logo
Redian新闻
>未名空间
>Biology - 生物学
>
不做药物筛选可以吗？
avatar
不做药物筛选可以吗？# Biology - 生物学
J*y
1 楼
在线等，谢谢！
EB1B,填写４８５的questionair,律师提供的，有一项问
Has any Immigrant Visa Petition ever been filed by you or on your behalf?
情况是ld递过eb2的１４０，lp递过eb3的１４０，都没有递过４８５。immigration
visa petition是指１４０嘛？
这个和４８５上问的
have you ever applied for permanent resident status in US?不是一个意思把？我
觉得这个是说４８５？
avatar
P*e
2 楼
我还等着剪枝呢。
avatar
y*0
3 楼
请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
avatar
b*M
4 楼
fill in" no"
avatar
h*2
5 楼
我种了近2年的桃树，被这次冻雨都压得倒伏在地上了，不知还能不能救回来。
avatar
s*y
6 楼
我不熟悉BAC vector, 不知道你们的稳定转化效率有多少。
但是我们用病毒的时候，因为稳定转化率很高，所以可以直接筛荧光而不用药物。
如果你要拿到稳定转化的细胞株，那么必须有比较高的稳定转化率，如果是类似于普通
质粒那种几万分之一那种概率的话没戏。

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
avatar
b*M
7 楼
go to wenxuecity for step by step instructions on filling forms
avatar
h*e
8 楼
可能红烧肉吃多了

【在 P******e 的大作中提到】
: 我还等着剪枝呢。
avatar
s*r
9 楼
直接筛GFP阳性我搞过，得看是啥位点，基因够不够强，不在乎失败的可以试试
另外双neo可能抗g418浓度会高一点，可以试试多加点加到原来的line开始抗不住

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
avatar
f*c
11 楼
我的桃树叶子原本也是绿油油滴，结果周一的一场大风，叶子全掉了
avatar
y*0
12 楼
多谢二位！

【在 s******r 的大作中提到】
: 直接筛GFP阳性我搞过，得看是啥位点，基因够不够强，不在乎失败的可以试试
: 另外双neo可能抗g418浓度会高一点，可以试试多加点加到原来的line开始抗不住
:
: clone
avatar
c*2
13 楼
if you have a previous I-140 or I-130 that you are the primary beneficiary/
petitioner, you need to say yes.
avatar
h*e
14 楼
这才是正常的，桃树什么的都需要200+小时寒冷时间才能保证明年开花结果

【在 f*****c 的大作中提到】
: 我的桃树叶子原本也是绿油油滴，结果周一的一场大风，叶子全掉了
avatar
s*r
15 楼
看你叙述的像是用BAC同源重组knock-in GFP， 这样的话不筛选基本不太可能吧。。
avatar
f*c
16 楼
我的是被风活活吹掉滴

【在 h******e 的大作中提到】
: 这才是正常的，桃树什么的都需要200+小时寒冷时间才能保证明年开花结果
avatar
m*z
17 楼
基本没戏。就算你的基因表达够强，BAC knockin效率可能远远低于FACS本身带来的
false positive GFP signal的比例。

clone

【在 y*****0 的大作中提到】
: 请教一个问题，准备给一个cell line 里的一个基因加上GFP，已经有construct，是个
: BAC，理论上切一下，电转一下，就可以筛选 neomycin resistant 的 clone 了。但发
: 现这个cell line 已经有 Neo resistant 的基因，所以不能筛选Neo resistant clone
: 了。能不能直接筛选 GFP 阳性的细胞，然后培养呢？会不会效率很低呢？谢谢。
avatar
m*6
18 楼
几区的？我的也是桃树最晚掉，不过现在是全掉了。
肯跌的是，我喷了铜第二天就连下了一个礼拜的雨。
下次喷之前一定要查天气预报。
avatar
P*e
19 楼
忘了报location, 南加zone 10的。

【在 m****6 的大作中提到】
: 几区的？我的也是桃树最晚掉，不过现在是全掉了。
: 肯跌的是，我喷了铜第二天就连下了一个礼拜的雨。
: 下次喷之前一定要查天气预报。
avatar
x*2
20 楼
我的三棵桃树，2棵还都绿的，一棵掉叶不少。
avatar
c*x
21 楼
我家也是，第一年种，cocktail桃树还没变色落叶，李子树光了，樱桃树叶子块不行了
，葡萄叶子刚刚有点变色，我在湾区。

【在 P******e 的大作中提到】
: 我还等着剪枝呢。
相关阅读
对引用文章大段抄袭请教如何判断抗体的端点是否在细胞膜外？Senior Scientist@National Cancer InstituteScience advances应该投什么杂志？？懂stem cell的大牛：要给小孩存cord blood吗？cold spring harbor laboratory自己招学生了。寻求合作：用Proteinase K处理小鼠组织做genotyping PCR的朋友SM的原理，有谁需要入门的？这哥们一次性撤了3篇 Nat. Cell Biol 耗油型啊求助：gRNA 质粒构建 THANKS搞了小留，最后Re: 全球工科排名31-40名。 (转载)Boston 租房求文章，包子答谢。小保方晴子吊死在公寓了 (转载)请问有朋友了解Broad的reseaech scientist职位吗？文章全文求助！guest editor机会, Medicinal ChemistryHandling of Sexual Harassment Case Poses Larger Questions at Yale
logo
联系我们隐私协议©2024 redian.news
Redian新闻
Redian.news刊载任何文章，不代表同意其说法或描述，仅为提供更多信息，也不构成任何建议。文章信息的合法性及真实性由其作者负责，与Redian.news及其运营公司无关。欢迎投稿，如发现稿件侵权，或作者不愿在本网发表文章，请版权拥有者通知本网处理。