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想请教一下关于显微镜的问题
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想请教一下关于显微镜的问题# Biology - 生物学
C*t
1
之前一个proposal,给批得最厉害的就是,欧洲一个大牛作过这个课题了,你怎么都没
提。楼主接受胖前辈之前的教训,心想不搞定这个大牛,下步也不好走。而且楼主向来
是不怕出头的性格,立刻给大牛写信过去,自我介绍,说你做这个了吗找不到呀。大牛
回信,是啊,做了五年了,但都是发的会议,pubmed查不到(我晕!)。我于是自我介
绍了一下我的发现。简单说就是,大牛用了A和B两种手法,A更clinical,但目前只能
做第一步。B是探讨性的,但他做完第一步没有继续往下做。我用B作了第二步,结果让
人跌眼球。
Anyway,大牛听了我的结果很激动,发了一堆文件过来,说B不严谨,结论证的有可能
是我说的X,但也有可能是Y。他说,你把这个参数从500上调到1500,还是这样,我就
更信是X。我说给我一个星期。昨天给他写信,我说你看看图,1500还是一样。大牛昨
晚回信已经口气松动了,但还说too good to be true(也难怪,别人的方法将
threshold从500最多降到300,我给降到10,我自己都觉得怪)。我说我下周再作个
2000试试。总之还在讨论中,最后如何还不知道。下次resubmit时,起码可以在
Introduction里写上, Personal communication with 大牛,结果如下。。。
写这个帖的目的,就是想再强调一下scientific communication。我之前还有个文章,
也是reviewer说,谁谁谁就不这么认为。我马上写信给谁谁谁,你怎么认为?然后第二
遍审,加了这个personal communication,就一句话没有就过了。我觉得越是老资格,
其实不怕你挑战他,他早站稳了,而且喜欢和人家讨论自己领域内的有challenge的事
。练武,下棋,高手们最怕的不是有对手,而是没有对手。只有那些不是靠本事站脚的
,才特别怕挑战。
(注:关于confidential,我的结果已经讲了两个会了,而且告诉了大牛马上还会在北
美一个大会讲,大牛当然也不是那种人品,人也不稀罕,不过网上有过别的先例,有些
idea注意一下保密还是应该的。)
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d*d
3
radon结果出来了 是3.7 算不算偏高了阿?是不是以后得注意?
因为EPA要求是不超过4 是吧
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T*x
4
【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
发信人: TheMatrix (TheMatrix), 信区: PDA
标 题: nook HD+怎么样?
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Feb 23 01:10:43 2013, 美东)
到店里摸了一下,屏幕还不错,
但感觉浏览网页手指滑动翻页不是很顺畅,
这个是因为处理器的速度不够,
还是因为nook android的操作系统不行?
刷成android 4.0后会不会变好?
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z*3
5
想请教一下关于显微镜的问题
一般的显微镜有旋钮可以调节物镜的上下移动,旋钮是有刻度的。 不知道有没办法可
以知道, 旋几格刻度就是物镜移动了2微米,旋几格刻度就是物镜移动了5微米呢? 有
什么实验可以验证呢?
其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
非常感谢
(不好意思,已经修改,应该是微米)
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s*y
6
哎,我真希望我也能象你这么做。
但是我所对头的那个大牛,不是一个容易听进不同意见的人,而且我和他之间的师承关
系有历史恩怨,所以我从来不敢联系他。

【在 C***t 的大作中提到】
: 之前一个proposal,给批得最厉害的就是,欧洲一个大牛作过这个课题了,你怎么都没
: 提。楼主接受胖前辈之前的教训,心想不搞定这个大牛,下步也不好走。而且楼主向来
: 是不怕出头的性格,立刻给大牛写信过去,自我介绍,说你做这个了吗找不到呀。大牛
: 回信,是啊,做了五年了,但都是发的会议,pubmed查不到(我晕!)。我于是自我介
: 绍了一下我的发现。简单说就是,大牛用了A和B两种手法,A更clinical,但目前只能
: 做第一步。B是探讨性的,但他做完第一步没有继续往下做。我用B作了第二步,结果让
: 人跌眼球。
: Anyway,大牛听了我的结果很激动,发了一堆文件过来,说B不严谨,结论证的有可能
: 是我说的X,但也有可能是Y。他说,你把这个参数从500上调到1500,还是这样,我就
: 更信是X。我说给我一个星期。昨天给他写信,我说你看看图,1500还是一样。大牛昨

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H*i
7
Thanks.
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g*9
8
Check again in winter, I bet it will be over 4.

【在 d***d 的大作中提到】
: radon结果出来了 是3.7 算不算偏高了阿?是不是以后得注意?
: 因为EPA要求是不超过4 是吧

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b*l
9
系统的问题;4.0以后也差不多。

【在 T*******x 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
: 发信人: TheMatrix (TheMatrix), 信区: PDA
: 标 题: nook HD+怎么样?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat Feb 23 01:10:43 2013, 美东)
: 到店里摸了一下,屏幕还不错,
: 但感觉浏览网页手指滑动翻页不是很顺畅,
: 这个是因为处理器的速度不够,
: 还是因为nook android的操作系统不行?
: 刷成android 4.0后会不会变好?

