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RecBCD敲除

RecBCD敲除# Biology - 生物学

r*n2014-06-05 07:06

1 楼

关于推或者不推，大家其实都经历过推，推是我们在社会里面发展的必经之路（对于普
通人来说）
我那个时候小学上初中都要考试(虽然只是形式，我们那年是划片入中学的第一年），
中考，高考，gre，master thesis，comp，dissertation。。。公司里面还有project
evaluation等等。。
这些都是推。。
喜欢被推么，我们都不喜欢，谁不喜欢无压力的每天睡到自然醒，但是自然醒的后果就
是以后不大可能数钱数到手抽筋或者出色的达到或者接近自己预设的目标。
所以我觉得讨论是否要推小孩的大多是伪命题，为什么呢，你说你放羊，结果到了
某个阶段，还是会被社会推的，有些州，1年级就有标准化统考，现在IES强调要
evaluation，可以预见，以后美国的学校也会重视学业成就，你不推孩子数学啥的，
学校自然会推，到时候没有在家推过的孩子，会不会突然厌学呢？当然可能对于很多华
裔孩子来说这样的情况比较少见那些考试对于重视教育的华裔家庭的孩子来说都是简
单的题目，但是到了之后还是要sat的吧还是要参加各项的training吧，那也是推。
我认为推倒是一种toughness的发展，什么叫toughness，说的很残酷一些，就是，让孩
子知道达成一个目标要吃苦的，要受挫折的，不是轻松得来的，不是靠别人让出来的，
而是自己去争取的（不是抢），所以我觉得家长要让孩子知道推的目标是啥，而不是
自己单方面在推孩子又不知道为啥被推。然后训练什么的，受到挫折，小孩有片段性
的厌学是很正常的，对于所有人的正常，想想看我们很多人都是一开始多一个领域感兴
趣，但是已变成那个领域的研究生就很厌烦了不是么，但是厌烦并不压制我们的兴趣，
遇到一个有意思的topic，就算枯燥苦还是会坚持下去的。所以那个时候，如果给孩子
打气，帮助他 cope 那个挫折感，意义更加重大，因为那个也是self regulation的一个
方面。有人会说，没意义啊，对小孩自信有影响啊等等。。。如果真有影响了，显然就
是你除了推以外干了些别的事情了，比如在别人面前斥责小孩不够努力总是以惩罚代
替鼓励或者不够consistent，1 3 5推 2 4 6晒网。。或者推的目标制定的不合理，比
如我要让我家小孩10岁上大学。。。
有人说，我家小孩就靠自己啊，云云。。。那只是说明小孩他自己学会了如何”推“自
己，国内叫小孩开窍早。这种情况，虽然确实是有天才存在的，我觉得有一部分家长
是BSO，为什么呢，他们如果这样说，就会让别人觉得他们家小孩是天才了，基因好等
等。说不定私下里还是推的厉害。或者说自己没有觉得，自己买书给小孩，或者送小孩
去上课是推。
而在家长不干预不推的情况下靠小孩自己”开窍“ 那就是买彩票啊。。。。
所以不如多考虑多讨论如何推吧。。而不是推还是不推。。。

H*s2014-06-05 07:06

2 楼

求助于做细菌的大拿，有没有什么快速、简单的方法把细菌的RecBCD给敲掉？做酵母和
动物细胞，我知道一些。对细菌，有点头大。谢谢了。

f*32014-06-05 07:06

3 楼

小时候少推 -- 难得娃能快活几年
上学了帮着学校推 -- 毕竟成绩也重要
工作了看他自己吧 -- 反正俺们推他也不理了。。。

project

【在 r******n 的大作中提到】

: 关于推或者不推，大家其实都经历过推，推是我们在社会里面发展的必经之路（对于普
: 通人来说）
: 我那个时候小学上初中都要考试(虽然只是形式，我们那年是划片入中学的第一年），
: 中考，高考，gre，master thesis，comp，dissertation。。。公司里面还有project
: evaluation等等。。
: 这些都是推。。
: 喜欢被推么，我们都不喜欢，谁不喜欢无压力的每天睡到自然醒，但是自然醒的后果就
: 是以后不大可能数钱数到手抽筋或者出色的达到或者接近自己预设的目标。
: 所以我觉得讨论是否要推小孩的大多是伪命题，为什么呢，你说你放羊，结果到了
: 某个阶段，还是会被社会推的，有些州，1年级就有标准化统考，现在IES强调要

