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提蛋白的问题# Biology - 生物学
q*n
1
昨天变叔做了一个海鲜豆腐煲,谗s人啦,今天跟个风。
热锅,bacon,蒜蓉,椰奶,开锅后放入喜欢的海鲜,芥兰花,黑橄榄,用盐,黑胡椒调味,最后撒上番茄丁,跟九层塔。
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f*e
3
请问为什么提一个蛋白用超声打碎细菌时会有很多泡沫,提这个蛋白的变异体超声打碎
细菌时就不会有泡沫。这个泡沫是有什么导致的。
多谢
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R*s
4
sf~
秋水JJ这个比俺那个强多了啊, 俺只会拿汤料对付, 呵呵
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s*e
5
因为某种特定蛋白导致泡沫增多是很少见的情况,你确认不是超声探头离液面太近?
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q*n
6
但是我更喜欢你做的那个啊,样子特别好,我这个到是啦里邋遢了呢

【在 R*****s 的大作中提到】
: sf~
: 秋水JJ这个比俺那个强多了啊, 俺只会拿汤料对付, 呵呵

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s*y
7
出现泡沫是因为可溶性的蛋白原则上就是一种变相的detergent.
变异体没有泡沫很可能是因为蛋白产生了aggregate,可溶性变差了。

【在 f******e 的大作中提到】
: 请问为什么提一个蛋白用超声打碎细菌时会有很多泡沫,提这个蛋白的变异体超声打碎
: 细菌时就不会有泡沫。这个泡沫是有什么导致的。
: 多谢

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s*6
8
芥兰花是什么。。秋水阿姨-w-(哇卡卡~~
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b*y
9
Unless your protein expression is super high, I don't think the foam was
formed because of your protein. After all, you are breaking the bacterial
cells and a lot more other stuff around.
To figure it out, follow the lines of stilltide's question or different
buffer compositions were accidentally used for the two cultures, especially
detergent.
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q*n
10
不好意思,说错了,应该是西兰花,broccoli.

【在 s*******6 的大作中提到】
: 芥兰花是什么。。秋水阿姨-w-(哇卡卡~~
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f*e
11
谢谢大家的回复, 第一次超声发现很多泡沫,上网查了说有可能探头插的不深.
第二次做,很注意,尽可能插的很深,但还是很多泡沫. 我回头再试几次.

especially

【在 b******y 的大作中提到】
: Unless your protein expression is super high, I don't think the foam was
: formed because of your protein. After all, you are breaking the bacterial
: cells and a lot more other stuff around.
: To figure it out, follow the lines of stilltide's question or different
: buffer compositions were accidentally used for the two cultures, especially
: detergent.

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c*m
12
呼唤传真机~

调味,最后撒上番茄丁,跟九层塔。

【在 q**********n 的大作中提到】
: 昨天变叔做了一个海鲜豆腐煲,谗s人啦,今天跟个风。
: 热锅,bacon,蒜蓉,椰奶,开锅后放入喜欢的海鲜,芥兰花,黑橄榄,用盐,黑胡椒调味,最后撒上番茄丁,跟九层塔。

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U*l
13
跑个SDS-PAGE看看吧。养细菌其实不是那么reproducible的,有没有泡沫这事有很多可
能的原因,很有可能和你要提的蛋白没啥关系。
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c*2
14
nice!
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l*1
15
0.1% Triton X-100 加了后 再试一下

【在 f******e 的大作中提到】
: 谢谢大家的回复, 第一次超声发现很多泡沫,上网查了说有可能探头插的不深.
: 第二次做,很注意,尽可能插的很深,但还是很多泡沫. 我回头再试几次.
:
: especially

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s*n
16
颜色配得真好

调味,最后撒上番茄丁,跟九层塔。

【在 q**********n 的大作中提到】
: 昨天变叔做了一个海鲜豆腐煲,谗s人啦,今天跟个风。
: 热锅,bacon,蒜蓉,椰奶,开锅后放入喜欢的海鲜,芥兰花,黑橄榄,用盐,黑胡椒调味,最后撒上番茄丁,跟九层塔。

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