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s*y
10
买一个游标卡尺,量物镜和观测台的距离,然后转上几十圈,再量,测量出
物镜的位移数,除于圈数,就大致是每圈转动移动的距离。

【在 z***3 的大作中提到】
: 想请教一下关于显微镜的问题
: 一般的显微镜有旋钮可以调节物镜的上下移动,旋钮是有刻度的。 不知道有没办法可
: 以知道, 旋几格刻度就是物镜移动了2微米,旋几格刻度就是物镜移动了5微米呢? 有
: 什么实验可以验证呢?
: 其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
: http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
: 非常感谢
: (不好意思,已经修改,应该是微米)

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h*0
11
不错, 这是做科学的节奏。

【在 C***t 的大作中提到】
: 之前一个proposal,给批得最厉害的就是,欧洲一个大牛作过这个课题了,你怎么都没
: 提。楼主接受胖前辈之前的教训,心想不搞定这个大牛,下步也不好走。而且楼主向来
: 是不怕出头的性格,立刻给大牛写信过去,自我介绍,说你做这个了吗找不到呀。大牛
: 回信,是啊,做了五年了,但都是发的会议,pubmed查不到(我晕!)。我于是自我介
: 绍了一下我的发现。简单说就是,大牛用了A和B两种手法,A更clinical,但目前只能
: 做第一步。B是探讨性的,但他做完第一步没有继续往下做。我用B作了第二步,结果让
: 人跌眼球。
: Anyway,大牛听了我的结果很激动,发了一堆文件过来,说B不严谨,结论证的有可能
: 是我说的X,但也有可能是Y。他说,你把这个参数从500上调到1500,还是这样,我就
: 更信是X。我说给我一个星期。昨天给他写信,我说你看看图,1500还是一样。大牛昨

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n*e
12
pai
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s*n
13
no standard is 2

【在 d***d 的大作中提到】
: radon结果出来了 是3.7 算不算偏高了阿?是不是以后得注意?
: 因为EPA要求是不超过4 是吧

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a*o
14
可惜了一个上好的屏幕,哥也在店里摸了,色彩真是好。

【在 b**l 的大作中提到】
: 系统的问题;4.0以后也差不多。
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s*j
15
一个刻度尺就行了.

【在 s******y 的大作中提到】
: 买一个游标卡尺,量物镜和观测台的距离,然后转上几十圈,再量,测量出
: 物镜的位移数,除于圈数,就大致是每圈转动移动的距离。

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C*t
16
事在人为。如果你有铁样的证据,同时可以从理论上解释通了,我觉得对方是可以考虑
的。你的结果目前只给reviewers看过,大牛本人还不知道是不是?
以我最近的经历来说,我和大牛来往了一共11封emails, 开头还要多做解释,后来发现
彼此都是真做了这个课题的话,个中道道儿都是一点就透,不用废话,这个没做过的装
不来。所以我觉得说服大牛,比说服那些盲目崇拜大牛的外行其实更容易。

【在 s******y 的大作中提到】
: 哎,我真希望我也能象你这么做。
: 但是我所对头的那个大牛,不是一个容易听进不同意见的人,而且我和他之间的师承关
: 系有历史恩怨,所以我从来不敢联系他。

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d*d
18
标准是2么? 我得报告上写的是4阿~~~
the EPA suggests that mitigation take place when the average radon
concentration is 4.0 pci/l or above.
如果偏高的话 怎么采取措施把它降下来呢?
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m*n
19
Cm10很流畅

【在 a*o 的大作中提到】
: 可惜了一个上好的屏幕,哥也在店里摸了,色彩真是好。
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S*R
20
如果是带激光的显微镜,可以精确知道刻度对应的厚度。
先聚焦到已经知道的玻璃厚度(如300微米的或者1 毫米)上表面,慢慢旋转,记下旋
转了多少刻度可以聚焦到玻璃另外一面。就可以算出来了。

【在 z***3 的大作中提到】
: 想请教一下关于显微镜的问题
: 一般的显微镜有旋钮可以调节物镜的上下移动,旋钮是有刻度的。 不知道有没办法可
: 以知道, 旋几格刻度就是物镜移动了2微米,旋几格刻度就是物镜移动了5微米呢? 有
: 什么实验可以验证呢?
: 其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
: http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
: 非常感谢
: (不好意思,已经修改,应该是微米)

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s*y
21
哎,这么说吧,你碰到的那个大牛可能和你没有那么多利益冲突,而且可能对你说的那
个话题并没有什么定论。我那个对头对我说的那个话题都下了20年定论了,而且都写进
教科书了,根据谣言,他是一直等着用那个来拿炸药奖的。以前也有别的人发现了一些
和他的定论不相符的问题,也就此挑战过他,结果被他的朋友们挤兑得后来只好放弃科
研去做行政工作了。

【在 C***t 的大作中提到】
: 事在人为。如果你有铁样的证据,同时可以从理论上解释通了,我觉得对方是可以考虑
: 的。你的结果目前只给reviewers看过,大牛本人还不知道是不是?
: 以我最近的经历来说,我和大牛来往了一共11封emails, 开头还要多做解释,后来发现
: 彼此都是真做了这个课题的话,个中道道儿都是一点就透,不用废话,这个没做过的装
: 不来。所以我觉得说服大牛,比说服那些盲目崇拜大牛的外行其实更容易。

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a*e
22
thanks
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g*9
23

Install a mitigation system.