h*e2014-06-05 07:06

4 楼

recombineering？

m*02014-06-05 07:06

5 楼

说得很有道理，自己不先推，等到社会来推就麻烦了。就是有认识家长本来一直在放
羊，到了孩子真正上了小学，别人都推了好几年了，自己娃才刚起步，那个追得困难阿
。现在据说是追到小学3年级了还没跟上大部队。

z*82014-06-05 07:06

6 楼

如果是ecoli之类的，是不是用homologous recombination一边加500bp homology，用
double crossover就可以得到不用带drug marker的single ko，如果3gene不在一起的
话，那就得做3次了。当然这个是grad school第一年上课讲的，现在是不是还这样做就
不知道了。

r*n2014-06-05 07:06

7 楼

恩而且家长自己不推，等社会推，就很被动。比如你到青春期的时候一直放羊惯了
突然开始推，小孩被推的厌烦了，那就很麻烦了青春期啊。。炸弹期啊
所以我一直认为推是必要的不说别的什么考试会考好啊以后拿到奖学金什么的单纯
那种toughness就很珍贵的。

【在 m******0 的大作中提到】

: 说得很有道理，自己不先推，等到社会来推就麻烦了。就是有认识家长本来一直在放
: 羊，到了孩子真正上了小学，别人都推了好几年了，自己娃才刚起步，那个追得困难阿
: 。现在据说是追到小学3年级了还没跟上大部队。

l*y2014-06-05 07:06

8 楼

有个wanner method, 挺好用的，

【在 H****s 的大作中提到】

: 求助于做细菌的大拿，有没有什么快速、简单的方法把细菌的RecBCD给敲掉？做酵母和
: 动物细胞，我知道一些。对细菌，有点头大。谢谢了。

N*u2014-06-05 07:06

9 楼

我觉得我的幸福时光到我上学就终止了：（

c*r2014-06-05 07:06

10 楼

One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coli K-12 using
PCR products
By: Datsenko, KA; Wanner, BL
被引用了500多次的方法了。我本科就靠它，没有电转化，只用钙转，每边好像是25bp
还是50bp同源序列来着，敲除了好几个基因，得意了好一阵子呢。

【在 H****s 的大作中提到】

: 求助于做细菌的大拿，有没有什么快速、简单的方法把细菌的RecBCD给敲掉？做酵母和
: 动物细胞，我知道一些。对细菌，有点头大。谢谢了。

d*n2014-06-05 07:06

11 楼

我有举两个同班同学的例子。小学、初中都是玩过来的，每次考试擦边过。高中突然醒
悟，奋起直追。
一个后来考上南大，出国留学后又回国创业。十年时间已经从只有10万资金，目前身价
一个亿。最近还成功入选千人计划。
另一个我同桌，学习不太好。体育生保送北大。因理科不好，选的法律。毕业就开了个
律师事务所。目前也是身家过亿。

c*r2014-06-05 07:06

12 楼

Re，就是这个。

【在 l****y 的大作中提到】

: 有个wanner method, 挺好用的，

m*82014-06-05 07:06

13 楼

普遍性和特殊性……
大概率和小概率……

【在 d*****n 的大作中提到】

: 我有举两个同班同学的例子。小学、初中都是玩过来的，每次考试擦边过。高中突然醒
: 悟，奋起直追。
: 一个后来考上南大，出国留学后又回国创业。十年时间已经从只有10万资金，目前身价
: 一个亿。最近还成功入选千人计划。
: 另一个我同桌，学习不太好。体育生保送北大。因理科不好，选的法律。毕业就开了个
: 律师事务所。目前也是身家过亿。

