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immunoprecipitation 实验遇到的奇怪问题。 请大家帮忙看看。
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immunoprecipitation 实验遇到的奇怪问题。 请大家帮忙看看。# Biology - 生物学
m*a
1
这里每次回复或者发文章都要验证码,而且总是说验证码过期,烦死人了,为何要这样啊,
我一直搞不懂,有经验的能说说为何这样折腾人吧.
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s*a
2
大家好!
图1,IgG也有相同的条带。
图2,IP后的sample,即使不加一抗,只加二抗,在同样的位置也有条带。而且三种不
同的二抗都会出现这条带。
大家遇到过相同的问题么?怎么解决的。谢谢!
另外,图1中的“target” 那条带有可能是我想要的么?单从分子量上看,“target”
跟 “input” 的分子量一样么?
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n*e
3
100贴以下都要受罪.
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o*d
4
Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP
.
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s*a
5
谢谢!图2该怎么解释?我觉得非常奇怪。
另外有什么其他方法来验证图1的“target” 条带是我想要的,而不是non-specific。

IP

【在 o**d 的大作中提到】
: Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP
: .

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o*d
6
pre-clean应该后如果你的target条带还在,应该能说明问题。
另外一个方法就是换不同的antibody,或reverse IP。
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b*8
8
我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗
体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。
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s*a
9
谢谢!
您的意思是有可能抗体Ig本身的条带么?
空跑一个lane,然后加一抗?

【在 b***8 的大作中提到】
: 我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗
: 体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。

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