【在 d***d 的大作中提到】
: 标准是2么? 我得报告上写的是4阿~~~
: the EPA suggests that mitigation take place when the average radon
: concentration is 4.0 pci/l or above.
: 如果偏高的话 怎么采取措施把它降下来呢?

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a*o
24
那好啊,就等deal了。

【在 m*******n 的大作中提到】
: Cm10很流畅
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z*3
25
非常感谢ls各位的信息
我们的是带激光的显微镜 可为什么带激光的会精确些呢?
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c*d
26
请问胖老师这种师承关系有历史恩怨的情况,作为新人该怎么办?感觉一进场就被盯死
了,还没开始折腾呢。如果正好对方有人在study section且一时半会儿不会下来,是
不是基本没戏了?

【在 s******y 的大作中提到】
: 哎,我真希望我也能象你这么做。
: 但是我所对头的那个大牛,不是一个容易听进不同意见的人,而且我和他之间的师承关
: 系有历史恩怨,所以我从来不敢联系他。

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d*a
27
pai
avatar
s*n
28
You should control it below 2 as outdoor average i s 0.016. Please refer to
this site:
http://www.epa.gov/radon/pubs/consguid.html

【在 d***d 的大作中提到】
: 标准是2么? 我得报告上写的是4阿~~~
: the EPA suggests that mitigation take place when the average radon
: concentration is 4.0 pci/l or above.
: 如果偏高的话 怎么采取措施把它降下来呢?

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T*x
29
比较了一下7"的nook HD,感觉比HD+流畅一点。

【在 a*o 的大作中提到】
: 可惜了一个上好的屏幕,哥也在店里摸了,色彩真是好。
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f*e
30
你可以用一些已知尺寸的珠子,从珠子顶到底是多长,你转旋钮转了多少。

【在 z***3 的大作中提到】
: 想请教一下关于显微镜的问题
: 一般的显微镜有旋钮可以调节物镜的上下移动,旋钮是有刻度的。 不知道有没办法可
: 以知道, 旋几格刻度就是物镜移动了2微米,旋几格刻度就是物镜移动了5微米呢? 有
: 什么实验可以验证呢?
: 其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
: http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
: 非常感谢
: (不好意思,已经修改,应该是微米)

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z*8
31
确实要看人家是和你真心讨论问题,要是两边都想搞清楚还都真懂,能很快说明白。只
要那边明白人有一点想装糊涂,找点借口说你这个证据不强,那个证据不完全相关,这
个方法不完全适用,说几年也没法说服。

【在 C***t 的大作中提到】
: 事在人为。如果你有铁样的证据,同时可以从理论上解释通了,我觉得对方是可以考虑
: 的。你的结果目前只给reviewers看过,大牛本人还不知道是不是?
: 以我最近的经历来说,我和大牛来往了一共11封emails, 开头还要多做解释,后来发现
: 彼此都是真做了这个课题的话,个中道道儿都是一点就透,不用废话,这个没做过的装
: 不来。所以我觉得说服大牛,比说服那些盲目崇拜大牛的外行其实更容易。

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k*0
32
re~~~
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d*d
33
谢谢 sofn
那么这个结果应该不要影响我们买房子吧 说实话 挺喜欢那个房子的
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T*x
34
同等deal了,据说以前hd+有过$200的deal。

【在 a*o 的大作中提到】
: 那好啊,就等deal了。
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p*l
35
拿块不太干净的cover slip,phase contrast 下看两面的灰尘,然后cover slip的厚
度除以两面聚焦位置的刻度。
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z*8
36
这。。。你准备咋整啊

【在 s******y 的大作中提到】
: 哎,这么说吧,你碰到的那个大牛可能和你没有那么多利益冲突,而且可能对你说的那
: 个话题并没有什么定论。我那个对头对我说的那个话题都下了20年定论了,而且都写进
: 教科书了,根据谣言,他是一直等着用那个来拿炸药奖的。以前也有别的人发现了一些
: 和他的定论不相符的问题,也就此挑战过他,结果被他的朋友们挤兑得后来只好放弃科
: 研去做行政工作了。

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u*o
37
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s*n
38
If radon is common in the area (such as Boston/New England), 4 before
mitigation should be OK. But you'd better mitigate the gas. No kidding. It
causes lung cancer

【在 d***d 的大作中提到】
: 谢谢 sofn
: 那么这个结果应该不要影响我们买房子吧 说实话 挺喜欢那个房子的

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e*d
39
是有过,但是这个价钱可以考虑nexus 7啊,起码可以视频。

