Redian新闻
>
求教Clontech家的Lentiviral vector system
avatar
求教Clontech家的Lentiviral vector system# Biology - 生物学
T*4
1
种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
。我说那就种吧
莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。
去年10月,听说版友有多余的苗,不惜往返一个多小时,把苗弄回来,菜地花坛,栽了
50多颗,给了很多激愤牛粪,莴苣苗长得真不赖
开始长小莴苣了,我开心地秀了不少照片。这时候,老鼠出来了,他们口味太重了,喜
欢吃莴苣的苦叶子,每一株莴苣都被从最头上的嫩叶子就糟蹋了,看着真无语,吃莴苣
的梦又一次幻灭了?
灭了N次老鼠后,终于有所宰获,抓了两只硕鼠,莴苣休息了一个多月,又焕发了生机。
我有次还挖了两颗不大的嫩莴苣,凉拌了一盘。
可是可是,今年冬天屯子中了邪,隔几天冷一次,每次上冻,我的莴苣就冻死一批,先
是外皮受冻,然后过几天,就突然蔫了,好好一株莴苣,就趴地上变黑了,扯过来一看
,莴苣杆子里面全都坏死了。
昨天早上,屯子再次大霜冻,早上起来看,只有大蒜和大白菜还幸存,最后幸存的几颗
莴苣全部挂了。
总结:种了至少5年莴苣,就今年吃了两根娃娃莴苣
avatar
j*x
2
之前没留意过,近期突然发现,Clontech家的所有Lentiviral vector系统,包括其经
典的Tet-on/off/one lentivector,尽管宣传是最安全的第四代载体系统,但其中的
HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
truncated/∆U3 LTR,作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
事情,有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗?谢谢
avatar
T*4
3
看你们都矜持着,俺自己先开始抢包子
avatar
j*i
4
现在其实只有三代,包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话,就是
二代。二代的特征是一共三个包装质粒,三代是四个质粒。

【在 j****x 的大作中提到】
: 之前没留意过,近期突然发现,Clontech家的所有Lentiviral vector系统,包括其经
: 典的Tet-on/off/one lentivector,尽管宣传是最安全的第四代载体系统,但其中的
: HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
: truncated/∆U3 LTR,作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
: 事情,有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗?谢谢

avatar
g*e
5
mppmzx
avatar
V*t
6
只用两个包装的呢?
pMD2.G psPAX2
或者
pCMV-dR8.2 dvpr+pCMV VSVG

【在 j******i 的大作中提到】
: 现在其实只有三代,包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话,就是
: 二代。二代的特征是一共三个包装质粒,三代是四个质粒。

avatar
g*o
7
好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲
催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊
好悲催啊

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
j*i
8
那就是一代了。基本上是个HIV了,只是把膜蛋白和其他成分分开,一般做HIV的才用。

【在 V******t 的大作中提到】
: 只用两个包装的呢?
: pMD2.G psPAX2
: 或者
: pCMV-dR8.2 dvpr+pCMV VSVG

avatar
Z*I
9
可怜哦~~
avatar
r*e
10
两个质粒的是2代,3个是3代。
他说的4个的是所谓的4代,应该是有个tet-on控制。
一般都是用3个。

【在 V******t 的大作中提到】
: 只用两个包装的呢?
: pMD2.G psPAX2
: 或者
: pCMV-dR8.2 dvpr+pCMV VSVG

avatar
i*t
11
真可怜!回国吃吧。。。

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
B*o
12
为啥要用clontech的? sbi的选择多很多啊,除非你一定要inducible

【在 j****x 的大作中提到】
: 之前没留意过,近期突然发现,Clontech家的所有Lentiviral vector系统,包括其经
: 典的Tet-on/off/one lentivector,尽管宣传是最安全的第四代载体系统,但其中的
: HIV-1 5'/3' LTR居然都是wildtype的而并非是被几乎所有其他商用载体所一致采用的
: truncated/∆U3 LTR,作为self-inactivating (SIN) vector。这是件很奇怪的
: 事情,有哪位对Lentiviral vector比较熟悉的能讲讲吗?谢谢

avatar
T*4
13
要看受冻后坏死的照片?以后作为经典嘲笑依据?