s*n2014-06-05 07:06

14 楼

先找找有没有现成的再自己做吧

n*y2014-06-05 07:06

15 楼

时代不一样了。当年曾经有人说：小学不用念，初中念半年，高中苦念一年半。人就上
了一一类大学。现在，这么念还行么？（此乃疑问句）

【在 d*****n 的大作中提到】

d*k2014-06-05 07:06

16 楼

不是每个人都有醒悟过来自己推自己的悟性和能力啊

【在 d*****n 的大作中提到】

d*k2014-06-05 07:06

17 楼

能具体谈谈如何cope挫折感么？

project

【在 r******n 的大作中提到】

n*y2014-06-05 07:06

18 楼

我娃儿经常很挫折，骑车骑不会就不要骑了，唉，我也就只能说大家都是从不会到会的
。也没见很有用。

【在 d**k 的大作中提到】

: 能具体谈谈如何cope挫折感么？
:
: project

i*e2014-06-05 07:06

19 楼

我觉着life is a journey
生活的目的，得每个人自己去寻找自己来定义
孩子小的时候，给孩子提供一个有书看，有泥巴玩，有朋友交的环境就足已
所有的革命的大道理
孩子是有能力自己通过living/playing而体验到，然后顿悟地
孩子一定会经历挫折（就是玩耍不学习也会地）
10次经历挫折/负面情绪，父母能抓住3次机会做适当的emotional/social coaching足已
再其实呢，都是命
自己好好地过日子，孩子慢慢也就长大了，不需要那么紧张地
不过小娃娃的父母心情紧张，非常理解

project

【在 r******n 的大作中提到】

r*n2014-06-05 07:06

20 楼

你可以跟他说。。你就是可以的。。。努力就可以。
不要说别人会还是不会，如果让他觉得某某小朋友也不会骑车不是好得很么。。那他
的motivation就更不多了

【在 n****y 的大作中提到】

: 我娃儿经常很挫折，骑车骑不会就不要骑了，唉，我也就只能说大家都是从不会到会的
: 。也没见很有用。

n*y2014-06-05 07:06

21 楼

哎，我经常说你看小姐姐就骑没有扶助轮的车，骑得多好！
也不对啊？

【在 r******n 的大作中提到】

: 你可以跟他说。。你就是可以的。。。努力就可以。
: 不要说别人会还是不会，如果让他觉得某某小朋友也不会骑车不是好得很么。。那他
: 的motivation就更不多了

r*n2014-06-05 07:06

22 楼

我同意阿，毕竟大多数的我们还是要向社会压力低头的哎之前高中一个很非主流的老
师上课告诉我们说人来到世上是受苦的当时被雷的厉害。现在越来越觉得是有道理
的。。
同时我觉得那种emotional social coaching 开展的越早越好。
因为resilience和早期的经历也是有关系的而且是一个长期发展的过程不是短期可以
实现的。

足已

【在 i**e 的大作中提到】

: 我觉着life is a journey
: 生活的目的，得每个人自己去寻找自己来定义
: 孩子小的时候，给孩子提供一个有书看，有泥巴玩，有朋友交的环境就足已
: 所有的革命的大道理
: 孩子是有能力自己通过living/playing而体验到，然后顿悟地
: 孩子一定会经历挫折（就是玩耍不学习也会地）
: 10次经历挫折/负面情绪，父母能抓住3次机会做适当的emotional/social coaching足已
: 再其实呢，都是命
: 自己好好地过日子，孩子慢慢也就长大了，不需要那么紧张地
: 不过小娃娃的父母心情紧张，非常理解

r*n2014-06-05 07:06

23 楼

这个对阿。。
我是说如果想让他坚持下去就不要让他觉得比如 “小姐姐不会骑车也很好所以不
会骑没关系。”
如果你孩子大一些了可以画一些“饼”给他，比如“如果会骑车，周末一起骑车去
公园”或者“你会骑车了就可以和小姐姐一起骑车出去玩了”

