J*7
2 楼
是有两个结尾?
大神最后的怪笑是指他真的人格分裂了?
大神最后的怪笑是指他真的人格分裂了?
o*n
3 楼
以前装了CM7,玩了一段时间用WebOS doctor删掉。现在重新装了CM9,发现以前装的
apps什么的全在, 而且不能播放youtube或者flash。请问有什么高招? 谢谢!
apps什么的全在, 而且不能播放youtube或者flash。请问有什么高招? 谢谢!
a*1
4 楼
最近正在搞这个,
把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
有一个分子量小一些的条带;
只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
多谢
把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
有一个分子量小一些的条带;
只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
多谢
K*o
6 楼
先一键删除了CM9,然后用webos自带的security erase,然后用WebOS doctor重刷,然
后重装CM9?
后重装CM9?
S*s
7 楼
既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
可能的解释就是
GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
Actin+GSSG->Actin-SSH
但有两个问题
1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
加DTT多煮煮,看看是否还在
另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
这种情况时有发生
If it is really S-glutathiolation, you should go in vivo.
1)Check whether this modification happens under physiological and
pathological or drug treatment conditions.
2)Whether it is functional
Good luck.
【在 a******1 的大作中提到】
: 最近正在搞这个,
: 把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
: 有一个分子量小一些的条带;
: 只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
: 一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
: 多谢
可能的解释就是
GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
Actin+GSSG->Actin-SSH
但有两个问题
1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
加DTT多煮煮,看看是否还在
另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
这种情况时有发生
If it is really S-glutathiolation, you should go in vivo.
1)Check whether this modification happens under physiological and
pathological or drug treatment conditions.
2)Whether it is functional
Good luck.
【在 a******1 的大作中提到】
: 最近正在搞这个,
: 把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
: 有一个分子量小一些的条带;
: 只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
: 一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
: 多谢
s*n
8 楼
有传言可能会拍续集,所以留个悬念,后面可以随需要发挥,想怎么编就怎么演绎下去
。个人观点。
。个人观点。
b*8
10 楼
薄成功把自己杀人案洗白了
薄知道自己被吊打招供杀人是个定时炸弹
于是趁这次事件主动捅出来
并成功嫁祸他人
于是把自己彻底洗白
实际上上次垒球场杀人以后,事后薄早就找机会把尸体处理掉了,但难免会留下些蛛丝
马迹
结果蔺大傻瓜中了薄的奸计,画蛇添足伪造了现场,把真正线索都掩盖了
薄知道自己被吊打招供杀人是个定时炸弹
于是趁这次事件主动捅出来
并成功嫁祸他人
于是把自己彻底洗白
实际上上次垒球场杀人以后,事后薄早就找机会把尸体处理掉了,但难免会留下些蛛丝
马迹
结果蔺大傻瓜中了薄的奸计,画蛇添足伪造了现场,把真正线索都掩盖了
a*1
11 楼
最近正在搞这个,
把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
有一个分子量小一些的条带;
只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
多谢
把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
有一个分子量小一些的条带;
只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
多谢
S*s
12 楼
既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
可能的解释就是
GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
Actin+GSSG->Actin-SSH
但有两个问题
1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
加DTT多煮煮,看看是否还在
另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
这种情况时有发生
If it is really S-glutathiolation, you should go in vivo.
1)Check whether this modification happens under physiological and
pathological or drug treatment conditions.
2)Whether it is functional
Good luck.
【在 a******1 的大作中提到】
: 最近正在搞这个,
: 把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
: 有一个分子量小一些的条带;
: 只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
: 一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
: 多谢
可能的解释就是
GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
Actin+GSSG->Actin-SSH
但有两个问题
1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
加DTT多煮煮,看看是否还在
另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
这种情况时有发生
If it is really S-glutathiolation, you should go in vivo.
1)Check whether this modification happens under physiological and
pathological or drug treatment conditions.
2)Whether it is functional
Good luck.
【在 a******1 的大作中提到】
: 最近正在搞这个,
: 把actin, GSH, H2O2混一块儿,跑western, anti-actin, 结果除了actin自身的条带还
: 有一个分子量小一些的条带;
: 只把actin和GSH混一块儿就只有一条正常的带;
: 一直没想出个合理的解释,请问版上的大家有何高见哇~
: 多谢
s*y
14 楼
Summerwinds说的有道理,但是鉴于那个band size 变小,我再补充一个可能性,
就是actin oxidized。这种情况下是可能会跑得更快的(因为构型变了)
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
就是actin oxidized。这种情况下是可能会跑得更快的(因为构型变了)
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
a*1
15 楼
是啊,刚开始做这个,好多都不懂,
我的loading buffer里加了b-ME,92C煮了8分钟; 其中有dtt的sample的确分子量小
的那条band变少了。
贴了个western图:左边是actin(1ug)+gsh(500uM)+h2o2(500uM) 在25ul反应体系,上
样量是1/2, 右边是在此基础上再加了10mM DTT的western 结果 ,anti-actin, 从上
至下第一条band是actin的大小(42kD),小的大概27,28kD
如果是upshift就好明白多了哇,这是第二次出现这种情况
IEF没怎么接触过,先做点homework去.
多谢
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
我的loading buffer里加了b-ME,92C煮了8分钟; 其中有dtt的sample的确分子量小
的那条band变少了。
贴了个western图:左边是actin(1ug)+gsh(500uM)+h2o2(500uM) 在25ul反应体系,上
样量是1/2, 右边是在此基础上再加了10mM DTT的western 结果 ,anti-actin, 从上
至下第一条band是actin的大小(42kD),小的大概27,28kD
如果是upshift就好明白多了哇,这是第二次出现这种情况
IEF没怎么接触过,先做点homework去.
多谢
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
a*1
17 楼
in vivo 的actin s-glutathionylation 不是早被证实了的么,以前也用cell lysate
做过了
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
做过了
information
【在 S*********s 的大作中提到】
: 既然你做这么specific的实验,想必你在做protein S-glutathiolation的研究
: 可能的解释就是
: GSH+GSH(+H2O2)->GSSG
: Actin+GSSG->Actin-SSH
: 但有两个问题
: 1)你跑了Western,正常情况应该加了DTT,不应该看到modified actin
: 加DTT多煮煮,看看是否还在
: 另外,可以coincubate with IAA or IAM,do IEF,you should get more information
: 2) 一般来说band should go upshift, 但你看到了downshift,所以不敢肯定
: 这种情况时有发生
相关阅读
诚聘神经、骨科、肿瘤、干细胞、内分泌、妇科等兼职求带文本的听力资料韩春雨造假或许对科研界来说是好事向编辑询问审稿状态给中国的迷茫的生命科学家自称受种族歧视被解雇 华裔博士后枪击前老板 (转载)韩春雨现在就缩头不出来人体移植叶绿体基因系列进行光合作用西奈山的老中fired的AP把dean给shot了千少, 千老和老千饶毅比较精明,张峰比较傻。A central New Jersey Biotech company hiring a Sales/BD Manager我是千老 (转载)给自带干粮做访学的建议求文献,谢谢再招一个research associate西奈山的土匪头子下了狠手paper help提醒千老们都购买life和accident insurance手握资源的实验生物大牛都很会洗脑