【在 T*******x 的大作中提到】
: 同等deal了,据说以前hd+有过$200的deal。
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a*e
40
这样能测出个大概,但是是不准的。因为玻璃的折射率比空气高很多,光线会发生折射
,类似于水杯中的筷子,导致测得值比实际值小。
可以用两块载玻片,一上以下左右错开,聚焦到上表面后移开第一片玻璃,再聚焦到下
面一块的上表面。这个方法激光和白光都适用。

【在 S*R 的大作中提到】
: 如果是带激光的显微镜,可以精确知道刻度对应的厚度。
: 先聚焦到已经知道的玻璃厚度(如300微米的或者1 毫米)上表面,慢慢旋转,记下旋
: 转了多少刻度可以聚焦到玻璃另外一面。就可以算出来了。

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b*d
41
看能不能把大牛变成co-author.这样以后就成collaborator.
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y*n
42
chi
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e*t
43
买。装个抽气系统也就是1000块的事情,然后就无忧了。

【在 d***d 的大作中提到】
: 谢谢 sofn
: 那么这个结果应该不要影响我们买房子吧 说实话 挺喜欢那个房子的

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e*d
44
是有过,但是这个价钱可以考虑nexus 7啊,起码可以视频。

【在 T*******x 的大作中提到】
: 同等deal了,据说以前hd+有过$200的deal。
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p*l
45
玻璃折射率1.5,单片coverslip的厚度除以1.5就是等效的空气中的厚度。这种等效计
算方法在classial optical engineering 中叫 reduced thickness。

【在 a****e 的大作中提到】
: 这样能测出个大概,但是是不准的。因为玻璃的折射率比空气高很多,光线会发生折射
: ,类似于水杯中的筷子,导致测得值比实际值小。
: 可以用两块载玻片,一上以下左右错开,聚焦到上表面后移开第一片玻璃,再聚焦到下
: 面一块的上表面。这个方法激光和白光都适用。

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C*t
46
可能我们领域风气较好,总的来说,不管大小牛认不认识,平常写信过去,都比较友善
而且讲道理。坏事也有,听到的不多,而且也不是很绝(掐死你那种)。
有这么一条线,打得比较热闹,我第一个薄厚老板牵扯在内,但我不是严格做那个的,
是之前一个博士。当时跟另一个欧洲大牛打得很厉害,但说实话吧,那个博士的结果老
板叫我重复做下,我没做出来,所以,这个。。。

【在 z*****8 的大作中提到】
: 确实要看人家是和你真心讨论问题,要是两边都想搞清楚还都真懂,能很快说明白。只
: 要那边明白人有一点想装糊涂,找点借口说你这个证据不强,那个证据不完全相关,这
: 个方法不完全适用,说几年也没法说服。

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p*e
47
chi
avatar
P*e
48
常常开窗透气有用么?
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d*0
49
N7不是retina的屏幕

【在 e********d 的大作中提到】
: 是有过,但是这个价钱可以考虑nexus 7啊,起码可以视频。
avatar
l*k
50
用coverslip作spacer,做一个tunnel slide,中间滴上水。滴水之前,在tunnel上下
表面(glass slide和cover slip),tunnel的内侧用笔画两个标记,用来focus,然后
就是数圈圈了。
coverslip的厚度一般是0.17mm, 你可以用几个coverslip叠起来用。
avatar
s*y
51
我的方法就是找一个他们从来都不去的study section去申请。反正大部分申请都会有
至少两个地方是合适的。我当时的申请有三个地方可以review, 我仔细的查了每年的
roster,确定其中一个从来没有他们的人出现过,就把申请故意的往那个方向靠拢然后
交到那边去审批了。

【在 c*******d 的大作中提到】
: 请问胖老师这种师承关系有历史恩怨的情况,作为新人该怎么办?感觉一进场就被盯死
: 了,还没开始折腾呢。如果正好对方有人在study section且一时半会儿不会下来,是
: 不是基本没戏了?

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p*s
52
chi
avatar
d*d
53
开窗透气有用么
avatar
k*h
54
运气好的话,还可以更便宜 (trade in几个墨盒,搞点reward,再用个coupon之类的
)。我就是150的样子搞到的。
反正只是偶尔看看书,上上网,刷了cm10,感觉超值。屏幕比n7大又清晰,看pdf完全
没压力。

【在 T*******x 的大作中提到】
: 同等deal了,据说以前hd+有过$200的deal。
avatar
a*e
55
你说的是pathlength, 是计算光传播的时间延迟时候用到的;这里讨论的是实际厚度,
reduced thickness不适用。

【在 p*l 的大作中提到】
: 玻璃折射率1.5,单片coverslip的厚度除以1.5就是等效的空气中的厚度。这种等效计
: 算方法在classial optical engineering 中叫 reduced thickness。

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C*t
56
感觉暂时攀不上,但是paper里一定要大大acknowledge一下(也是应该的)。如果陆续
做下去,结果没有给推翻,那时再提合作感觉理直气壮一些。

【在 b*****d 的大作中提到】
: 看能不能把大牛变成co-author.这样以后就成collaborator.
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B*g
57
bless, cong, baozi
你现在发包子应该算咱俩一块发的吧,嘻嘻

【在 s*****m 的大作中提到】
: 每人一个,祝大家早绿
: 给这个事情受伤还的ID弥补一下呵呵
: 已经让未必中心的人处理
: http://mitbbs.com/article_t/WBCenter/12533919.html

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g*9
58
Yes, if you can leave window all the time, your indoor level will be close
to outdoor level.