【在 n****y 的大作中提到】

: 哎，我经常说你看小姐姐就骑没有扶助轮的车，骑得多好！
: 也不对啊？

i*e2014-06-05 07:06

24 楼

不好意思啊
从你的帖子看
你是比较注重preschool时期的学术成长的
而且比较倾向于在上小学前把reading “推”ready了
我觉着，preschool， physical sensations/emotion的成长更合适更应该放精力
我现在还是觉着，向欧洲那样，7岁开始上小学都来得及呢 :)

【在 r******n 的大作中提到】

: 我同意阿，毕竟大多数的我们还是要向社会压力低头的哎之前高中一个很非主流的老
: 师上课告诉我们说人来到世上是受苦的当时被雷的厉害。现在越来越觉得是有道理
: 的。。
: 同时我觉得那种emotional social coaching 开展的越早越好。
: 因为resilience和早期的经历也是有关系的而且是一个长期发展的过程不是短期可以
: 实现的。
:
: 足已

d*k2014-06-05 07:06

25 楼

这种倒不是我娃的主要问题
虽然也会害怕困难，但是也还是认为努力就能够掌握本领。
我娃的问题是对于一些不太可能的事情，执著，然后挫败。比如说要用枕头搭一个小窝
，自己住进去，拿了好几个枕头，搭是能搭起来，但是一碰就散了。或者有时候干脆搭
不起来，然后就挫败了，开始哭。可是枕头搭的窝，就是很容易倒阿。

【在 r******n 的大作中提到】

r*n2014-06-05 07:06

26 楼

虽然也会害怕困难，但是也还是认为努力就能够掌握本领。
我觉得这个就是推的一个目的锻炼internal locus of control。缺乏internal locus of control的习惯
把得失归咎于先天环境他人或者是运气。
“对不可能的事情执着”，还是和智力发展有关系你可以解释给他 soft 和hard的概
念然后解释hard的容易搭 soft的不容易搭

【在 d**k 的大作中提到】

: 这种倒不是我娃的主要问题
: 虽然也会害怕困难，但是也还是认为努力就能够掌握本领。
: 我娃的问题是对于一些不太可能的事情，执著，然后挫败。比如说要用枕头搭一个小窝
: ，自己住进去，拿了好几个枕头，搭是能搭起来，但是一碰就散了。或者有时候干脆搭
: 不起来，然后就挫败了，开始哭。可是枕头搭的窝，就是很容易倒阿。

r*n2014-06-05 07:06

27 楼

恩。。我是建议preschool开始推但是不是在preschool就把reading推ready，因为那
个实现比较不合实际，我的belief是最起码要在3年级之前推到前25%的状态。这样3年
级以后的学习，至少在理解新知识上会容易很多。因为4年级的成绩差别是和他们的
reading skill有显著关系的。
还有我觉得要看culture 米国的文化和欧洲的文化还是有差别的欧洲的preschool
quality 整体比米国要好一大截蒙校 regio等等都是欧洲发源的curriculum 我们系也
接待过荷兰德国那边大学做ece的教授，感觉就是他们那边非常的重视早教，硬件条件
很好，软件上curriculum设置合理老师的教育也特别的系统，倘若在米国的环境下，
按照欧洲的方式养小孩，倒不是说不可以了，我就是觉得有点小risk。

【在 i**e 的大作中提到】

: 不好意思啊
: 从你的帖子看
: 你是比较注重preschool时期的学术成长的
: 而且比较倾向于在上小学前把reading “推”ready了
: 我觉着，preschool， physical sensations/emotion的成长更合适更应该放精力
: 我现在还是觉着，向欧洲那样，7岁开始上小学都来得及呢 :)

