 讨论区 】
发信人: tnc (long shot), 信区: USANews
标 题: 美国媒体的问题是少数人垄断大众媒体!
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 8 16:27:52 2017, 美东)
CNN 属于时代华纳 Time Warner，而该公司又拥有华纳兄弟，
NBC 属于有线巨头Comcast, 而它同时拥有环球影片公司，
CBS 属于新闻巨头Viacom, 而Viacom同时又是派拉蒙的母公司。
FoxNews 属于News Corp, 而News Corp 同时又是二十一世纪福克斯公司的老板。
纽约时报最大的股东是墨西哥亿万富翁Carlos Slim
华盛顿邮报属于亚马逊老板Jeff Bezos一人拥有。
大家不难看到所谓的好莱坞演艺圈和新闻媒体记者往往都属于几家大公司的签约雇员。
也不难看到全美的媒体和娱乐不过是由几十个富豪在背后掌控，以前有人提出疑问，
NBC记者回答总公司从来不干涉他们的新闻自由，真的吗？ NBC的所有高管都是comcast
任命，而这些高管再决定雇佣谁，谁是节目制作。这个控制已经不用干涉了。等于全美
几十个富豪组成中宣部了。
其实川普阵营早就有人讨论如何打破媒体垄断，并且以当初打破洛克菲勒石油垄断为例
，这就是为什么媒体，实际上是媒体后面的老板要和川普斗争到底的原因。
其余所谓左派右派，不过是看热闹，给人当枪使而已!
发信人: tnc (long shot), 信区: USANews
标 题: 美国媒体的问题是少数人垄断大众媒体!
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 8 16:27:52 2017, 美东)
CNN 属于时代华纳 Time Warner，而该公司又拥有华纳兄弟，
NBC 属于有线巨头Comcast, 而它同时拥有环球影片公司，
CBS 属于新闻巨头Viacom, 而Viacom同时又是派拉蒙的母公司。
FoxNews 属于News Corp, 而News Corp 同时又是二十一世纪福克斯公司的老板。
纽约时报最大的股东是墨西哥亿万富翁Carlos Slim
华盛顿邮报属于亚马逊老板Jeff Bezos一人拥有。
大家不难看到所谓的好莱坞演艺圈和新闻媒体记者往往都属于几家大公司的签约雇员。
也不难看到全美的媒体和娱乐不过是由几十个富豪在背后掌控，以前有人提出疑问，
NBC记者回答总公司从来不干涉他们的新闻自由，真的吗？ NBC的所有高管都是comcast
任命，而这些高管再决定雇佣谁，谁是节目制作。这个控制已经不用干涉了。等于全美
几十个富豪组成中宣部了。
其实川普阵营早就有人讨论如何打破媒体垄断，并且以当初打破洛克菲勒石油垄断为例
，这就是为什么媒体，实际上是媒体后面的老板要和川普斗争到底的原因。
其余所谓左派右派，不过是看热闹，给人当枪使而已!
q*x
5 楼
呵呵，第一次点歌，每个翻唱5个包子，期待有同学来唱啊。
很喜欢听这首歌，特别喜欢歌里从容淡然的感觉。
也借歌祝福大家无忧无虑，快乐度日。
2012就要过去了，把所有的忧愁都抛在脑后，放眼2013，淡淡一笑吧~
呵呵，忘忧草，其实就是黄花菜，英文名叫Daylily，学名为萱草。
据《诗经》记载，古代有位妇人因丈夫远征，遂在家居北堂栽种萱草，借以解愁忘忧，
从此世人称之为“忘忧草”。
苏东坡： 萱草虽微花，孤秀能自拔，亭亭乱叶中，一一芳心插。
白居易： 杜康能散闷，萱草解忘忧。
《忘忧草》
让软弱的我们懂得残忍 狠狠面对人生每次寒冷
依依不舍的爱过的人 往往有缘没有份
谁把谁真的当真 谁为谁心疼 谁是唯一谁的人
伤痕累累的天真的灵魂 早已不承认还有什么神
美丽的人生 善良的人 心痛心酸心事太微不足道
来来往往的你我遇到 相识不如相望淡淡一笑
忘忧草忘了就好 梦里知多少
某天涯海角 某个小岛 某年某月某日某一次拥抱
青青河畔草 静静等天荒地老
很喜欢听这首歌，特别喜欢歌里从容淡然的感觉。
也借歌祝福大家无忧无虑，快乐度日。
2012就要过去了，把所有的忧愁都抛在脑后，放眼2013，淡淡一笑吧~
呵呵，忘忧草，其实就是黄花菜，英文名叫Daylily，学名为萱草。
据《诗经》记载，古代有位妇人因丈夫远征，遂在家居北堂栽种萱草，借以解愁忘忧，
从此世人称之为“忘忧草”。
苏东坡： 萱草虽微花，孤秀能自拔，亭亭乱叶中，一一芳心插。
白居易： 杜康能散闷，萱草解忘忧。
《忘忧草》
让软弱的我们懂得残忍 狠狠面对人生每次寒冷
依依不舍的爱过的人 往往有缘没有份
谁把谁真的当真 谁为谁心疼 谁是唯一谁的人
伤痕累累的天真的灵魂 早已不承认还有什么神
美丽的人生 善良的人 心痛心酸心事太微不足道
来来往往的你我遇到 相识不如相望淡淡一笑
忘忧草忘了就好 梦里知多少
某天涯海角 某个小岛 某年某月某日某一次拥抱
青青河畔草 静静等天荒地老
m*t
6 楼
i want to know the digestion buffer for genotyping that doesnot purify
genomic DNA.i forgot it. let me know. thx.
genomic DNA.i forgot it. let me know. thx.
h*n
7 楼
FYI, my case is Experian only.
l*r
8 楼
一个月几千刀的学费？这是啥贵族幼儿园啊。
m*s
9 楼
cong!, baozi
l*e
10 楼
好歌啊，支持！！
D*a
11 楼
Quick Tail Prep
Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
Eppendorf tube.
Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
Incubate @ 56 C several hours to overnight.
Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
(NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
reaction (or whatever you routinely do).
Transfer supernatant to a fresh tube for storage @ 4 C, if necessary.
(NB even without transfer the DNA is stable for long time, even 2 or 3
months, didn't count.cause i ususally use an old tube for positive control
until i finish it))
Quick Tail Digestion Buffer
50 mM KCl
10 mM Tris HCl, pH 9.0
0.1% Triton X-100
Add 0.4 mg/ml proteinase K just before use.
Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
Eppendorf tube.
Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
Incubate @ 56 C several hours to overnight.
Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
(NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
reaction (or whatever you routinely do).
Transfer supernatant to a fresh tube for storage @ 4 C, if necessary.
(NB even without transfer the DNA is stable for long time, even 2 or 3
months, didn't count.cause i ususally use an old tube for positive control
until i finish it))
Quick Tail Digestion Buffer
50 mM KCl
10 mM Tris HCl, pH 9.0
0.1% Triton X-100
Add 0.4 mg/ml proteinase K just before use.
P*s
12 楼
同问
【在 l*****r 的大作中提到】
: 一个月几千刀的学费？这是啥贵族幼儿园啊。
【在 l*****r 的大作中提到】
: 一个月几千刀的学费？这是啥贵族幼儿园啊。
J*i
13 楼
恭喜恭喜
长期潜水，收益很多，汇报回馈。
140 485 同时， no pp.
RD: 10/13/2009
PD: 10/13/2009
RFE: 12/26/2009
RFE RD: 2/23/2010
AD:3/11/2010
Back Ground:
PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
Citation: 1,600
International and national awards: 4
Media Report: more than 20 major medias in US and China.
RFE 内容相当于从新问了一遍。 Laoda555的帖子很有帮助，感谢。
祝大家都好运！
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
长期潜水，收益很多，汇报回馈。
140 485 同时， no pp.
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祝大家都好运！
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
q*x
14 楼
呵呵，谢谢小波支持，用啥支持啊？不如唱一个吧？
【在 l*****e 的大作中提到】
: 好歌啊，支持！！
【在 l*****e 的大作中提到】
: 好歌啊，支持！！
m*t
15 楼
thx
【在 D*a 的大作中提到】
: Quick Tail Prep
: Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
: Eppendorf tube.
: Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
: Incubate @ 56 C several hours to overnight.
: Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
: Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
: (NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
: Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
: reaction (or whatever you routinely do).
【在 D*a 的大作中提到】
: Quick Tail Prep
: Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
: Eppendorf tube.
: Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
: Incubate @ 56 C several hours to overnight.
: Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
: Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
: (NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
: Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
: reaction (or whatever you routinely do).
c*u
16 楼
tri-ask..
【在 P***s 的大作中提到】
: 同问
【在 P***s 的大作中提到】
: 同问
f*e
17 楼
gx
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
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【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
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l*e
18 楼
呵呵，我找找感觉哈，没唱过这类型的歌曲，你点的歌，我一定要试试的。天马的声音
唱应该很好听。
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，谢谢小波支持，用啥支持啊？不如唱一个吧？
唱应该很好听。
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，谢谢小波支持，用啥支持啊？不如唱一个吧？
d*d
19 楼
I use REDExtract-N-Amp Tissue PCR kit from Sigma.First put tail in
Extraction buffer @ RT for 10', then 95 C 3', then add Neutralization buffer
, then the sample is ready for PCR!
【在 m******t 的大作中提到】
: thx
Extraction buffer @ RT for 10', then 95 C 3', then add Neutralization buffer
, then the sample is ready for PCR!
【在 m******t 的大作中提到】
: thx
S*p
20 楼
正规的daycare 都是月初交一个月的，晚交有的还要罚款。
不但如此，要退出要提前一个月通知。如果不通知，你今天走人，那下个月的钱还要付。
就好象房租一样。
有的小的daycare或者familycare 可能可以一周付一次。但那种其实我不喜欢，那种流
动性大，小孩不固定。
不但如此，要退出要提前一个月通知。如果不通知，你今天走人，那下个月的钱还要付。
就好象房租一样。
有的小的daycare或者familycare 可能可以一周付一次。但那种其实我不喜欢，那种流
动性大，小孩不固定。
f*e
21 楼
这么强还被rfe？ IO没天理
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
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l*e
22 楼
这歌你升4个半音应该唱很好听。
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，谢谢小波支持，用啥支持啊？不如唱一个吧？
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，谢谢小波支持，用啥支持啊？不如唱一个吧？
m*t
23 楼
i want to know the digestion buffer for genotyping that doesnot purify
genomic DNA.i forgot it. let me know. thx.
genomic DNA.i forgot it. let me know. thx.
c*r
24 楼
是不是他们允许一周一次和一月一次？有得幼儿园有几种不同的付款方式，可以选择。
不过一个月一交是很正常的。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 已经register了一家daycare,和Owner谈的时候给我们的是一周的rate，然后交了
: registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
: 现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
: 就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
: 么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
: 知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
: 请问大家的经验是什么？谢谢！
不过一个月一交是很正常的。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 已经register了一家daycare,和Owner谈的时候给我们的是一周的rate，然后交了
: registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
: 现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
: 就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
: 么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
: 知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
: 请问大家的经验是什么？谢谢！
f*i
25 楼
谢谢，第一次递可能东西太多，条理太乱了，现在觉得，真的不是claim 的越多越好，
材料一定要精简，逻辑清晰，把写paper的逻辑拿出来才行。
【在 f********e 的大作中提到】
: 这么强还被rfe？ IO没天理
材料一定要精简，逻辑清晰，把写paper的逻辑拿出来才行。
【在 f********e 的大作中提到】
: 这么强还被rfe？ IO没天理
q*x
26 楼
呵呵，好啊~包子等着你啊，哈哈~
对呀，呼唤天马哥。。。。。。
音唱应该很好听。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，我找找感觉哈，没唱过这类型的歌曲，你点的歌，我一定要试试的。天马的声音
: 唱应该很好听。
对呀，呼唤天马哥。。。。。。
音唱应该很好听。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，我找找感觉哈，没唱过这类型的歌曲，你点的歌，我一定要试试的。天马的声音
: 唱应该很好听。
D*a
27 楼
Quick Tail Prep
Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
Eppendorf tube.
Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
Incubate @ 56 C several hours to overnight.
Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
(NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
reaction (or whatever you routinely do).
Transfer supernatant to a fresh tube for storage @ 4 C, if necessary.
(NB even without transfer the DNA is stable for long time, even 2 or 3
months, didn't count.cause i ususally use an old tube for positive control
until i finish it))
Quick Tail Digestion Buffer
50 mM KCl
10 mM Tris HCl, pH 9.0
0.1% Triton X-100
Add 0.4 mg/ml proteinase K just before use.
Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
Eppendorf tube.
Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
Incubate @ 56 C several hours to overnight.
Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
(NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
reaction (or whatever you routinely do).
Transfer supernatant to a fresh tube for storage @ 4 C, if necessary.
(NB even without transfer the DNA is stable for long time, even 2 or 3
months, didn't count.cause i ususally use an old tube for positive control
until i finish it))
Quick Tail Digestion Buffer
50 mM KCl
10 mM Tris HCl, pH 9.0
0.1% Triton X-100
Add 0.4 mg/ml proteinase K just before use.
s*a
28 楼
请问这种正规要求的谈的时候也是谈一个月的学费还是也可以一周的，然后家长自己会
去计算？因为不是每个月都刚刚好是周的倍数。给一周的rate，让后让交一个月的怎么
算呢？
还有看到版上很多人说开始试某个daycare不满意马上就quit，难道大家都是这样上了几天就不要一个月学费的么？
付。
【在 S****p 的大作中提到】
: 正规的daycare 都是月初交一个月的，晚交有的还要罚款。
: 不但如此，要退出要提前一个月通知。如果不通知，你今天走人，那下个月的钱还要付。
: 就好象房租一样。
: 有的小的daycare或者familycare 可能可以一周付一次。但那种其实我不喜欢，那种流
: 动性大，小孩不固定。
去计算？因为不是每个月都刚刚好是周的倍数。给一周的rate，让后让交一个月的怎么
算呢？
还有看到版上很多人说开始试某个daycare不满意马上就quit，难道大家都是这样上了几天就不要一个月学费的么？
付。
【在 S****p 的大作中提到】
: 正规的daycare 都是月初交一个月的，晚交有的还要罚款。
: 不但如此，要退出要提前一个月通知。如果不通知，你今天走人，那下个月的钱还要付。
: 就好象房租一样。
: 有的小的daycare或者familycare 可能可以一周付一次。但那种其实我不喜欢，那种流
: 动性大，小孩不固定。
r*q
29 楼
gxgx!
q*x
30 楼
我啊？还从来没试过唱男声的歌呢，呵呵。
唱是可以唱，不过我估计我唱不出那个味道呢。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 这歌你升4个半音应该唱很好听。
唱是可以唱，不过我估计我唱不出那个味道呢。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 这歌你升4个半音应该唱很好听。
m*t
31 楼
thx
【在 D*a 的大作中提到】
: Quick Tail Prep
: Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
: Eppendorf tube.
: Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
: Incubate @ 56 C several hours to overnight.
: Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
: Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
: (NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
: Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
: reaction (or whatever you routinely do).
【在 D*a 的大作中提到】
: Quick Tail Prep
: Collect 1 mg skin biopsy (= normal size tail or figure tip) in 0.5 ml
: Eppendorf tube.
: Add 100 microliter of quick tail digestion buffer (below).
: Incubate @ 56 C several hours to overnight.
: Vortex and incubate @ 99 C, 10 minutes.
: Centrifuge @ max speed, 5 minutes.
: (NB i don't vortex so i don't need to centifuge the tube, it works)
: Use 1-2 microliter aliquot of supernatant for a 25-50 microliter PCR
: reaction (or whatever you routinely do).
s*a
32 楼
Sorry中国人的思维模式，1-2千刀习惯说成“几”
【在 l*****r 的大作中提到】
: 一个月几千刀的学费？这是啥贵族幼儿园啊。
【在 l*****r 的大作中提到】
: 一个月几千刀的学费？这是啥贵族幼儿园啊。
l*5
33 楼
祝贺
z*n
34 楼
这首很喜欢，经常听。。。等我先忙着争“公家”的大包子，再来奔这首，呵呵。。。
d*d
35 楼
I use REDExtract-N-Amp Tissue PCR kit from Sigma.First put tail in
Extraction buffer @ RT for 10', then 95 C 3', then add Neutralization buffer
, then the sample is ready for PCR!
【在 m******t 的大作中提到】
: thx
Extraction buffer @ RT for 10', then 95 C 3', then add Neutralization buffer
, then the sample is ready for PCR!
