immunoprecipitation 实验遇到的奇怪问题。 请大家帮忙看看。# Biology - 生物学m*a2012-09-10 07:091 楼这里每次回复或者发文章都要验证码,而且总是说验证码过期,烦死人了,为何要这样啊,我一直搞不懂,有经验的能说说为何这样折腾人吧.
s*a2012-09-10 07:092 楼大家好!图1,IgG也有相同的条带。图2,IP后的sample,即使不加一抗,只加二抗,在同样的位置也有条带。而且三种不同的二抗都会出现这条带。大家遇到过相同的问题么?怎么解决的。谢谢!另外,图1中的“target” 那条带有可能是我想要的么?单从分子量上看,“target”跟 “input” 的分子量一样么?
s*a2012-09-10 07:095 楼谢谢!图2该怎么解释?我觉得非常奇怪。另外有什么其他方法来验证图1的“target” 条带是我想要的,而不是non-specific。IP【在 o**d 的大作中提到】: Try to pre-clean your cell lysate with control IgG+beads for 2 hrs before IP: .
o*d2012-09-10 07:097 楼参照http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31632831.html,有的时候IgG也不是完全normal的IgG。
s*a2012-09-10 07:099 楼谢谢!您的意思是有可能抗体Ig本身的条带么?空跑一个lane,然后加一抗?【在 b***8 的大作中提到】: 我遇到图2类似的现象。条带显示的可能是IP所用的抗体。可以做个不加lysate只加抗: 体的IP对照。或者用TrueBlot的二抗。