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有人做过anti-flag的western杂交吗

有人做过anti-flag的western杂交吗# Biology - 生物学

r*r2012-05-12 07:05

1 楼

【以下文字转载自 SanFrancisco 讨论区】
发信人: reer (nickname), 信区: SanFrancisco
标题: 两年的mechanical engineer experience 在湾区能拿多少年薪阿？（学士）
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Aug 12 22:45:35 2010, 美东)
谢谢啦
我朋友在找工作，想问问大概能讨价还价多少。。。要８万以上算不算狮子开口？

m*e2012-05-12 07:05

2 楼

Woot.com
★ 发自iPhone App: ChineseWeb - 中文网站浏览器

b*82012-05-12 07:05

3 楼

我的载体上只有一个 FLag tag,不知道做western杂交时目的蛋白的带会不会足够强?
有什么好的方法吗？谢谢

m*52012-05-12 07:05

4 楼

flag有两个版本，楼主的是哪个啊

【在 b*********8 的大作中提到】

: 我的载体上只有一个 FLag tag,不知道做western杂交时目的蛋白的带会不会足够强?
: 有什么好的方法吗？谢谢

m*52012-05-12 07:05

5 楼

四个d那个版本其实很糟糕，最好的是3xflag第一个或者第二个不带酶切位点的
抗体m2不错

【在 m******5 的大作中提到】

: flag有两个版本，楼主的是哪个啊

s*t2012-05-12 07:05

6 楼

不强的话你就先IP再WB呗

【在 b*********8 的大作中提到】

: 我的载体上只有一个 FLag tag,不知道做western杂交时目的蛋白的带会不会足够强?
: 有什么好的方法吗？谢谢

m*52012-05-12 07:05

7 楼

能不能ip和能不能wb没有必然关系吧。。

【在 s*********t 的大作中提到】

: 不强的话你就先IP再WB呗
:
:

b*82012-05-12 07:05

8 楼

我用的FLAG 序列是：DYKDDDDK.难道就是4个D的版本？我太惨了吧！
我也打算用M2-HRP抗体，是不是多加点抗体会好点，比如1:100稀释？再不行就要用
bead纯化了吧？

p*e2012-05-12 07:05

9 楼

我们的Flag抗体对于DYKDDDDK超级好用。做IP和WB最好用。比Sigma的M2亲和力强很多
。M2主要用来纯化带Flag tag的蛋白，亲和力太过难以洗脱，所以M2用来纯化蛋白好，
但用来IP和WB就差劲了。
买我们的Flag抗体时提及Discount Code：MITBBS 有20％ off。
http://www.speedbiosystems.com/Search.aspx?t=LYT1008