【在 m******t 的大作中提到】
: thx
S*p
36 楼
我看过的几个都是一月交一次，不能一周交一次的。
我听说有的familycare 可以接受一周交一次，至于他们怎么算，我不知道。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 请问这种正规要求的谈的时候也是谈一个月的学费还是也可以一周的，然后家长自己会
: 去计算？因为不是每个月都刚刚好是周的倍数。给一周的rate，让后让交一个月的怎么
: 算呢？
: 还有看到版上很多人说开始试某个daycare不满意马上就quit，难道大家都是这样上了几天就不要一个月学费的么？
:
: 付。
我听说有的familycare 可以接受一周交一次，至于他们怎么算，我不知道。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 请问这种正规要求的谈的时候也是谈一个月的学费还是也可以一周的，然后家长自己会
: 去计算？因为不是每个月都刚刚好是周的倍数。给一周的rate，让后让交一个月的怎么
: 算呢？
: 还有看到版上很多人说开始试某个daycare不满意马上就quit，难道大家都是这样上了几天就不要一个月学费的么？
:
: 付。
d*t
37 楼
恭喜！
E*t
38 楼
听的够多 但是一到唱一下的时候发现前面的节奏实在很难掌握
为了包子拼了...
为了包子拼了...
S*9
39 楼
50nm NaOH 500microliter 95-100度 煮30-45分钟
50 microliter Ph8 1M Tris-Hcl 中和
离心3分钟
取上清液做PCR
50 microliter Ph8 1M Tris-Hcl 中和
离心3分钟
取上清液做PCR
P*s
40 楼
我呆过的地方都是一周交一次的，都是daycare center，有的是连锁，有的不是。
【在 S****p 的大作中提到】
: 我看过的几个都是一月交一次，不能一周交一次的。
: 我听说有的familycare 可以接受一周交一次，至于他们怎么算，我不知道。
【在 S****p 的大作中提到】
: 我看过的几个都是一月交一次，不能一周交一次的。
: 我听说有的familycare 可以接受一周交一次，至于他们怎么算，我不知道。
b*r
41 楼
cong
T*a
42 楼
承蒙小波老乡举荐，其实这首歌非常合适你的嗓音的，一定要试试噢~
音唱应该很好听。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，我找找感觉哈，没唱过这类型的歌曲，你点的歌，我一定要试试的。天马的声音
: 唱应该很好听。
音唱应该很好听。
【在 l*****e 的大作中提到】
: 呵呵，我找找感觉哈，没唱过这类型的歌曲，你点的歌，我一定要试试的。天马的声音
: 唱应该很好听。
l*s
43 楼
我们的也是每月交一次近两千刀，以前的那家是每周一次的便宜些，但是很不正规，设
施也差，一个老师管7个1-2岁的小孩，现在这个一个老师管5个。
施也差，一个老师管7个1-2岁的小孩，现在这个一个老师管5个。
d*n
44 楼
GXGX! Baozi.
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
T*a
45 楼
芊寻MM，华仔的歌我大都很喜欢，这首歌的旋律尤其好听，视频里还有跑步的镜头，我
的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
有唱忘忧草。。。
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，好啊~包子等着你啊，哈哈~
: 对呀，呼唤天马哥。。。。。。
:
: 音唱应该很好听。
的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
有唱忘忧草。。。
【在 q**x 的大作中提到】
: 呵呵，好啊~包子等着你啊，哈哈~
: 对呀，呼唤天马哥。。。。。。
:
: 音唱应该很好听。
s*a
46 楼
是一个月一个rate还是根据每周的rate再算呢？
【在 l*****s 的大作中提到】
: 我们的也是每月交一次近两千刀，以前的那家是每周一次的便宜些，但是很不正规，设
: 施也差，一个老师管7个1-2岁的小孩，现在这个一个老师管5个。
【在 l*****s 的大作中提到】
: 我们的也是每月交一次近两千刀，以前的那家是每周一次的便宜些，但是很不正规，设
: 施也差，一个老师管7个1-2岁的小孩，现在这个一个老师管5个。
l*7
47 楼
GXGX!
baozi pls!
baozi pls!