【在 g***e 的大作中提到】
: mppmzx
avatar
j*i
14
那请问一代的是什么?一个质粒😓?至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧(
一代两个质粒)!否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准,就是
换了一个启动子而已,最多算商家的镢头。

【在 r***e 的大作中提到】
: 两个质粒的是2代,3个是3代。
: 他说的4个的是所谓的4代,应该是有个tet-on控制。
: 一般都是用3个。

avatar
T*4
15
小番茄你怎么啦,别哭,想起什么悲催往事了么?

【在 g*********o 的大作中提到】
: 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲
: 催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊
: 好悲催啊

avatar
l*y
16
我也想说来着,addgene大把随便挑

【在 B******o 的大作中提到】
: 为啥要用clontech的? sbi的选择多很多啊,除非你一定要inducible
avatar
T*4
17
弯曲好种莴苣么?要不老饕给传授一点经验?

【在 Z***I 的大作中提到】
: 可怜哦~~
avatar
B*o
18
对的,addgene上也有一大堆,各种组合应有尽有。
packaging质粒,addgene上pax2那个效率不高,sbi或者sigma的都很不错

【在 l***y 的大作中提到】
: 我也想说来着,addgene大把随便挑
avatar
c*p
19
谢谢同情!
包子分你一半

【在 g*********o 的大作中提到】
: 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲
: 催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊 好悲催啊
: 好悲催啊

avatar
l*y
20
一代有点用不到的hiv序列吧,二代都给去了

【在 j******i 的大作中提到】
: 那请问一代的是什么?一个质粒😓?至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧(
: 一代两个质粒)!否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准,就是
: 换了一个启动子而已,最多算商家的镢头。

avatar
T*4
21
其实不好吃,我不好那一口
就是气自己为什么就种不出来呢
屯子很多人都种得好好的
我的莴苣冻死了
可是我家对面不远的一个邻居家
一颗也没冻死,都好好的,南北院子差异有这么大么,有这么大么-------------------

【在 i****t 的大作中提到】
: 真可怜!回国吃吧。。。
avatar
r*e
22
对,4代就是噱头。刚才google了下,还是5个质粒。
lenti最早是我们实验室开发的,现在也是用3个质粒的系统。

【在 j******i 的大作中提到】
: 那请问一代的是什么?一个质粒😓?至少得把膜蛋白和其他病毒结构分开吧(
: 一代两个质粒)!否则就是HIV, 不是vector了。tet-on根本就不够分带的标准,就是
: 换了一个启动子而已,最多算商家的镢头。

avatar
f*p
23
你得上肥,每天让带小黑到田里溜狗就没问题了。

---

【在 T*******4 的大作中提到】
: 其实不好吃,我不好那一口
: 就是气自己为什么就种不出来呢
: 屯子很多人都种得好好的
: 我的莴苣冻死了
: 可是我家对面不远的一个邻居家
: 一颗也没冻死,都好好的,南北院子差异有这么大么,有这么大么-------------------

avatar
X*o
25
哎,没有莴苣命啊!

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.0.1

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
j*i
26
这位老大,去掉的只是一些无关紧要的附属蛋白比如VPR, NEF.

【在 l***y 的大作中提到】
: 一代有点用不到的hiv序列吧,二代都给去了
avatar
L*a
27
居然说莴苣不好吃,天地良心。
avatar
j*x
28
Clontech是五质粒系统,号称的四代,至于他家为什么不用U3 deletion SIN系统,实
在是搞不懂。
http://www.clontech.com/US/Products/Viral_Transduction/Lentivir

【在 j******i 的大作中提到】
: 现在其实只有三代,包括用来基因治疗的都是三代。如果没有U3 deletion的话,就是
: 二代。二代的特征是一共三个包装质粒,三代是四个质粒。

avatar
c*p
29
我特别喜欢吃莴笋,年年种,年年悲剧,今年彻底放弃了
avatar
j*x
30
不用肯定是有原因的了,呵呵,没办法的事情

【在 l***y 的大作中提到】
: 我也想说来着,addgene大把随便挑
avatar
T*4
31
难道
有人种莴苣比我还黑手指?

