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有人直接用SDS loading buffer煮了样品再IP吗？

有人直接用SDS loading buffer煮了样品再IP吗？# Biology - 生物学

f*e2015-08-18 07:08

1 楼

我的一片文章，ISI上查相关文章，135片，我的排第四，共72次引用，可是，第一名
350次，第2，3
名和我的到差不多。我发现很多人都是引用第一名，移民官会不会问这个，谢谢！！！
如果我把topic严格一些，就只有9片文章，我的3片是前三名，该咋办。谢谢

m*w2015-08-18 07:08

2 楼

好像有个重要目录没备份。刚重装完，新数据还没上去。

r*k2015-08-18 07:08

3 楼

小弟最近做一个蛋白的磷酸化以为没有特异性的抗体。只能IP total的protein 然后
用Pan-Tyr。但是这个磷酸化总是出不来。班上有大牛说用预热的（90度以上？）SDS
loading buffer 挂下来以后直接boil再稀释10-20倍做IP。但是有一个问题，10cm的
dish怎么也要用500ul的loading buffer scrape下来吧？那也无法稀释了呀？
难道先用pbs刮下来？？而且这个PBS是冰的把？而且还有protease inhibitor 还有
phospho-stop？