q*x
48 楼
呵呵，太好了，等三哥你来奔啊~
【在 z******n 的大作中提到】
: 这首很喜欢，经常听。。。等我先忙着争“公家”的大包子，再来奔这首，呵呵。。。
【在 z******n 的大作中提到】
: 这首很喜欢，经常听。。。等我先忙着争“公家”的大包子，再来奔这首，呵呵。。。
s*m
49 楼
我女儿上的preschool也是这样的。我女儿六月中旬开始上学，我现在就把银行划帐信
息填给学校了。她们学校是
月交（5号或20）划帐。我好不容易等到个位子，就赶紧把手续都给办了，没想那么多
。刚想起来你的是
daycare，可能不一样。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 已经register了一家daycare,和Owner谈的时候给我们的是一周的rate，然后交了
: registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
: 现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
: 就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
: 么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
: 知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
: 请问大家的经验是什么？谢谢！
息填给学校了。她们学校是
月交（5号或20）划帐。我好不容易等到个位子，就赶紧把手续都给办了，没想那么多
。刚想起来你的是
daycare，可能不一样。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 已经register了一家daycare,和Owner谈的时候给我们的是一周的rate，然后交了
: registration fee，领了一个package回家说让开始前一周填好交还daycare.回家后发
: 现里面有一条说的是每月的几号之前必须把每月的学费交齐，还让提供银行划帐信息。
: 就犯嘀咕了，只前考察其他daycare看到其他家长都是drop off一周的学费的。这家这
: 么要求合理么？是否其实是可以灵活处理的？我们是倾向于一周一交，尤其刚开始，不
: 知道相处怎样。难道不好就白白浪费几千刀么？
: 请问大家的经验是什么？谢谢！
s*l
50 楼
gx! Baozi
q*x
51 楼
慢慢来，不着急~
哈哈，没问题，包子等着你~我等着听你唱啊~
【在 E********t 的大作中提到】
: 听的够多 但是一到唱一下的时候发现前面的节奏实在很难掌握
: 为了包子拼了...
哈哈，没问题，包子等着你~我等着听你唱啊~
【在 E********t 的大作中提到】
: 听的够多 但是一到唱一下的时候发现前面的节奏实在很难掌握
: 为了包子拼了...
b*M
52 楼
cg
q*x
53 楼
呵呵，谢谢天马哥喜欢我点的这首歌的旋律。
你说的我了解，没问题的~
呵呵，我没听过《空巷》呢，跑去你的主页搬过来了，果然有忘忧草呢~呵呵，也很好
听啊！
http://fc.5sing.com/6709122.html
我的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
面有唱忘忧草。。。
【在 T****a 的大作中提到】
: 芊寻MM，华仔的歌我大都很喜欢，这首歌的旋律尤其好听，视频里还有跑步的镜头，我
: 的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
: 说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
: 有唱忘忧草。。。
你说的我了解，没问题的~
呵呵，我没听过《空巷》呢，跑去你的主页搬过来了，果然有忘忧草呢~呵呵，也很好
听啊！
http://fc.5sing.com/6709122.html
我的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
面有唱忘忧草。。。
【在 T****a 的大作中提到】
: 芊寻MM，华仔的歌我大都很喜欢，这首歌的旋律尤其好听，视频里还有跑步的镜头，我
: 的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
: 说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
: 有唱忘忧草。。。
l*t
54 楼
congrats!
y*i
55 楼
通常意义上，华仔是指刘德华。
周华健一般简称华健，或者ｅｍｉｌ
《忘忧草》这歌，是写在台湾大地震后的，歌词有些伤感。曲调改自日本的一首歌。
【在 T****a 的大作中提到】
: 芊寻MM，华仔的歌我大都很喜欢，这首歌的旋律尤其好听，视频里还有跑步的镜头，我
: 的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
: 说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
: 有唱忘忧草。。。
周华健一般简称华健，或者ｅｍｉｌ
《忘忧草》这歌，是写在台湾大地震后的，歌词有些伤感。曲调改自日本的一首歌。
【在 T****a 的大作中提到】
: 芊寻MM，华仔的歌我大都很喜欢，这首歌的旋律尤其好听，视频里还有跑步的镜头，我
: 的大爱啊。。。但我实在不太喜欢这首歌词，尤其是第二节。。。
: 说道忘忧草，我曾翻过5sing上的一首原创曲名字叫《空巷》，不知你听过没有？里面
: 有唱忘忧草。。。
w*n
56 楼
so strong
gxgx
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
gxgx
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
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l*e
57 楼
yangyi是华健的粉丝。这歌你可以有。
z*b
58 楼
cong
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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: RFE RD: 2/23/2010
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: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
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E*t
59 楼
Emil是早期的英文名啦 现在就只用Wakin了
【在 y****i 的大作中提到】
: 通常意义上，华仔是指刘德华。
: 周华健一般简称华健，或者ｅｍｉｌ
: 《忘忧草》这歌，是写在台湾大地震后的，歌词有些伤感。曲调改自日本的一首歌。
a*s
60 楼
cong.......
