问一个关于CRISPR的幼稚问题# Biology - 生物学e*12015-02-19 08:021 楼关于 Applicant's residence last five years. 如果中间回中国 3个月,这个中国的address 也应该写上吗?
k*l2015-02-19 08:022 楼做construct,要切的地方没有合适的内切酶想用NEB的 Cas9 做体外的 CRISPR来切质粒,需要sgRNA,网页上建议做 in vitrotranscription不知化学合成 sgRNA oligo 是否可行,会有folding 方面的问题吗?谢谢大家!
k*l2015-02-19 08:024 楼你说的很好,只是我的plasmid 15k,PCR可能会比较困难【在 s***k 的大作中提到】: 为何一定要切?用Primer 和DNA polymerase来linearize plasmid?外行抛砖引玉的回: 复
s*i2015-02-19 08:025 楼左右各多切一段,再gibson assembly把它们连回去★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7【在 k****l 的大作中提到】: 你说的很好,: 只是我的plasmid 15k,PCR可能会比较困难