immunoprecipitation 实验遇到的奇怪问题。 请大家帮忙看看。# Biology - 生物学
m*a
1 楼
这里每次回复或者发文章都要验证码,而且总是说验证码过期,烦死人了,为何要这样啊,
我一直搞不懂,有经验的能说说为何这样折腾人吧.
我一直搞不懂,有经验的能说说为何这样折腾人吧.
s*a
2 楼
大家好！
图1，IgG也有相同的条带。
图2，IP后的sample，即使不加一抗，只加二抗，在同样的位置也有条带。而且三种不
同的二抗都会出现这条带。
大家遇到过相同的问题么？怎么解决的。谢谢！
另外，图1中的“target” 那条带有可能是我想要的么？单从分子量上看，“target”
跟 “input” 的分子量一样么？
图1，IgG也有相同的条带。
图2，IP后的sample，即使不加一抗，只加二抗，在同样的位置也有条带。而且三种不
同的二抗都会出现这条带。
大家遇到过相同的问题么？怎么解决的。谢谢！
另外，图1中的“target” 那条带有可能是我想要的么？单从分子量上看，“target”
跟 “input” 的分子量一样么？
n*e
3 楼
100贴以下都要受罪.
o*d
4 楼
Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP
.
.
s*a
5 楼
谢谢！图2该怎么解释？我觉得非常奇怪。
另外有什么其他方法来验证图1的“target” 条带是我想要的，而不是non-specific。
IP
【在 o**d 的大作中提到】
: Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP
: .
另外有什么其他方法来验证图1的“target” 条带是我想要的，而不是non-specific。
IP
【在 o**d 的大作中提到】
: Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP
: .
o*d
6 楼
pre－clean应该后如果你的target条带还在，应该能说明问题。
另外一个方法就是换不同的antibody，或reverse IP。
另外一个方法就是换不同的antibody，或reverse IP。
o*d
7 楼
参照
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31632831.html，
有的时候IgG也不是完全normal的IgG。
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31632831.html，
有的时候IgG也不是完全normal的IgG。
b*8
8 楼
我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗
体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。
体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。
s*a
9 楼
谢谢！
您的意思是有可能抗体Ig本身的条带么？
空跑一个lane，然后加一抗？
【在 b***8 的大作中提到】
: 我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗
: 体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。
您的意思是有可能抗体Ig本身的条带么？
空跑一个lane，然后加一抗？
【在 b***8 的大作中提到】
: 我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗
: 体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。
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