j*e
2 楼
我只从邮局收到delivery confirmation
木有收到USCIS收据
大家都收到USCIS收据了么？
谢谢
木有收到USCIS收据
大家都收到USCIS收据了么？
谢谢
H*3
3 楼
是皈依呢，还是皈依呢，还是皈依呢？——请问，索达吉堪布
发 问
我一位在国内很有名的明星朋友对佛法很感兴趣，对自己也有要求，不抽烟喝酒，还吃
素，他想从佛法中获得帮助，但又不想成为一个佛教徒，这样是可以的吗？在形式上是
否成为佛教徒，对于一个想学习佛法的人有何区别？
索达吉堪布：现在很多人说，学佛不用皈依，只要做个善良的人就可以了。其实，皈依
和不皈依，对人生的作用还是有差别。就像一个公司注册和没有注册，对做生意会有不
同影响，或者像一对恋人，同居和结婚也不一样。如果说所有的形式都多此一举，那世
间男女只要心中有爱就可以了，又何必大费周章去登记结婚、举办婚礼呢？
皈依表面上好像是一种形式，但实际上存在着不可忽视的意义。
现在，很多人只是表面上皈依了佛教，却从来没有系统地学过佛法，这不算真正入了佛
门。就像一个学生只是办了入学登记，但根本没有上过课，哪怕他在学校呆了十几年，
也算不上是这所学校的学生。
其实学佛并没有那么简单，就像学习开车，必须要去驾校学，这样才比较安全，否则，
只看一个驾驶说明就贸然上路，那很容易出问题。对于佛法也是如此，最好是先皈依再
学习、修行，这样才能深入了解。
发 问
我身边的一些好朋友也非常愿意参与放生念经，但就是还不敢皈依，因为佛教徒戒律繁
多，他们怕学佛后会影响自己的正常生活，比如吃素或禁欲之类，怎么办？
索达吉堪布：皈依确实是一种约束，但对人生来讲还是很有必要。如果我们要做一个好
人，不杀生、不邪淫等是最基本的规范，这就像开车时的红绿灯，虽然让人感觉不自由
，但实际上是为了更好地保护我们；或者如同一个国家的法律，虽然对人有一些约束，
但有了它，人们在很多方面都有了保障。
所谓的皈依，其实也没有太多戒条，基本上都是人类的道德规范，这对每个人来讲都很
重要，只不过皈依之后更加明确了。而且从佛教角度讲，皈依之后，会有三十位善神保
护你。
当然，学佛也并没有要求你非皈依不可，不皈依就要受到惩罚，不会这样
发 问
我一位在国内很有名的明星朋友对佛法很感兴趣，对自己也有要求，不抽烟喝酒，还吃
素，他想从佛法中获得帮助，但又不想成为一个佛教徒，这样是可以的吗？在形式上是
否成为佛教徒，对于一个想学习佛法的人有何区别？
索达吉堪布：现在很多人说，学佛不用皈依，只要做个善良的人就可以了。其实，皈依
和不皈依，对人生的作用还是有差别。就像一个公司注册和没有注册，对做生意会有不
同影响，或者像一对恋人，同居和结婚也不一样。如果说所有的形式都多此一举，那世
间男女只要心中有爱就可以了，又何必大费周章去登记结婚、举办婚礼呢？
皈依表面上好像是一种形式，但实际上存在着不可忽视的意义。
现在，很多人只是表面上皈依了佛教，却从来没有系统地学过佛法，这不算真正入了佛
门。就像一个学生只是办了入学登记，但根本没有上过课，哪怕他在学校呆了十几年，
也算不上是这所学校的学生。
其实学佛并没有那么简单，就像学习开车，必须要去驾校学，这样才比较安全，否则，
只看一个驾驶说明就贸然上路，那很容易出问题。对于佛法也是如此，最好是先皈依再
学习、修行，这样才能深入了解。
发 问
我身边的一些好朋友也非常愿意参与放生念经，但就是还不敢皈依，因为佛教徒戒律繁
多，他们怕学佛后会影响自己的正常生活，比如吃素或禁欲之类，怎么办？
索达吉堪布：皈依确实是一种约束，但对人生来讲还是很有必要。如果我们要做一个好
人，不杀生、不邪淫等是最基本的规范，这就像开车时的红绿灯，虽然让人感觉不自由
，但实际上是为了更好地保护我们；或者如同一个国家的法律，虽然对人有一些约束，
但有了它，人们在很多方面都有了保障。
所谓的皈依，其实也没有太多戒条，基本上都是人类的道德规范，这对每个人来讲都很
重要，只不过皈依之后更加明确了。而且从佛教角度讲，皈依之后，会有三十位善神保
护你。
当然，学佛也并没有要求你非皈依不可，不皈依就要受到惩罚，不会这样
m*5
4 楼
似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
呢？
过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
呢？
m*n
5 楼
通知一下为好
【在 T*******h 的大作中提到】
: 已经拿到H1 的批准了，因为以前有H1 ，可以马上开始
: 这样的话需要通知语言学校么
m*a
6 楼
刚刚收到电子邮件。给了6个receipt number，但是网上查不到状态，也没有receive
date。
date。
s*y
7 楼
没有这回事。
首先是背景里会有blocking agent, 然后，抗体富集再多一般也不如总蛋白多。
我以前染的时候看见就是一个脏兮兮的背景里面一长条ladder
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
首先是背景里会有blocking agent, 然后，抗体富集再多一般也不如总蛋白多。
我以前染的时候看见就是一个脏兮兮的背景里面一长条ladder
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
T*h
8 楼
多谢啊
【在 m*****n 的大作中提到】
:
: 通知一下为好
【在 m*****n 的大作中提到】
:
: 通知一下为好
m*g
9 楼
是不是要填另外一张表，才能收到电子收据？
【在 m***a 的大作中提到】
: 刚刚收到电子邮件。给了6个receipt number，但是网上查不到状态，也没有receive
: date。
【在 m***a 的大作中提到】
: 刚刚收到电子邮件。给了6个receipt number，但是网上查不到状态，也没有receive
: date。
n*w
10 楼
我们实验室那个tech大爷会最后将用了n次的膜用gelcode 染，
m*a
11 楼
y*8
12 楼
Only suitable for IP or pull-down.