【在 c***p 的大作中提到】
: 我特别喜欢吃莴笋,年年种,年年悲剧,今年彻底放弃了
avatar
h*e
32
写的过分多了吧

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
h*e
33
我早在3年前就放弃了
我发现能种出这玩意的一定是大师级别的

【在 c***p 的大作中提到】
: 我特别喜欢吃莴笋,年年种,年年悲剧,今年彻底放弃了
avatar
T*4
34
分成上下篇,吃两次包子?
脸皮还不够

【在 h******e 的大作中提到】
: 写的过分多了吧
avatar
T*4
35
小黑还在家躺着呢,谢谢惦记

【在 f****p 的大作中提到】
: 你得上肥,每天让带小黑到田里溜狗就没问题了。
:
: ---

avatar
T*4
36
所以很悲催

【在 X*******o 的大作中提到】
: 哎,没有莴苣命啊!
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.0.1

avatar
T*4
37
莴苣有种说不出的气味
我不太喜欢

【在 L******a 的大作中提到】
: 居然说莴苣不好吃,天地良心。
avatar
h*h
38
菜场好像都没卖的?
avatar
T*4
39
偶尔有

【在 h*h 的大作中提到】
: 菜场好像都没卖的?
avatar
i*t
40
"可是我家对面不远的一个邻居家
这个听起来有继续努力的空间。。。
---
avatar
i*t
41
而且某人今年好像也没大面积上。。。。。

【在 c***p 的大作中提到】
: 我特别喜欢吃莴笋,年年种,年年悲剧,今年彻底放弃了
avatar
g*o
42
其实我想说的是 悲催啊好 悲催啊好 悲催啊好 。。。。。。

【在 T*******4 的大作中提到】
: 小番茄你怎么啦,别哭,想起什么悲催往事了么?
avatar
l*6
43
别和Zone对抗。
要么扣大棚要么放弃。

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
f*c
44
要求不要高,有吃的就好, 别想着跟国内一样的胖大莴笋,反正我种出的都不够胖。
avatar
T*4
45
可是屯子里很多人都种出来了!

【在 l****6 的大作中提到】
: 别和Zone对抗。
: 要么扣大棚要么放弃。

avatar
j*s
46
这个真是太可年了。
我也种过好多次莴笋,从来没长出来莴笋过,只能揪叶子喂乌龟。

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
T*4
47
周围不仅有人种出来了,还种得比国内胖!!!

【在 f*****c 的大作中提到】
: 要求不要高,有吃的就好, 别想着跟国内一样的胖大莴笋,反正我种出的都不够胖。
avatar
T*4
48
看了你的故事,俺开心多了

【在 j****s 的大作中提到】
: 这个真是太可年了。
: 我也种过好多次莴笋,从来没长出来莴笋过,只能揪叶子喂乌龟。

avatar
j*s
49
有片片有真相。
还有更悲催的,这个盆是用来种竹子的,加了点原来种过莴笋的土,结果竹子挂了,原
来坚持不发芽的莴笋开始郁郁葱葱。

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2.2

【在 T*******4 的大作中提到】
: 看了你的故事,俺开心多了
avatar
T*4
50
这是俺见过的最强的混搭

【在 j****s 的大作中提到】
: 有片片有真相。
: 还有更悲催的,这个盆是用来种竹子的,加了点原来种过莴笋的土,结果竹子挂了,原
: 来坚持不发芽的莴笋开始郁郁葱葱。
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2.2

avatar
T*4
51
有人就是JD,就是JD

【在 g*********o 的大作中提到】
: 其实我想说的是 悲催啊好 悲催啊好 悲催啊好 。。。。。。
avatar
u*e
52
我最喜欢吃那个苦叶子,中间的stem不好吃。
avatar
l*d
53
没觉得莴笋好吃啥,小四今天不来悲催,我倒搞忘了,不过还在犹豫今年种不种莴笋了。
种的话,要开始育苗了。
avatar
y*2
54
真是萝卜青菜各有所爱,我很喜欢吃泡莴笋,凉拌也很有吃。

