o*1
2 楼
V*t
3 楼
好像消失了
跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
g*n
4 楼
觉得值得就付年费保留
觉得不值得就关
觉得不值得就关
o*4
5 楼
许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
b*n
6 楼
看能否要求转成freedom吧
不行就算了
【在 n*****y 的大作中提到】
: UA成功拿到了，sapphire不行，说没有，要么可以降级成不是preferred的
不行就算了
【在 n*****y 的大作中提到】
: UA成功拿到了，sapphire不行，说没有，要么可以降级成不是preferred的
V*t
7 楼
那个没用了吧
【在 o**4 的大作中提到】
: 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
: 不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
【在 o**4 的大作中提到】
: 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
: 不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
n*y
8 楼
本来就没打算今年关，就是打电话去问问offer，也没威胁要关卡。
UA还是nice一些，给了。
【在 g**n 的大作中提到】
: 觉得值得就付年费保留
: 觉得不值得就关
UA还是nice一些，给了。
【在 g**n 的大作中提到】
: 觉得值得就付年费保留
: 觉得不值得就关
a*n
9 楼
现在CRISPR技术更为先进了
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
f*y
10 楼
因为没有王和管那么善于发paper呗
K*4
11 楼
刚看到管最近有两篇文章retracted了
http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
【在 f****y 的大作中提到】
: 因为没有王和管那么善于发paper呗
http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
【在 f****y 的大作中提到】
: 因为没有王和管那么善于发paper呗
l*i
12 楼
Piggybac作为gene delivery tool还是不错的，但是不能应用于基因治疗，是一个大的
缺陷。
许田的主要问题还是他的那个用piggybac制作基因敲除小鼠的宏大项目。好几年前就听
说复旦给许田一栋楼，养上万只小鼠，就是为了这个项目。谁知CRISPR技术这么快就出
来了，直接砸了许多人的“饭碗”，许田也算其中一个“受害者”了。
非病毒类整合性载体，比如piggybac，sleeping beauty在基因治疗方面还是有很大优
势的。目前，在欧美都有sleeping beauty的基因治疗临床试验在开展.
缺陷。
许田的主要问题还是他的那个用piggybac制作基因敲除小鼠的宏大项目。好几年前就听
说复旦给许田一栋楼，养上万只小鼠，就是为了这个项目。谁知CRISPR技术这么快就出
来了，直接砸了许多人的“饭碗”，许田也算其中一个“受害者”了。
非病毒类整合性载体，比如piggybac，sleeping beauty在基因治疗方面还是有很大优
势的。目前，在欧美都有sleeping beauty的基因治疗临床试验在开展.
o*4
13 楼
还是很有用的，
作为基因表达载体也是很不错的
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
作为基因表达载体也是很不错的
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
a*n
14 楼
这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
【在 o**4 的大作中提到】
: 还是很有用的，
: 作为基因表达载体也是很不错的
是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
【在 o**4 的大作中提到】
: 还是很有用的，
: 作为基因表达载体也是很不错的
o*4
15 楼
具体机理不清楚，
不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
: 是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
: 是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
a*n
16 楼
请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
多谢！
【在 o**4 的大作中提到】
: 具体机理不清楚，
: 不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
多谢！
【在 o**4 的大作中提到】
: 具体机理不清楚，
: 不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
o*4
17 楼
就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
a*n
18 楼
这个克隆和转染难做吗？
【在 o**4 的大作中提到】
: 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
【在 o**4 的大作中提到】
: 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
j*i
19 楼
piggybac用plasmid表达的话很容易多拷贝 所以表达量不会低 当然 也可以用极低量的
PB transpoase 然后多筛选几个单拷贝克隆 其中有的克隆表达量会低
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
PB transpoase 然后多筛选几个单拷贝克隆 其中有的克隆表达量会低
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
o*4
20 楼
不难，
就是普通的克隆跟转染
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个克隆和转染难做吗？
就是普通的克隆跟转染
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个克隆和转染难做吗？
L*y
21 楼
参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
【在 V******t 的大作中提到】
: 好像消失了
: 跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
【在 V******t 的大作中提到】
: 好像消失了
: 跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
s*s
22 楼
许田phd做的FRT／FLP这个就够超重量级的工作了。这种级别的多做几个估计就能碰上
诺贝尔奖了。大家expectation太高。
【在 L*********y 的大作中提到】
: 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
: 专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
: 象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
诺贝尔奖了。大家expectation太高。
【在 L*********y 的大作中提到】
: 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
: 专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
: 象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
D*5
23 楼
http://www.jbc.org/content/279/31/32824.long
This retracted article, the first author Weiquan Li,is now working with Feng
Liu at Second XiangYa Hospital, Changsha, Hunan
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
This retracted article, the first author Weiquan Li,is now working with Feng
Liu at Second XiangYa Hospital, Changsha, Hunan
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
S*e
24 楼
这个JBC的文章也撤回
怎么个说法？
为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
怎么个说法？
为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
a*n
25 楼
为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
【在 S**********e 的大作中提到】
: 这个JBC的文章也撤回
: 怎么个说法？
: 为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 S**********e 的大作中提到】
: 这个JBC的文章也撤回
: 怎么个说法？
: 为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
S*e
26 楼
大文章多数迫于压力撤回修改
小文章为啥费劲折腾？
【在 a*****n 的大作中提到】
: 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
小文章为啥费劲折腾？
【在 a*****n 的大作中提到】
: 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
a*n
27 楼
不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
回的，这个很正常的吧
【在 S**********e 的大作中提到】
: 大文章多数迫于压力撤回修改
: 小文章为啥费劲折腾？
回的，这个很正常的吧
【在 S**********e 的大作中提到】
: 大文章多数迫于压力撤回修改
: 小文章为啥费劲折腾？
S*e
28 楼
所以我说他是为了保持学术纯洁啊
【在 a*****n 的大作中提到】
: 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
: 回的，这个很正常的吧
【在 a*****n 的大作中提到】
: 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
: 回的，这个很正常的吧
a*n
29 楼
是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
【在 S**********e 的大作中提到】
: 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
【在 S**********e 的大作中提到】
: 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
S*e
30 楼
不是我看不上，是我觉得guan看不上，发了也罢，还要撤，挺逗的
【在 a*****n 的大作中提到】
: 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
【在 a*****n 的大作中提到】
: 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
l*e
31 楼
许很大气，高瞻远瞩
管更多是努力
管更多是努力
相关阅读
Molecular Cell 和 Cell metabolism是什么档次？浙江大学转化医学研究院招聘启事ZZ好文：首例生物科技并购还原--华大基因BGI收购CG大片段DNA克隆无菌的排枪加样槽英语叫啥？辞职信怎么写好？关于肠道结构、蛋白、免疫分子的示意图在ucla和ucsd做博后有什么优缺点？有人做phage display的吗？Any good free electronic book for R to share?paper help 3x 包子有人订38刀一年的Nature吗？小分子量蛋白片段转染表达问题请在白宫针对杀光中国人的情愿信上签名． (转载)绝对应该取消noble医学奖如果bt有毒，那么珍奥核酸还真有效了惨痛教训--别嫁学生物的男生 (转载)Oxford nanopore 要出USB sequencer了有考过ASCP certification的请帮帮忙，多谢了我觉得BT蛋白的毒性吧