baozi
baozi
y*i
61 楼
粉丝谈不上，听得多罢了。
这两天嗓子严重坏了，说话都跟太监似的，更别说唱歌了。
争取2013年头上奉献吧。
【在 l*****e 的大作中提到】
: yangyi是华健的粉丝。这歌你可以有。
这两天嗓子严重坏了，说话都跟太监似的，更别说唱歌了。
争取2013年头上奉献吧。
【在 l*****e 的大作中提到】
: yangyi是华健的粉丝。这歌你可以有。
g*y
62 楼
恭喜恭喜！
q*x
63 楼
多谢分享，我才知道这个背景知识，难怪这首歌被称为“21世纪第一首遮风避雨的民谣
”。
【在 y****i 的大作中提到】
: 通常意义上，华仔是指刘德华。
: 周华健一般简称华健，或者ｅｍｉｌ
: 《忘忧草》这歌，是写在台湾大地震后的，歌词有些伤感。曲调改自日本的一首歌。
”。
【在 y****i 的大作中提到】
: 通常意义上，华仔是指刘德华。
: 周华健一般简称华健，或者ｅｍｉｌ
: 《忘忧草》这歌，是写在台湾大地震后的，歌词有些伤感。曲调改自日本的一首歌。
j*j
64 楼
GXGX!
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
q*x
65 楼
你们都是粉丝啊，这俩英文名字我都不知道，不要鄙视我啊。。。
【在 E********t 的大作中提到】
:
: Emil是早期的英文名啦 现在就只用Wakin了
【在 E********t 的大作中提到】
:
: Emil是早期的英文名啦 现在就只用Wakin了
F*p
66 楼
congrats!
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
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q*x
67 楼
呵呵，太好了，期待中。。。
【在 y****i 的大作中提到】
: 粉丝谈不上，听得多罢了。
: 这两天嗓子严重坏了，说话都跟太监似的，更别说唱歌了。
: 争取2013年头上奉献吧。
【在 y****i 的大作中提到】
: 粉丝谈不上，听得多罢了。
: 这两天嗓子严重坏了，说话都跟太监似的，更别说唱歌了。
: 争取2013年头上奉献吧。
r*n
68 楼
恭喜恭喜，太强了，排队等包子
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
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: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
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u*r
69 楼
厉害厉害，恭喜恭喜，包子包子
【在 f***i 的大作中提到】
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: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
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【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
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s*0
70 楼
恭喜恭喜.排包子
t*6
71 楼
GONGXI!
L*9
72 楼
Wow! So fast! Many congrats!!!
Pai Baozi!
【在 f***i 的大作中提到】
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Pai Baozi!
【在 f***i 的大作中提到】
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w*c
73 楼
GX, Baozi please!
c*9
74 楼
GXGX!
s*r
75 楼
Big Cong!!! Baozi pls. :)
s*e
76 楼
cong!
d*o
77 楼
gxgx!
w*a
78 楼
恭喜！
包子！
【在 f***i 的大作中提到】
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: PD: 10/13/2009
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包子！
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
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n*w
79 楼
恭喜，
恭喜
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
恭喜
【在 f***i 的大作中提到】
: 长期潜水，收益很多，汇报回馈。
: 140 485 同时， no pp.
: RD: 10/13/2009
: PD: 10/13/2009
: RFE: 12/26/2009
: RFE RD: 2/23/2010
: AD:3/11/2010
: Back Ground:
: PhD, US top 10 and Post Doc 1 year and half in US top 10 university
: Journal paper: 30 all published in US, Among them, 2 on NAS.
s*m
80 楼
gxgx
m*a
81 楼
GXGX
r*l
82 楼
恭喜恭喜
背景太牛了。。。
背景太牛了。。。
d*p
83 楼
cong!
baozi
baozi
w*g
84 楼
这么牛，postdoc
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