---

【在 T*******4 的大作中提到】
: 其实不好吃,我不好那一口
: 就是气自己为什么就种不出来呢
: 屯子很多人都种得好好的
: 我的莴苣冻死了
: 可是我家对面不远的一个邻居家
: 一颗也没冻死,都好好的,南北院子差异有这么大么,有这么大么-------------------

avatar
l*d
55
你开始育苗吧。

【在 y****2 的大作中提到】
: 真是萝卜青菜各有所爱,我很喜欢吃泡莴笋,凉拌也很有吃。
:
: ---

avatar
B*s
56
可怜的。
avatar
y*2
57
现在育苗太早,去年我是4月初开始育的抗热品种,出芽很快的。

【在 l*********d 的大作中提到】
: 你开始育苗吧。
avatar
l*d
58
啊? 我去年一月份育的,结果天气热了,还是长得细了点。

【在 y****2 的大作中提到】
: 现在育苗太早,去年我是4月初开始育的抗热品种,出芽很快的。
avatar
y*2
59
是品种问题,我顺便给你寄几颗种子,所剩不多,真的就是几颗。

【在 l*********d 的大作中提到】
: 啊? 我去年一月份育的,结果天气热了,还是长得细了点。
avatar
G*a
60
我不爱吃那东西,不种!
avatar
m*6
61
本来不喜欢吃的,被小四这么一说,我倒想种些看看了。
只要在5年内种出超过2颗,就能赢了小四了,是不?
avatar
M*7
62
除了菜,还收获了硕鼠。农业和牧业齐头并进,硕果累累。

【在 T*******4 的大作中提到】
: 种了好多年菜啊,最近几年却一直被嘲笑:连个莴苣都种不出来
: 其实莴苣没那么好吃,不过翠绿的还是有点好看。有年老人弄了点籽来,说种点莴苣吧
: 。我说那就种吧
: 莴苣苗发出来了,长得还绿油油的,某天晚上太冷了,早上起来一看,地是硬的,厚厚
: 一层霜,莴苣苗当然全蔫了,中午太阳出来一晒,黑啦死啦。
: 冬天太冷,俺就贼心不死地每年春天种。种了两年,苗是发出来了,但还没开始长莴苣
: 的时候,太阳就毒了,莴苣就开始细细地往高处窜,开起花来。
: 后来种子就再也发不出芽,我就放弃了。
: 前年又找人讨了新鲜种子,又开始满怀希望种莴苣,可是可是,莴苣没长,就又抽薹开
: 花了,贴个帖子,被版友嘲笑半年,发誓再不种这劳什子。

avatar
f*c
63
好嘛,反正我觉得跟我买的种子也有关系

【在 T*******4 的大作中提到】
: 周围不仅有人种出来了,还种得比国内胖!!!
avatar
f*c
64
开始同情小四了。LOL

【在 m**6 的大作中提到】
: 本来不喜欢吃的,被小四这么一说,我倒想种些看看了。
: 只要在5年内种出超过2颗,就能赢了小四了,是不?

avatar
f*c
65
多好吃的,我怀孕的时候,LD回国,我又不能闻油烟,女儿天天缠着我给她炒莴笋肉片。

【在 G********a 的大作中提到】
: 我不爱吃那东西,不种!
avatar
a*8
66
祝纛满旗风
愿君少逡巡
天子开昌箓
天小雾峰攒
好音难殷勤
运开今化昌
气豪直阻兵
avatar
h*w
67
莴笋真的很扛冻啊。今年我家冻死了芹菜,白菜,就莴笋还坚挺着。
相关阅读
logo
联系我们隐私协议©2024 redian.news
Redian新闻
Redian.news刊载任何文章,不代表同意其说法或描述,仅为提供更多信息,也不构成任何建议。文章信息的合法性及真实性由其作者负责,与Redian.news及其运营公司无关。欢迎投稿,如发现稿件侵权,或作者不愿在本网发表文章,请版权拥有者通知本网处理。