【在 P******e 的大作中提到】
: 常常开窗透气有用么?
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T*x
59
我能视频的设备很多,相比来说分辨率高更吸引人。

【在 e********d 的大作中提到】
: 是有过,但是这个价钱可以考虑nexus 7啊,起码可以视频。
avatar
a*e
60
滴水是为了模拟样品折射率么?
coverslip有一个厚度范围,误差区间大概200微米,最好用卡尺或者micrometer量下

【在 l********k 的大作中提到】
: 用coverslip作spacer,做一个tunnel slide,中间滴上水。滴水之前,在tunnel上下
: 表面(glass slide和cover slip),tunnel的内侧用笔画两个标记,用来focus,然后
: 就是数圈圈了。
: coverslip的厚度一般是0.17mm, 你可以用几个coverslip叠起来用。

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s*y
61
我的实验室里有三条不同的实验路线,如果他死活不让我走这条路,那么我还可以有别
的出路。
前一阵子不还有人批评我说我实验室里的发展方向一塌糊涂么?我这其实是被逼的。因
为如果不进行diversify 分散风险的话,万一那条主线研究真的被他们掐死了的话我就
完了。

【在 z*****8 的大作中提到】
: 这。。。你准备咋整啊
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c*n
62
Chi
avatar
T*x
63
那太厉害了。

【在 k*h 的大作中提到】
: 运气好的话,还可以更便宜 (trade in几个墨盒,搞点reward,再用个coupon之类的
: )。我就是150的样子搞到的。
: 反正只是偶尔看看书,上上网,刷了cm10,感觉超值。屏幕比n7大又清晰,看pdf完全
: 没压力。

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l*k
64
恩ls有人提到index of refraction mismatch造成的z方向的压缩。看你的sample是什
么折射率了。通常只要有mismatch就需要有个修正,而这个修正和numerical apature
很有关系,不一定是折射率的比,尤其是对于大数值孔径的镜头。
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c*d
65
多谢回复!

【在 s******y 的大作中提到】
: 我的方法就是找一个他们从来都不去的study section去申请。反正大部分申请都会有
: 至少两个地方是合适的。我当时的申请有三个地方可以review, 我仔细的查了每年的
: roster,确定其中一个从来没有他们的人出现过,就把申请故意的往那个方向靠拢然后
: 交到那边去审批了。

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l*g
66
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l*k
67
是啊,大多数样品是1.33吧。别到时候lz量了半天,要么是没修正的,要么是按空气修
正的,最后定量计算z的时候出笑话。
我说的是盖玻片,170um那种,我的经验误差通常在5um以下。不过拿卡尺量量是必须的。

【在 a****e 的大作中提到】
: 滴水是为了模拟样品折射率么?
: coverslip有一个厚度范围,误差区间大概200微米,最好用卡尺或者micrometer量下

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z*8
68
多点路线有什么不好?只要能出文章,基本有一个主打的方向人家记住你就足够了,在
大部分学校都是这样吧。年轻的时候不搞宽一点,过几年想换方向就难了。

【在 s******y 的大作中提到】
: 我的实验室里有三条不同的实验路线,如果他死活不让我走这条路,那么我还可以有别
: 的出路。
: 前一阵子不还有人批评我说我实验室里的发展方向一塌糊涂么?我这其实是被逼的。因
: 为如果不进行diversify 分散风险的话,万一那条主线研究真的被他们掐死了的话我就
: 完了。

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c*s
69
chi
avatar
l*k
70
珠子自己是个透镜,有折射...

【在 f******e 的大作中提到】
: 你可以用一些已知尺寸的珠子,从珠子顶到底是多长,你转旋钮转了多少。
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w*g
71
在introduction里面写Personal communication with。。。我还从未见过。我觉得放
在文章最后面就可以了。
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xA
72
RE~~~~~
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t*t
73
一般说来,除了旋钮上有刻度,垂直的方向也有刻度
拿个尺子量一下垂直方向的刻度,然后除以旋钮上刻度的个数(一般转一圈,垂直方向
动一格),就是旋钮转一格移动的距离了
avatar
C*t
74
不是说paper的introduction。resubmit proposal时要在一页的introduction里回答
reviewers提出的问题。

【在 w******g 的大作中提到】
: 在introduction里面写Personal communication with。。。我还从未见过。我觉得放
: 在文章最后面就可以了。

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a*e
76
没具体测过coverslip的厚度误差,fisher标称的误差挺大的,实际上可能比较小,特
别是同一个batch的。

的。

【在 l********k 的大作中提到】
: 是啊,大多数样品是1.33吧。别到时候lz量了半天,要么是没修正的,要么是按空气修
: 正的,最后定量计算z的时候出笑话。
: 我说的是盖玻片,170um那种,我的经验误差通常在5um以下。不过拿卡尺量量是必须的。

