请教关于ER介导入核的转基因老鼠的对照设计问题# Biology - 生物学
g*s
1 楼
我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
这样和学校提合适吗
学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
这样和学校提合适吗
m*3
2 楼
大家好，我是新农民，准备在院子里开块地明年春天开始种菜！ Sorry my computer
is not working well in typing Chinese. I am wondering if I should remove the
grass and build the vegatable bed now, or wait to next spring to remove
the grass? BTW, I am in Zone 6B.
Thanks a lot!
is not working well in typing Chinese. I am wondering if I should remove the
grass and build the vegatable bed now, or wait to next spring to remove
the grass? BTW, I am in Zone 6B.
Thanks a lot!
Z*5
3 楼
背景：我们前期发现gene A在肿瘤发生发展过程中会异常定位到细胞核中，但是具体入
核机制现在还没搞清楚。目前重点还在研究gene A入核后的功能及该功能的机制。
现在想做一个乳腺组织特异的gene A诱导入核的小鼠模型。初步设想是用ER融合gene A
， 通过4-OHT诱导入核，然后观察表型。
我们用的是ER的288-599AAs的，其中G525R做了突变，具体参考文献是 A modified
oestrogen receptor ligand-binding domain as an improved switch for the
regulation of heterologous proteins （http://nar.oxfordjournals.org/content/23/10/1686.short)。
问题是：1.我们是否要单独做一个不包含gene A，该ER片段的对照小鼠？ 虽然该文献
报到ER288-599(G525)是no TAF-2 transactivation activity， 但是毕竟ER是一个和
乳腺癌密切相关的分子，而且我们用了将近整个ER的一半的片段，这个ER片段诱导入核
后是否与乳腺癌表型相关，似乎也不太清楚。但是做这个对照，成本确实太高了。
2. 为了保证在非诱导情况下该基因不入核，我们还需要再改片段上加出核序列（
NES），
加几个NES比较好？ 少了怕控制出核效果不好；多了又怕影响诱导入核的效果。
核机制现在还没搞清楚。目前重点还在研究gene A入核后的功能及该功能的机制。
现在想做一个乳腺组织特异的gene A诱导入核的小鼠模型。初步设想是用ER融合gene A
， 通过4-OHT诱导入核，然后观察表型。
我们用的是ER的288-599AAs的，其中G525R做了突变，具体参考文献是 A modified
oestrogen receptor ligand-binding domain as an improved switch for the
regulation of heterologous proteins （http://nar.oxfordjournals.org/content/23/10/1686.short)。
问题是：1.我们是否要单独做一个不包含gene A，该ER片段的对照小鼠？ 虽然该文献
报到ER288-599(G525)是no TAF-2 transactivation activity， 但是毕竟ER是一个和
乳腺癌密切相关的分子，而且我们用了将近整个ER的一半的片段，这个ER片段诱导入核
后是否与乳腺癌表型相关，似乎也不太清楚。但是做这个对照，成本确实太高了。
2. 为了保证在非诱导情况下该基因不入核，我们还需要再改片段上加出核序列（
NES），
加几个NES比较好？ 少了怕控制出核效果不好；多了又怕影响诱导入核的效果。
l*2
4 楼
这些都是小事，理由合理问题都不大
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
T*4
5 楼
有空就开
温度合适了就种
the
【在 m*******3 的大作中提到】
: 大家好，我是新农民，准备在院子里开块地明年春天开始种菜！ Sorry my computer
: is not working well in typing Chinese. I am wondering if I should remove the
: grass and build the vegatable bed now, or wait to next spring to remove
: the grass? BTW, I am in Zone 6B.
: Thanks a lot!
温度合适了就种
the
【在 m*******3 的大作中提到】
: 大家好，我是新农民，准备在院子里开块地明年春天开始种菜！ Sorry my computer
: is not working well in typing Chinese. I am wondering if I should remove the
: grass and build the vegatable bed now, or wait to next spring to remove
: the grass? BTW, I am in Zone 6B.
: Thanks a lot!