l*7
13 楼
G1145 可以基本忽略之, 因为CIS基本ignore it. 应该过几天收到official receipts
notices by mails.
notices by mails.
y*n
14 楼
这个应该不行吧。。。。。。。。。。。。。
B*i
15 楼
does your check get cashed?
My package is delivered on 3.1 but the check is still not cashed, how soon
will they cash the check? thanks
My package is delivered on 3.1 but the check is still not cashed, how soon
will they cash the check? thanks
I*y
16 楼
这个不行，你block membrane的时候，上面沾了很多milk or bsa proteins，背景太多了
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
m*a
17 楼
Of course not cashed yet. It will take a while.
a*x
18 楼
但似乎拿Ponceau staining没有问题啊
j*e
19 楼
Updaote:收到鸟
【在 j**********e 的大作中提到】
: 我只从邮局收到delivery confirmation
: 木有收到USCIS收据
: 大家都收到USCIS收据了么？
: 谢谢
【在 j**********e 的大作中提到】
: 我只从邮局收到delivery confirmation
: 木有收到USCIS收据
: 大家都收到USCIS收据了么？
: 谢谢
s*n
20 楼
Ponceau S staining is usually after transferring but before 1st blocking.
【在 a*****x 的大作中提到】
: 但似乎拿Ponceau staining没有问题啊
【在 a*****x 的大作中提到】
: 但似乎拿Ponceau staining没有问题啊
z*o
21 楼
my check was cashed this morning
f*e
22 楼
yes, no specific bands if after
【在 s********n 的大作中提到】
: Ponceau S staining is usually after transferring but before 1st blocking.
【在 s********n 的大作中提到】
: Ponceau S staining is usually after transferring but before 1st blocking.
Q*n
23 楼
我的是3月2号DELIVERED,现在还没有收到电子收据.
b*8
24 楼
转完膜后用Ponceau S 染膜会不会影响后续的杂交？
Y
【在 s********n 的大作中提到】
: Ponceau S staining is usually after transferring but before 1st blocking.
Y
【在 s********n 的大作中提到】
: Ponceau S staining is usually after transferring but before 1st blocking.
c*s
25 楼
3月2号DELIVERED，今天早上看到6调message, 都发到我的信箱。
s*y
26 楼
可以很容易洗掉的
【在 b*********8 的大作中提到】
: 转完膜后用Ponceau S 染膜会不会影响后续的杂交？
:
: Y
【在 b*********8 的大作中提到】
: 转完膜后用Ponceau S 染膜会不会影响后续的杂交？
:
: Y
c*e
27 楼
millipore有个non-protein的blocking reagent，可以让你western完了以后再用一般
的染胶的方法染膜，效果还可以
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
的染胶的方法染膜，效果还可以
【在 m******5 的大作中提到】
: 似乎如果上样量少的话，western blot中特异性强的band能被commasie blue染上，想
: 过去似乎是合理的，因为在有band的位置富集了抗体
: 不过从另一方面来说，是不是可以利用这一点使得band cutting以及之后的质谱变容易
: 呢？
i*k
28 楼
blot过后的PVDF膜再用Coomassie blue染是完全可以的。如果染液新鲜，1-2分钟就够
了，马上脱色2-3次，每次不超过5分钟。这样染出来，条带清晰，背景干净。如果染的
时间过长，那背景就很难洗掉，而且脱色时间长的话，蛋白条带也会逐渐掉色变浅
至于试图染出lysate中特异条带，而这个蛋白不是特别富集的话，没有用的，因为这和
直接染胶没有什么区别
了，马上脱色2-3次，每次不超过5分钟。这样染出来，条带清晰，背景干净。如果染的
时间过长，那背景就很难洗掉，而且脱色时间长的话，蛋白条带也会逐渐掉色变浅
至于试图染出lysate中特异条带，而这个蛋白不是特别富集的话，没有用的，因为这和
直接染胶没有什么区别
g*a
29 楼
是这样的
【在 i******k 的大作中提到】
: blot过后的PVDF膜再用Coomassie blue染是完全可以的。如果染液新鲜，1-2分钟就够
: 了，马上脱色2-3次，每次不超过5分钟。这样染出来，条带清晰，背景干净。如果染的
: 时间过长，那背景就很难洗掉，而且脱色时间长的话，蛋白条带也会逐渐掉色变浅
: 至于试图染出lysate中特异条带，而这个蛋白不是特别富集的话，没有用的，因为这和
: 直接染胶没有什么区别
【在 i******k 的大作中提到】
: blot过后的PVDF膜再用Coomassie blue染是完全可以的。如果染液新鲜，1-2分钟就够
: 了，马上脱色2-3次，每次不超过5分钟。这样染出来，条带清晰，背景干净。如果染的
: 时间过长，那背景就很难洗掉，而且脱色时间长的话，蛋白条带也会逐渐掉色变浅
: 至于试图染出lysate中特异条带，而这个蛋白不是特别富集的话，没有用的，因为这和
: 直接染胶没有什么区别
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