X*r2014-06-05 07:06

28 楼

达到目标必须要吃苦这个前提完全错误。只要满足于轻松就可以达到的目标就不需要吃
苦。人心不知足，非要追寻更高的目标才是痛苦的根源。一山更比一山高，对于这个世
界上的几乎所有人来说，无论已经做到了什么样的程度，总有别人做得更好。更何况，
哪怕是站在世界之巅，到头来还是一坛骨灰。只有形成了完整自洽的自我意识，明白了
自己究竟想要什么，为什么要做这些事，才能快乐地渡过这个人生，所有的努力也不会
被认为是吃苦。

project

【在 r******n 的大作中提到】

s*02014-06-05 07:06

29 楼

The biggest problem is that you equate toughness with the ability to perform
in school.
Most of the topics you talk about 'pushing' can be mastered by mere
repetition. So in the end you've built a child that can follow steps and
perform well when there is a clear path in front. There's lots of usefulness
for this type of person. Probably 95% of the workforce is at this level or
below.
What happens when there is no path, no easy way to build up familiarity with
repetition? Who would succeed better in that environment? The kid that you
'pushed' by pointing out the correct path, or a kid that had to figure
everything out from scratch in the beginning.
This is what 'not pushing' means to me. You instill work ethic and values in
your child, but step back when it comes to the actual teachings. You let
them struggle, but show them how to get help, and show them to not give up.
If your kid isn't doing as well as others, you let them work that out. As
long as the effort is there, you don't care about the results. Take a long
term approach and don't make your child a robot. Leave that to the Chinese
back home.

r*n2014-06-05 07:06

30 楼

en 这个还就真牵涉到人生观的问题了。
我强烈同意这个“只有形成了完整自洽的自我意识，明白了自己究竟想要什么，为什么
要做这些事，”
但是这个我觉得是整个人生的论题，就是小孩发展不了成熟的人生观自我意识，所以家
长和老师才要适当引导的吧。
达到目标必须吃苦这个前提不见得是错的，因为除非是自己真心擅长，否则都需要努
力吃苦，比如参加奥运会那帮人谁不天才，但是要得金牌自然还是要吃苦训练。
大家不大会把目标定得唾手可得，很少有人说，你去参加考试，只要去了就可以了，随
便考多少分。

【在 X****r 的大作中提到】

: 达到目标必须要吃苦这个前提完全错误。只要满足于轻松就可以达到的目标就不需要吃
: 苦。人心不知足，非要追寻更高的目标才是痛苦的根源。一山更比一山高，对于这个世
: 界上的几乎所有人来说，无论已经做到了什么样的程度，总有别人做得更好。更何况，
: 哪怕是站在世界之巅，到头来还是一坛骨灰。只有形成了完整自洽的自我意识，明白了
: 自己究竟想要什么，为什么要做这些事，才能快乐地渡过这个人生，所有的努力也不会
: 被认为是吃苦。
:
: project

m*h2014-06-05 07:06

31 楼

不是有人说成功的一个主要要素就是Grit么。跟toughness类似。回首看来吃苦只是表
象。到底能不能用长期的目标矫正短期快感才是成功的关键。人生是马拉松，只要有实
际的目标，坚持不懈的追求，经常修正，就一定会达到。如果比别人tough一点点，走
得远一点点就可能有些名利的回报。

