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DNA Transfection问题

DNA Transfection问题# Biology - 生物学

a*u2013-01-06 08:01

1 楼

想搞些根雕之类的打发时间，哪里可以弄到树根？

h*y2013-01-06 08:01

2 楼

请问大家，对于转染效率低的细胞，能不能多次重复转染，比如每24小时转一次，来提
高转染的效率？有人试过吗？这样做可能的副作用有什么？

T*m2013-01-06 08:01

3 楼

这个在美国比较难吧？除非自己有森林。

【在 a****u 的大作中提到】

: 想搞些根雕之类的打发时间，哪里可以弄到树根？

w*r2013-01-06 08:01

4 楼

效率低的细胞还是用virus或者electroporation吧。
转染试剂通常对细胞有毒性，每24小时折腾一次的话，估计细胞都死差不多了

h*y2013-01-06 08:01

5 楼

Thank you.
Do you know why transfection reagent(s) are toxic to cells?

【在 w********r 的大作中提到】

: 效率低的细胞还是用virus或者electroporation吧。
: 转染试剂通常对细胞有毒性，每24小时折腾一次的话，估计细胞都死差不多了

s*s2013-01-06 08:01

6 楼

每天在你皮上戳无数个眼，你说爽不爽

【在 h******y 的大作中提到】

: Thank you.
: Do you know why transfection reagent(s) are toxic to cells?

h*y2013-01-06 08:01

7 楼

为什么戳几个眼细胞就会不爽呢？这些转染试剂（多半是两性分子）引起细胞死亡的机
制是什么呢？

【在 s******s 的大作中提到】

: 每天在你皮上戳无数个眼，你说爽不爽

l*12013-01-06 08:01

8 楼

hsp90/70 epigenetic modification?
pls refer
同主题阅读：分子进化机制和环境的关系
[版面:生物学][首篇作者：sunnyday] , 2012年12月19日10:22:09
[首页] [上页][下页][末页] [分页:1 2 ]
sunnyday
[ 1 ]
发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
标题: 分子进化机制和环境的关系
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Dec 19 10:22:09 2012, 美东)
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31765967.html

h*y2013-01-06 08:01

9 楼

能展开讲讲吗？多谢

【在 l**********1 的大作中提到】

: hsp90/70 epigenetic modification?
: pls refer
: 同主题阅读：分子进化机制和环境的关系
: [版面:生物学][首篇作者：sunnyday] , 2012年12月19日10:22:09
: [首页] [上页][下页][末页] [分页:1 2 ]
: sunnyday
: [ 1 ]
: 发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
: 标题: 分子进化机制和环境的关系
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Dec 19 10:22:09 2012, 美东)

l*12013-01-06 08:01

10 楼

不用谢
Li D et al. (2011)
HSP90 Causes Aberrant Stabilization of Mutant p53 in
Functional Inactivation of Endogenous MDM2 and CHIP by human cancer cells
Mol Cancer Res. 9: 577–588.
HTTP: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3097033/
plus
参看艳阳天jj/mm 的原帖下吧
昨天晚上听了Susan Lindquist 有关HSP90 的讲座后被震惊了。虽然以前这里也有人提
起过她以前的文章，但是那些文章都是一些计算分析为主的，所以我也比较不怎么当一
回事。昨天她谈了她们做的一些关于防止真菌进化出抗药性的实验，HSP90
抑制剂对于真菌没有直接杀伤力，但是综合和其他有直接杀伤力的药一起用的时候可以
非常好的防止真菌出现抗药性而复发。她最后的结论是HSP90的活性对于容忍机体的进
化有重要作用。高活性的HSP90会导致突变体能够成功存活下来。听完之后我忍不住跑
上去问了她几个问题，其中一个就是关于挨饿的问题，因为在starvation的时候据说那
些HSP活性会升高，那这样是不是会导致群体里面出现突变的几率升高？她毫不犹豫地
就说会，并说她们在酵母里面已经看到了类似现象了。然后我问了她有关HSP 在癌症
metastasis 里的因素的问题，她说她们正在做。
我其实还有另外一个问题，就是有关HSP90掩盖表型的问题，因为高活性HSP90虽然能够
导致突变体能够成功存活下来，但是貌似也会在表面上使得其表型趋于中性化? 如此说
来，这个机制是在保证机体总体大致稳定的前提下进行渐进进化的吧？可惜周围等着和
她说话的人太多了，我就没好意思缠着她继续问下去。
－－－
发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
标题: Re: 分子进化机制和环境的关系
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 2 18:32:07 2013, 美东)
还不完全是这样。这个基因影响的一个主要效果是其他基因的表型，而不是这个基因本
身的表型。
上面有人也提出了类似你这个问题，在我看来，这个和synthetic lethality 还是有一
些区别的。
这个蛋白的特殊之处是在它的功效下，能够允许其他基因出现更多的突变，而不是直接
影响了个体的fitness （虽然几乎可以肯定也有这个效果的存在）。
所以这个研究的意义和其他那些同时突变两个基因的意义并不是完全一样的。

http://www.mitbbs.com/article_t1/Biology/31765967_0_2.html

h*y2013-01-06 08:01

11 楼

没看懂。这怎么能和transfection 试剂的毒性联系起来呢？

【在 l**********1 的大作中提到】

: 不用谢
: Li D et al. (2011)
: HSP90 Causes Aberrant Stabilization of Mutant p53 in
: Functional Inactivation of Endogenous MDM2 and CHIP by human cancer cells
: Mol Cancer Res. 9: 577–588.
: HTTP: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3097033/
: plus
: 参看艳阳天jj/mm 的原帖下吧
: 昨天晚上听了Susan Lindquist 有关HSP90 的讲座后被震惊了。虽然以前这里也有人提
: 起过她以前的文章，但是那些文章都是一些计算分析为主的，所以我也比较不怎么当一

l*12013-01-06 08:01

12 楼

楼主每隔24 hrs transfection 外来shRNA/miRNA 可以保证对宿主细胞 oxidative
stress/heat effect/ injury的
是(- -) 吗?
如果楼主确信那可不考虑分子伴侣 hsp families 的作用
如果需考虑可能有(- +) or even (+ +) effect of oxidative stress/heat
effect/ injury caused hsp90/70 actions,
pls refer: Mammalian 肾细胞的hsp90 one paper:
by Harrison EM et al. (2008)
Heat shock protein 90-binding agents protect renal cells from oxidative
stress and reduce kidney ischemia-reperfusion injury.
Am J Physiol Renal Physiol. 295: F397-405.
web link:
HTTP: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18562631

【在 h******y 的大作中提到】

: 没看懂。这怎么能和transfection 试剂的毒性联系起来呢？