T*u
6 楼
太复杂了，不太好控制。
首先你提到的改造如NES什么的，都要cell line先test。到小鼠上就更复杂了。
我的建议就是用TO/A inducible 小鼠，A做成constitutive入核的。
cross with rtTA or tissue specific rtTA.
or 直接KI consitutitive 入核的A mutant，看小鼠表型。
A
【在 Z******5 的大作中提到】
: 背景：我们前期发现gene A在肿瘤发生发展过程中会异常定位到细胞核中，但是具体入
: 核机制现在还没搞清楚。目前重点还在研究gene A入核后的功能及该功能的机制。
: 现在想做一个乳腺组织特异的gene A诱导入核的小鼠模型。初步设想是用ER融合gene A
: ， 通过4-OHT诱导入核，然后观察表型。
: 我们用的是ER的288-599AAs的，其中G525R做了突变，具体参考文献是 A modified
: oestrogen receptor ligand-binding domain as an improved switch for the
: regulation of heterologous proteins （http://nar.oxfordjournals.org/content/23/10/1686.short)。
: 问题是：1.我们是否要单独做一个不包含gene A，该ER片段的对照小鼠？ 虽然该文献
: 报到ER288-599(G525)是no TAF-2 transactivation activity， 但是毕竟ER是一个和
: 乳腺癌密切相关的分子，而且我们用了将近整个ER的一半的片段，这个ER片段诱导入核
首先你提到的改造如NES什么的，都要cell line先test。到小鼠上就更复杂了。
我的建议就是用TO/A inducible 小鼠，A做成constitutive入核的。
cross with rtTA or tissue specific rtTA.
or 直接KI consitutitive 入核的A mutant，看小鼠表型。
A
【在 Z******5 的大作中提到】
: 背景：我们前期发现gene A在肿瘤发生发展过程中会异常定位到细胞核中，但是具体入
: 核机制现在还没搞清楚。目前重点还在研究gene A入核后的功能及该功能的机制。
: 现在想做一个乳腺组织特异的gene A诱导入核的小鼠模型。初步设想是用ER融合gene A
: ， 通过4-OHT诱导入核，然后观察表型。
: 我们用的是ER的288-599AAs的，其中G525R做了突变，具体参考文献是 A modified
: oestrogen receptor ligand-binding domain as an improved switch for the
: regulation of heterologous proteins （http://nar.oxfordjournals.org/content/23/10/1686.short)。
: 问题是：1.我们是否要单独做一个不包含gene A，该ER片段的对照小鼠？ 虽然该文献
: 报到ER288-599(G525)是no TAF-2 transactivation activity， 但是毕竟ER是一个和
: 乳腺癌密切相关的分子，而且我们用了将近整个ER的一半的片段，这个ER片段诱导入核
p*l
7 楼
定个早点的飞机就可以了.没必要为了小事给人留下不好印象.
m*3
8 楼
Thanks! But I don't think I can plant any in this winter, while still seems
the earlier the better ? :)
【在 T*******4 的大作中提到】
: 有空就开
: 温度合适了就种
:
: the
the earlier the better ? :)
【在 T*******4 的大作中提到】
: 有空就开
: 温度合适了就种
:
: the
D*a
9 楼
我有类似的情况。问了学校，学校说政策不允许，即使我自己付多一天的酒店也不成。
我觉得不会有不好的影响。人之常情阿，想状态好一点。不妨问问。
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
我觉得不会有不好的影响。人之常情阿，想状态好一点。不妨问问。
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
p*y
10 楼
要看几区 如果在6区以下 估计冬天开地会比较辛苦 会结冰的
f*8
11 楼
按照对方学校的意思办。
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
【在 g*****s 的大作中提到】
: 我从西岸往东岸飞 定在周一晚上晚宴
: 学校建议我是周一下午到 但是我怕飞机延误等等
: 所以我想改成周日飞 不过这样就多一晚酒店
: 这样和学校提合适吗
m*3
12 楼
in 6B
【在 p*****y 的大作中提到】
: 要看几区 如果在6区以下 估计冬天开地会比较辛苦 会结冰的
【在 p*****y 的大作中提到】
: 要看几区 如果在6区以下 估计冬天开地会比较辛苦 会结冰的
y*8
13 楼
应该把地早点开下来，冬天可以往地里面埋厨余草屑之类，好好养一个冬天，春天种的
时候地会比较肥
in 6B
【在 m*******3 的大作中提到】
: in 6B
时候地会比较肥
in 6B
【在 m*******3 的大作中提到】
: in 6B
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