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a*e
77
你这个是真大牛
要是碰上忽悠牛你就麻烦了
[在 Cadet (新兵) 的大作中提到:]
:之前一个proposal,给批得最厉害的就是,欧洲一个大牛作过这个课题了,你怎么都
没提。楼主接受胖前辈之前的教训,心想不搞定这个大牛,下步也不好走。而且楼主向
来是不怕出头的性格,立刻给大牛写信过去,自我介绍,说你做这个了吗找不到呀。大
牛回信,是啊,做了五年了,但都是发的会议,pubmed查不到(我晕!)。我于是自我
介绍了一下我的发现。简单说就是,大牛用了A和B两种手法,A更clinical,但目前只能
:做第一步。B是探讨性的,但他做完第一步没有继续往下做。我用B作了第二步,结果
让人跌眼球。
:...........
avatar
a*1
78
chi
avatar
l*k
79
还是适用的。看lz的镜头是water immersion, oil immersion还是啥immersion都没有
的。
http://www.microscopyu.com/articles/optics/waterimmersionobject

【在 a****e 的大作中提到】
: 你说的是pathlength, 是计算光传播的时间延迟时候用到的;这里讨论的是实际厚度,
: reduced thickness不适用。

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O*t
80
还有人这么多管闲事?

【在 s******y 的大作中提到】
: 我的实验室里有三条不同的实验路线,如果他死活不让我走这条路,那么我还可以有别
: 的出路。
: 前一阵子不还有人批评我说我实验室里的发展方向一塌糊涂么?我这其实是被逼的。因
: 为如果不进行diversify 分散风险的话,万一那条主线研究真的被他们掐死了的话我就
: 完了。

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s*2
81
祝大家早绿!
祝LZ早绿!
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t*t
82
没那么麻烦
在白纸上用黑笔画个叉
找个1mm的塑料或者玻璃片,用红笔画个圈
先聚焦到白纸上的黑叉
放上片,再聚焦到红圈,看看要转多少圈

【在 f******e 的大作中提到】
: 你可以用一些已知尺寸的珠子,从珠子顶到底是多长,你转旋钮转了多少。
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O*t
83
Good job and good luck!
感觉不提倡为了扳而扳,一般没有好结果,而且not novel enough. 如果是
unexpected 的结论,just go for it, maybe you will get lucky.

【在 C***t 的大作中提到】
: 之前一个proposal,给批得最厉害的就是,欧洲一个大牛作过这个课题了,你怎么都没
: 提。楼主接受胖前辈之前的教训,心想不搞定这个大牛,下步也不好走。而且楼主向来
: 是不怕出头的性格,立刻给大牛写信过去,自我介绍,说你做这个了吗找不到呀。大牛
: 回信,是啊,做了五年了,但都是发的会议,pubmed查不到(我晕!)。我于是自我介
: 绍了一下我的发现。简单说就是,大牛用了A和B两种手法,A更clinical,但目前只能
: 做第一步。B是探讨性的,但他做完第一步没有继续往下做。我用B作了第二步,结果让
: 人跌眼球。
: Anyway,大牛听了我的结果很激动,发了一堆文件过来,说B不严谨,结论证的有可能
: 是我说的X,但也有可能是Y。他说,你把这个参数从500上调到1500,还是这样,我就
: 更信是X。我说给我一个星期。昨天给他写信,我说你看看图,1500还是一样。大牛昨

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r*o
84
...
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a*e
85
我理解的reduced thickness 是infinite system里的光程关系,和NA无关。可能理解
有误。

【在 l********k 的大作中提到】
: 还是适用的。看lz的镜头是water immersion, oil immersion还是啥immersion都没有
: 的。
: http://www.microscopyu.com/articles/optics/waterimmersionobject

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D*r
86
别扯别的 因为你是美女
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c*o
87
chi
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s*j
88
5um太小了. 一般 160um - 190um 都可以归到 #1.5 里面去.

的。

【在 l********k 的大作中提到】
: 是啊,大多数样品是1.33吧。别到时候lz量了半天,要么是没修正的,要么是按空气修
: 正的,最后定量计算z的时候出笑话。
: 我说的是盖玻片,170um那种,我的经验误差通常在5um以下。不过拿卡尺量量是必须的。

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m*s
89
分散风险那是必须的,被人卡死了以后就悲剧了

【在 s******y 的大作中提到】
: 我的方法就是找一个他们从来都不去的study section去申请。反正大部分申请都会有
: 至少两个地方是合适的。我当时的申请有三个地方可以review, 我仔细的查了每年的
: roster,确定其中一个从来没有他们的人出现过,就把申请故意的往那个方向靠拢然后
: 交到那边去审批了。

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c*i
90
祝大家早率
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s*j
91
根本不是一回事. 难为你还 "classial optical engineering".