l*n2014-06-05 07:06

32 楼

这个25%是指全国范围还是全校，还是在所有GT里的前25%啊？
如果只是全年级的25%，这里的中国孩子还需要推吗？不是什么也不需要做，就能达到
前1%。

【在 r******n 的大作中提到】

: 恩。。我是建议preschool开始推但是不是在preschool就把reading推ready，因为那
: 个实现比较不合实际，我的belief是最起码要在3年级之前推到前25%的状态。这样3年
: 级以后的学习，至少在理解新知识上会容易很多。因为4年级的成绩差别是和他们的
: reading skill有显著关系的。
: 还有我觉得要看culture 米国的文化和欧洲的文化还是有差别的欧洲的preschool
: quality 整体比米国要好一大截蒙校 regio等等都是欧洲发源的curriculum 我们系也
: 接待过荷兰德国那边大学做ece的教授，感觉就是他们那边非常的重视早教，硬件条件
: 很好，软件上curriculum设置合理老师的教育也特别的系统，倘若在米国的环境下，
: 按照欧洲的方式养小孩，倒不是说不可以了，我就是觉得有点小risk。

r*n2014-06-05 07:06

33 楼

恩同意又不同意。。咱们可以讨论。
我并没有把toughness 和学业成就等同起来。我觉得toughness 相似于resilience. 我
觉得适当的“推”可以让孩子锻炼resilience 不一定是学业上的，比如学习乐器比如
体育运动等等。当然这些的前提是孩子感兴趣。比如孩子说她喜欢钢琴，那就推钢琴，
但是不能说，谈几天又不喜欢了开始喜欢小提琴，你就由他放弃钢琴了。。而是设定一
个目标比如咱们一起参加一个钢琴表演或者得到某个level。
另一个呢就是我不认为推只是单纯的重复。首先重复并不是一个负面的方法，比如
早期儿童，重复式学习是一个主要手段之一。而且适量的重复是有帮助的，熟能生巧，
你重复的完成一个task，自然以后再遇到相似的task会容易很多。重复并不是让孩子变
成机器人。
成年以后的creativity，在没有指导下如何创新的问题，这个和推我认为没有太大的
关系，因为家长现在所谓的推，也就是比如每周多做一些课外的题目，上个什么兴趣班
，哪有家长按照当初咱们考高考的量来推孩子的实际占用的时间并不是很多而且
creativity 来源很广我们怎么知道不是来源于上的兴趣班呢。之前的研究的确是
表明家长使用authoritative parenting style 的孩子比authoritarian parenting
style 有更多的优势，authoritarian家父母多是蓝领 work force，然后他们小孩会继
续蓝领work force 倾向于follow step。但是研究者同时很清楚的表明，此分类不适
合中国家庭，因为中国家庭有这种training 的culture 中国家庭推的教育并不一定
会有负面的影响。不少人会拿为什么中国人很少拿诺贝尔奖等等，其实我更愿意归咎于
体制，而不是说中国人缺乏创新。
对于你说internalize ethics 我是充分赞同的，但是那个和推不推也没有太大的联系
。推在我看来像是一个督促，像是一个标尺，像是路标告诉孩子，一个目标一旦设定就
要坚持努力去完成。

perform
usefulness
or
with
you

【在 s***0 的大作中提到】

: The biggest problem is that you equate toughness with the ability to perform
: in school.
: Most of the topics you talk about 'pushing' can be mastered by mere
: repetition. So in the end you've built a child that can follow steps and
: perform well when there is a clear path in front. There's lots of usefulness
: for this type of person. Probably 95% of the workforce is at this level or
: below.
: What happens when there is no path, no easy way to build up familiarity with
: repetition? Who would succeed better in that environment? The kid that you
: 'pushed' by pointing out the correct path, or a kid that had to figure

r*n2014-06-05 07:06

34 楼

主要是reading 和math，按照那个州的report来看是不是在前25%，如果是那就很好啊
表明推的量已经够了不需要紧张的推学业了。。发展兴趣了体育音乐什么的。。

【在 l********n 的大作中提到】

: 这个25%是指全国范围还是全校，还是在所有GT里的前25%啊？
: 如果只是全年级的25%，这里的中国孩子还需要推吗？不是什么也不需要做，就能达到
: 前1%。