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上位遗传突变分析高手请进:这种情况肿么破
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上位遗传突变分析高手请进:这种情况肿么破# Biology - 生物学
e*r
1
我们研究一个病原细菌的蛋白酶A,发现它能把一个受体B的信号识别区降解掉。A能够
切割B的生化证据和蛋白互作的证据都是明确的,已经拿到手了。
但遗传分析不知该作如何解释,请大家看一看:
事实一:蛋白酶A突变以后会使细菌致病力下降
事实二:受体B突变以后也会使细菌致病力下降
结果我们在蛋白酶A突变体里过表达受体B,细菌致病力照理说恢复一些是正常的,可这
个菌株的致病力下降得更严重!
做A和B双突的结果还没出来,所以暂时木有更多的提示。
这个我怎么解释,或者用什么样的model,才能把遗传数据和生化数据捏到一起呢?
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g*n
2
问两个问题
1:A和B的突变体都是null mutation吗?
2:你说“A能把一个受体B的信号识别区降解掉”,这个降解是激活还是抑制B?
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e*r
3
A和B的突变体都是删除突变体,所以是null mutation.
A把受体B的信号识别区降解掉,这个结果是完全抑制了B的激酶活性。
不知有何建议?

【在 g*****n 的大作中提到】
: 问两个问题
: 1:A和B的突变体都是null mutation吗?
: 2:你说“A能把一个受体B的信号识别区降解掉”,这个降解是激活还是抑制B?

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D*a
4
不懂,就瞎问问:正常细菌过表达B是什么表型?
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l*y
5
A切B产生致病,可能有活性的是B被A切后的小片段,可以尝试一下在wt或者A突变里表达
一下B的短form
另外这个B的激酶活性和致病力的关系有没有做过?

【在 e********r 的大作中提到】
: A和B的突变体都是删除突变体,所以是null mutation.
: A把受体B的信号识别区降解掉,这个结果是完全抑制了B的激酶活性。
: 不知有何建议?

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K*4
6
我觉得你首先要回答下面的问题:
1:A是intracellular protease,还是membrane bound version, or secreted? 细菌
中的蛋白酶定位不同,参与的过程和意义是很大却别的。A还有别的domain吗
2:B定位哪里,功能已知吗?
3:A,B 是紧密相关吗?他们两个共同参与一个pathway还是分别不同的?

【在 e********r 的大作中提到】
: 我们研究一个病原细菌的蛋白酶A,发现它能把一个受体B的信号识别区降解掉。A能够
: 切割B的生化证据和蛋白互作的证据都是明确的,已经拿到手了。
: 但遗传分析不知该作如何解释,请大家看一看:
: 事实一:蛋白酶A突变以后会使细菌致病力下降
: 事实二:受体B突变以后也会使细菌致病力下降
: 结果我们在蛋白酶A突变体里过表达受体B,细菌致病力照理说恢复一些是正常的,可这
: 个菌株的致病力下降得更严重!
: 做A和B双突的结果还没出来,所以暂时木有更多的提示。
: 这个我怎么解释,或者用什么样的model,才能把遗传数据和生化数据捏到一起呢?

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e*r
7
这个做过了,没有什么影响,所以不太像是过表达本身造成的。

【在 D*a 的大作中提到】
: 不懂,就瞎问问:正常细菌过表达B是什么表型?
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e*r
8
嗯,您说的对,应该这么做。我们正在找具体的切点,搞清楚后就可以做过表达了。

表达

【在 l***y 的大作中提到】
: A切B产生致病,可能有活性的是B被A切后的小片段,可以尝试一下在wt或者A突变里表达
: 一下B的短form
: 另外这个B的激酶活性和致病力的关系有没有做过?

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e*r
9
谢谢哈,还过这些实验多数都做过了。
1. A是periplasmic protein, 切的位点正好是B位于periplasm的信号感应区。A还有别
的domain,它与B相互作用的domain我们已经搞清楚了。
2. B是受体激酶,所以是跨inner-membrane protein,但有一个region在periplasm中
,被A切。
3. A, B功能不同,但在这个表型上存在密切滴相互作用。

【在 K**4 的大作中提到】
: 我觉得你首先要回答下面的问题:
: 1:A是intracellular protease,还是membrane bound version, or secreted? 细菌
: 中的蛋白酶定位不同,参与的过程和意义是很大却别的。A还有别的domain吗
: 2:B定位哪里,功能已知吗?
: 3:A,B 是紧密相关吗?他们两个共同参与一个pathway还是分别不同的?

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