【在 p*l 的大作中提到】
: 玻璃折射率1.5,单片coverslip的厚度除以1.5就是等效的空气中的厚度。这种等效计
: 算方法在classial optical engineering 中叫 reduced thickness。

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m*s
92
同意楼主的观点啊,这个还是要看大牛的性格吧,有些好说话,有些就不一定了

【在 s******y 的大作中提到】
: 哎,我真希望我也能象你这么做。
: 但是我所对头的那个大牛,不是一个容易听进不同意见的人,而且我和他之间的师承关
: 系有历史恩怨,所以我从来不敢联系他。

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M*n
93
thanks! bless !
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D*a
94
为啥要量这个,找个confocal量你要量的东西不就完了。n幅图像 x z轴距离
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y*x
95
pai
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z*3
96
非常感谢ls各位的信息呀
其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
悲曲的是,我们的raman旋钮上有刻度,垂直的方向没有刻度。。。
物镜好像是不能泡的
因为实验的时候是需要每几微米移动一下,这个距离的控制还是很重要的
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l*k
98
lz的样品可能比较大,他提的单位都是毫米,confocal也就看看几十微米厚的sample撑
死了。而且可能他手头就那个显微镜,没有别的。再者,lz的钻研精神和好奇心还是真
心值得提倡的。
confocal也有折射率不匹配造成的z-distortion的问题,提醒你一下。对于高数值孔径
的显微镜,这个修正可以达到100%。

【在 D*a 的大作中提到】
: 为啥要量这个,找个confocal量你要量的东西不就完了。n幅图像 x z轴距离
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s*y
100
用我说的那个方法最简单也最直接。
但是如果你需要非常准确的话(10纳米量级),必须用motorized stage.

【在 z***3 的大作中提到】
: 非常感谢ls各位的信息呀
: 其实我现在要做的是关于raman的depth profiling
: http://www.mitbbs.com/article_t0/Chemistry/31374951.html
: 悲曲的是,我们的raman旋钮上有刻度,垂直的方向没有刻度。。。
: 物镜好像是不能泡的
: 因为实验的时候是需要每几微米移动一下,这个距离的控制还是很重要的

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u*n
101
re
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a*e
102
NA不大的话这个方法行的

【在 s******y 的大作中提到】
: 用我说的那个方法最简单也最直接。
: 但是如果你需要非常准确的话(10纳米量级),必须用motorized stage.

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fs
103
baozi ~~~
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l*k
104
10nm,上piezo

【在 s******y 的大作中提到】
: 用我说的那个方法最简单也最直接。
: 但是如果你需要非常准确的话(10纳米量级),必须用motorized stage.

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z*o
105
bless
pai
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D*a
106
显微镜能放10毫米的样品照相吗?
我们楼公用的共聚焦是直接设定移动的微米距离的,看着也挺古董了。
能不能讲讲什么叫z-distortion?或者给个网页什么的。我刚入门级别,谢拉。

【在 l********k 的大作中提到】
: lz的样品可能比较大,他提的单位都是毫米,confocal也就看看几十微米厚的sample撑
: 死了。而且可能他手头就那个显微镜,没有别的。再者,lz的钻研精神和好奇心还是真
: 心值得提倡的。
: confocal也有折射率不匹配造成的z-distortion的问题,提醒你一下。对于高数值孔径
: 的显微镜,这个修正可以达到100%。

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l*k
108
我们隔壁实验室作worm的,他们用的显微镜放大倍数低,working distance有好几厘米
,都是直接放petri dish。放大倍数越高,以及对numerical apature要求越高的镜头
,working distance通常越短。而轴向(z)分辨率最重要的一个参数就是NA。所以作z-
sectioning能达到300nm以下解析度的显微镜,比如confocal,objective一般NA都在1.
4以上,而working distance通常不超过0.3mm.
关于折射率不匹配造成的z-distortion,日常生活经验就常见,比如长辈曾经说游泳池
、水塘实际比看着深,不要下去游泳之类。
一般来讲,只要有mismatch就会有distortion,这也是water immersion objective相
比oil immersion的优点之一(盖玻片两边都是水)。这个distortion的修正粗略地讲
就是两边折射率的比值,但是对于大角度的非傍轴光线就不适用了。所以高NA的镜头的
修正不是简单的1.5/1.33(玻璃/水)。或者1/1.33(空气/水) 更详细的解释看我
前面贴的图和link。
microscopyu.com是个很好的地方,东西挺新,也比较准确。

【在 D*a 的大作中提到】
: 显微镜能放10毫米的样品照相吗?
: 我们楼公用的共聚焦是直接设定移动的微米距离的,看着也挺古董了。
: 能不能讲讲什么叫z-distortion?或者给个网页什么的。我刚入门级别,谢拉。

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l*k
110
A comparison of imaging ray traces that occur between the specimen and
immersion objectives (both oil and water) is presented in Figure 3, along
with a geometric model prediction of an x-z image for a fluorescent bead 100
micrometers below the interface in aqueous media. In Figure 3(a), the
sphere on the left represents the actual shape of the fluorescent bead,
while the elongated shape on the right is the impression provided by imaging
with an oil immersion objective. Ray traces (yellow arrows in Figure 3)
from the bead into the front lens of an oil immersion objective (Figure 3(b)
) and water immersion objective (Figure 3(c)) reveal details about how the
refractive index mismatch obscures actual specimen geometry. In aqueous
media, the bead is distorted into an apparent elongated oval when imaged
with an oil immersion objective as illustrated in Figure 3(b), but remains
spherical when using a water immersion objective (Figure 3(c)). The actual
specimens are represented by a blue sphere and the apparent images are
indicated as a red oval or red sphere.

