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最近T293转染实验老是出问题,求教各位大神?????
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最近T293转染实验老是出问题,求教各位大神?????# Biology - 生物学
l*h
1
实在好。《一代宗师》写的是形意拳南下,北拳南传,《师父》写的是咏春拳北上,
南拳北传。郑傲天和林副官,这对师徒,是徒弟算计师父,用师父的一世声名成就徒弟。
陈识和耿良辰,写的是师父算计徒弟,用徒弟打开的名声成就师父。陈识这个人,城府
极深,对女人,对徒弟,起初都是假意设计,最后都动了真情。师娘和他,是春风化雨
,点滴滋润,徒弟的死,是平地惊雷,炸开人心。
这些东西,唤醒了他。每场戏都揪着人走,干净利索。结尾火车上,陈识孑然一身,一
无所有,只有一条狗,那是女人的念想,还有一本带血的书,那是徒弟的性命。哎,神
圆气足,空前绝后之作。
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c*8
2
我是先在一个10mm plate上做转染,基本上算成功的。再转移成功转染的细胞到96孔上
,经过药物处理后做LUCIFERASE ASSAY. 做TRIPLICATE,但是数据不TIGHT,甚至相同处
理的3个孔数据相差很悬殊。一开始估计是细胞结团,没铺匀,就从每孔3000增加到10,
000,以期最后能减小误差。后来数据稍微好看点。想问还有啥办法能铺匀T293细胞吗
?是否还需增加细胞数?
我也做别的细胞的luciferase assay,有的细胞只铺3,000,甚至有时我先后加2种细胞
,出来的数据都很TIGHT.
T293细胞是不是比较难铺匀呢?求大家给点建议,在此谢过。
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f*d
3
的确,这个细胞不是很容易贴壁。而且非常容易浮起来。你可以试着用collegen
coated的板子。
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o*d
4
可不可以先把细胞adapt到无血清悬浮后再直接用悬浮细胞做转染?
只是不晓得这样子会不会影响你的细胞的功能

10,

【在 c******8 的大作中提到】
: 我是先在一个10mm plate上做转染,基本上算成功的。再转移成功转染的细胞到96孔上
: ,经过药物处理后做LUCIFERASE ASSAY. 做TRIPLICATE,但是数据不TIGHT,甚至相同处
: 理的3个孔数据相差很悬殊。一开始估计是细胞结团,没铺匀,就从每孔3000增加到10,
: 000,以期最后能减小误差。后来数据稍微好看点。想问还有啥办法能铺匀T293细胞吗
: ?是否还需增加细胞数?
: 我也做别的细胞的luciferase assay,有的细胞只铺3,000,甚至有时我先后加2种细胞
: ,出来的数据都很TIGHT.
: T293细胞是不是比较难铺匀呢?求大家给点建议,在此谢过。

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