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请教一个比较简单的实验问题

请教一个比较简单的实验问题# Biology - 生物学

M*t2013-03-12 07:03

1 楼

拿了一个tier 2的学校的offer, 其实很surprise, 自己都没搞懂怎么就拿到了。文科
的专业，真心不好找工作。其实之前已经想好要跟劳工结束两地，然后学个其他的什么
专业，这两年对研究和教学都没什么太大的热情了。这种状态是不是还是不要在
academia 了呢？唯一的offer,估计过了就没选择了。

c*l2013-03-12 07:03

2 楼

讨论讨论优缺点，想到什么说什么吧
Ryobi -- 个人感觉外形很日本，很futuristic
Black Decker
Milwaukee (贵就一个字)
Craftsman (零件难配)
toro - (没怎么用过)
homelite
Honeywell
Husky
Hitachi
Rigid
......
总体觉大农村这边工具还是挺贵的，一件工具动不动就上200,如果全配齐至少要好几千，
当然，人工更贵
最后一句：如果打算说“老子都用XXX（某高档品牌），瞧不上你们这些贫下中农”，
这样的ID请绕步

q*m2013-03-12 07:03

3 楼

请教下大家，如果做一个基因的 overexpression stable clone 细胞，用药物筛选2周
多后拿到的阳性克隆细胞冻存后再次复苏或者后续用来做实验的话还需要再次加药筛选
吗？谢谢大家！

n*l2013-03-12 07:03

4 楼

Tier 2是什么意思？
我最近才听说USNEWS排名前200的都是Tier 1。

【在 M*********t 的大作中提到】

: 拿了一个tier 2的学校的offer, 其实很surprise, 自己都没搞懂怎么就拿到了。文科
: 的专业，真心不好找工作。其实之前已经想好要跟劳工结束两地，然后学个其他的什么
: 专业，这两年对研究和教学都没什么太大的热情了。这种状态是不是还是不要在
: academia 了呢？唯一的offer,估计过了就没选择了。

T*U2013-03-12 07:03

5 楼

你这么问答案只有一个
ryobi

s*s2013-03-12 07:03

6 楼

如果你肯定是stable clone, 那就不用

【在 q****m 的大作中提到】

: 请教下大家，如果做一个基因的 overexpression stable clone 细胞，用药物筛选2周
: 多后拿到的阳性克隆细胞冻存后再次复苏或者后续用来做实验的话还需要再次加药筛选
: 吗？谢谢大家！

q*n2013-03-12 07:03

7 楼

USNEWS有排名的national U，然后并且Carnegie classification是highest research
activity的，是tier 1
只满足一个条件的，是tier 2
都不满足的，是tier 3

【在 n*******l 的大作中提到】

: Tier 2是什么意思？
: 我最近才听说USNEWS排名前200的都是Tier 1。

c*l2013-03-12 07:03

8 楼

不是啊，ryobi的力量很弱，感觉像玩具

【在 T*U 的大作中提到】

: 你这么问答案只有一个
: ryobi

w*a2013-03-12 07:03

9 楼

我一般是用筛选浓度的一半去culture

r*e2013-03-12 07:03

10 楼

原来是这样，涨知识了，看来我去onsite的一个是 tier 1，一个是tier 2.

research

【在 q***n 的大作中提到】

: USNEWS有排名的national U，然后并且Carnegie classification是highest research
: activity的，是tier 1
: 只满足一个条件的，是tier 2
: 都不满足的，是tier 3

T*U2013-03-12 07:03

11 楼

一年玩几次就好了，别想着天天玩，跟老三一样。

【在 c********l 的大作中提到】

: 不是啊，ryobi的力量很弱，感觉像玩具

f*c2013-03-12 07:03

12 楼

same

【在 w***a 的大作中提到】

: 我一般是用筛选浓度的一半去culture

c*l2013-03-12 07:03

13 楼

who is 老三？

【在 T*U 的大作中提到】

: 一年玩几次就好了，别想着天天玩，跟老三一样。

q*m2013-03-12 07:03

14 楼

为什么要用筛选浓度的一半去培养？不会对细胞有影响吗？如果不用药的话
overexpression会降低吗？

b*a2013-03-12 07:03

15 楼

老三是本版名媛

【在 c********l 的大作中提到】

: who is 老三？

a*a2013-03-12 07:03

16 楼

哎。
肯定要加药maintain选择压力的。
即便如此，连续培养60天左右，stable expression也会消失。

c*l2013-03-12 07:03

17 楼

id是？？

【在 b*a 的大作中提到】

: 老三是本版名媛

s*s2013-03-12 07:03

18 楼

stable克隆已经整合染色体，那么DNA方面就不会有问题。
至于是不是加药，其实没啥意义，因为你选择的是抗性基因
表达，不是target基因表达。我的经验是，少用CMV, 最好用
2A加抗性基因，最好inducible

【在 a*******a 的大作中提到】

: 哎。
: 肯定要加药maintain选择压力的。
: 即便如此，连续培养60天左右，stable expression也会消失。

b*a2013-03-12 07:03

19 楼

你不知道zhaolaosan就敢到本版来混？

【在 c********l 的大作中提到】

: id是？？

c*l2013-03-12 07:03

20 楼

zhanglaosan ，不是zhaolaosan
名媛的名字都能打错，你就敢到本版来混？

【在 b*a 的大作中提到】

: 你不知道zhaolaosan就敢到本版来混？

k*t2013-03-12 07:03

21 楼

汗一个，全是好而贵的东西哈
我的pressure washer是black & decker的，so far so good
其他的像drill， sander，jig saw都是无名杂牌30块以内的，也是so far so good。
觉得dewalt之类的好工具可能耐久性和heavy duty的时候会好些，一般居家也就开始用
的多点，然后偶尔用用，根本不用买那么好的，哪个便宜买哪个
我同事500多买的saw zaw，宝贝的不行，其实买来也就放倒了一棵树
回头可能会买一个hitachi的brad nailer，据说他们家这个比较好