【在 D*a 的大作中提到】
: 显微镜能放10毫米的样品照相吗?
: 我们楼公用的共聚焦是直接设定移动的微米距离的,看着也挺古董了。
: 能不能讲讲什么叫z-distortion?或者给个网页什么的。我刚入门级别,谢拉。

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D*a
112
很清楚啊,多谢!

100
imaging
b)

【在 l********k 的大作中提到】
: A comparison of imaging ray traces that occur between the specimen and
: immersion objectives (both oil and water) is presented in Figure 3, along
: with a geometric model prediction of an x-z image for a fluorescent bead 100
: micrometers below the interface in aqueous media. In Figure 3(a), the
: sphere on the left represents the actual shape of the fluorescent bead,
: while the elongated shape on the right is the impression provided by imaging
: with an oil immersion objective. Ray traces (yellow arrows in Figure 3)
: from the bead into the front lens of an oil immersion objective (Figure 3(b)
: ) and water immersion objective (Figure 3(c)) reveal details about how the
: refractive index mismatch obscures actual specimen geometry. In aqueous

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s*1
114
我用过两种显微镜,Nikon & Olympus,貌似都是一小格一微米。Manual里面可能有。
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c*s
115
re
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z*3
116
先谢谢ls各位
Manual确实有句话 High stability BX 40. Focus graduation 1 micro meter.
但不确定是否意思就是每小格一微米
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l*2
118
chi
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G*1
120
cong
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c*d
121
re
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gv
122
re a re
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H*6
124
chi!
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C*y
125
thanks
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P*h
126
D
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Y*L
128
chi
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A*7
130
RE
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r*9
131
rerere
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h*n
132
pat.pat.
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b*1
133
pai
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m*n
134
祝大家早绿!
祝LZ早绿!

【在 s*****m 的大作中提到】
: 每人一个,祝大家早绿
: 给这个事情受伤还的ID弥补一下呵呵
: 已经让未必中心的人处理
: http://mitbbs.com/article_t/WBCenter/12533919.html

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z*x
135
cong and bless all of us.
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H*a
136
baozi ~~~
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m*o
137
祝大家早绿!
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b*w
138
D
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w*t
139
bless u!
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c*n
140
吃包子,祝一切顺利!!
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z*q
141
pai
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a*8
143
re
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oi
144
RE
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m*d
145
chi
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V5
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ding a ding
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q*1
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re
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r*m
150
chi
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S*2
151
pai
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s*a
152
re
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xA
154
D
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x*1
155
re
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YR
156
pai
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p*g
158
pai
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w*b
160
re
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s*r
161
祝大家早绿
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b*s
162
chi`
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b*n
163
Bless us!
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S*y
164
过去就过去了。
包子要吃。

【在 s*****m 的大作中提到】
: 每人一个,祝大家早绿
: 给这个事情受伤还的ID弥补一下呵呵
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F*a
166
thanks and bless all

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k*o
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chi
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l*i
170
pai
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G*r
173
chi!
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l*g
175
bless
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p*r
176
bless
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w*q
177
re
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c*0
181
谢谢!
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x*u
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re
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v*g
184
re
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l*g
187
祝福
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f*s
189
chi! bless!
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n*z
190
big bless!
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d*e
193
re
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HL
194
cong
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l*e
195
祝绿!
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g*l
196
bless
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D*6
198
祝大家早绿!
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I*i
200
chi
everyone be green soon

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s*3
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bless, chi
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C*8
203
Bless all!
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E*H
204
谢谢。吃包子。
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a*n
205
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p*u
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p*y
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感谢!
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f*y
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h*l
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C*1
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Pai baozi

【在 s*****3 的大作中提到】
: bless, chi
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c*y
224
Bless
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c*e
226
Bless. fingered crossed.

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R*r
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i*t
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派上
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h*a
259
pai
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j*y
260
bless
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o*s
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thx. chi
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f*0
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l*c
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Re
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i*i
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re
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c*h
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chi baozi
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t*n
266
chi
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x*a
268
re

【在 s**d 的大作中提到】
: Re
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l*o
269
re
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J*y
270
chi
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r*n
271
祝大家早日拿到

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n*0
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chi
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chi
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274
re
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j*4
275
pai
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s*t
277
re
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s*d
278
pai
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l*m
280
绿了就自由了 希望大家都能早日如愿以偿
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l*o
281
re
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i*l
282
Bless all
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w*s
283
re
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c*n
284
hao chi

【在 i***l 的大作中提到】
: Bless all
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c*n
285
hao chi

【在 i***l 的大作中提到】
: Bless all
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h*8
286
谢谢。

【在 c**y 的大作中提到】
: 谢谢。
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m*l
287
thanks

【在 H******i 的大作中提到】
: Thanks.
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T*P
289
pai.
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