【在 c********l 的大作中提到】

: 讨论讨论优缺点，想到什么说什么吧
: Ryobi -- 个人感觉外形很日本，很futuristic
: Black Decker
: Milwaukee (贵就一个字)
: Craftsman (零件难配)
: toro - (没怎么用过)
: homelite
: Honeywell
: Husky
: Hitachi

c*l2013-03-12 07:03

22 楼

ryobi的也是“好而贵”它们家一盒钻头才10刀。HD里最便宜的子
HD里面买的？

【在 k******t 的大作中提到】

: 汗一个，全是好而贵的东西哈
: 我的pressure washer是black & decker的，so far so good
: 其他的像drill， sander，jig saw都是无名杂牌30块以内的，也是so far so good。
: 觉得dewalt之类的好工具可能耐久性和heavy duty的时候会好些，一般居家也就开始用
: 的多点，然后偶尔用用，根本不用买那么好的，哪个便宜买哪个
: 我同事500多买的saw zaw，宝贝的不行，其实买来也就放倒了一棵树
: 回头可能会买一个hitachi的brad nailer，据说他们家这个比较好

e*t2013-03-12 07:03

23 楼

我是天天干活的，工具无数，本田的割草机勉强算个牌子。
工具是skil，ryobi，harbor freight等杂牌便宜货一大坨。

【在 c********l 的大作中提到】

g*o2013-03-12 07:03

24 楼

我工具主要都是craftsman，用起来还不错，零件很容易配，
另外，他们工具一般都有不少review，看中了网上订店里提货都很方便。
而且sears经常有工具打折，不少好deal。

【在 c********l 的大作中提到】

k*t2013-03-12 07:03

25 楼

我除了在hd买过一个block planer十块钱以外，别的都不在那儿买
你多找找本地的hardware store，应该会有些杂牌的

【在 c********l 的大作中提到】

:
: ryobi的也是“好而贵”它们家一盒钻头才10刀。HD里最便宜的子
: HD里面买的？

k*t2013-03-12 07:03

26 楼

我的同事是craftsman的big fan，另外一个同事老爸是开建筑公司的，他说craftsman
的hand tool is ok，electrical tools so so

【在 g**o 的大作中提到】

: 我工具主要都是craftsman，用起来还不错，零件很容易配，
: 另外，他们工具一般都有不少review，看中了网上订店里提货都很方便。
: 而且sears经常有工具打折，不少好deal。

b*l2013-03-12 07:03

27 楼

俺喜欢dewalt。

【在 c********l 的大作中提到】

m*t2013-03-12 07:03

28 楼

正好有deal
Hitachi 12" Dual Bevel Compound Miter Saw w/ Laser Marker + Hitachi 2.2 lb.
Finishing Pneumatic Nailer $199
http://slickdeals.net/permadeal/39447/hitachi-12-dual-bevel-compound-miter-saw-w-laser-marker-hitachi-2.2-lb.-finishing-pneumatic-nailer

【在 k******t 的大作中提到】

m*a2013-03-12 07:03

29 楼

居家用的,harbor freight 的就可以了吧,都20来快钱的.够用了,何必花那么多钱呢,除
非真的是每个礼拜都在用.

【在 c********l 的大作中提到】

r*e2013-03-12 07:03

30 楼

I like Milwaukee. got good deal from HomeDepot when it was on sale during
holiday season. this year might be another round.

c*l2013-03-12 07:03

31 楼

good idea
这家的工具一般是在它的网站上买吗？

【在 m*****a 的大作中提到】

: 居家用的,harbor freight 的就可以了吧,都20来快钱的.够用了,何必花那么多钱呢,除
: 非真的是每个礼拜都在用.

c*l2013-03-12 07:03

32 楼

它家的大工具不是那么便宜

【在 m*****a 的大作中提到】

: 居家用的,harbor freight 的就可以了吧,都20来快钱的.够用了,何必花那么多钱呢,除
: 非真的是每个礼拜都在用.

k*t2013-03-12 07:03

33 楼

这家的工具真便宜啊，不知道他们的brad nailer如何？

【在 m*****a 的大作中提到】

: 居家用的,harbor freight 的就可以了吧,都20来快钱的.够用了,何必花那么多钱呢,除
: 非真的是每个礼拜都在用.

c*l2013-03-12 07:03

34 楼

你可以找一个你附近的人，合买今天lowes的deal。他买miter saw，你买nailer

【在 k******t 的大作中提到】

: 这家的工具真便宜啊，不知道他们的brad nailer如何？

k*t2013-03-12 07:03

35 楼

呵呵，正在研究那个harbor freight的nailer，简直是bloody cheap啊，我前段时间租
HD的compressor和nailer花了差不多80块，他们家全套买下来也就这个价。
Hitachi的大家都说好，但是比起这个harbor freight还是要贵哈

【在 c********l 的大作中提到】

: 你可以找一个你附近的人，合买今天lowes的deal。他买miter saw，你买nailer

m*a2013-03-12 07:03

36 楼

我在南加,这里有几家他的店,我都是去店里面买的,质量虽然一般,价钱是便宜啊.

【在 c********l 的大作中提到】

: good idea
: 这家的工具一般是在它的网站上买吗？