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为啥我trypsin细胞以后,细胞经常成团?
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为啥我trypsin细胞以后,细胞经常成团?# Biology - 生物学
n*7
1
谢谢!
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B*v
2
很影响试验心情,是不是trypsin时间太长,还是trypsin浓度太高(0.25%)?
我摸索了一下还是经常成团。
哪位同学有经验?
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f*s
3
你这个485是对应现在降级的eb3的140,你填eb2干嘛,填了后,估计移民官都会搞糊涂
,直接锯掉你的485申请,原因就是你的eb2没current,我建议是不填,不过你还是问
问律师最保险把
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s*y
4
我一般是trypsin把细胞消化好,就马上用血清中和。这样细胞就不会成团。
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n*7
5
我也这么想,可是律师坚决说要填怎么办?
律师还说不要听外面论坛,想问问大家的律师怎么说的。
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r*k
6
吹打的时候用培养基

【在 B***v 的大作中提到】
: 很影响试验心情,是不是trypsin时间太长,还是trypsin浓度太高(0.25%)?
: 我摸索了一下还是经常成团。
: 哪位同学有经验?

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f*u
7
应该填。一个人理论上只有一个 A-file,除非他们自己弄错了。即使你不填,USCIS
也能找到和你有关的所有申请,不过是给他们增添点麻烦而已。

【在 n*****7 的大作中提到】
: 谢谢!
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D*a
8
我怎么觉得是没吹打开
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h*k
9
你律师是对的。应该填EB2 140 A#,这样可以relink你EB2的PD。
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T*e
10
没吹打开吧 缓慢的多次的吹打
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n*7
11
谢谢, 这下放心了。
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a*r
12
没吹开
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l*u
13
反正你要附上原来的140批件,不用担心他们找不到你的PD
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m*D
14
我的感觉是你over-treated.细胞成团往往是DNA出来的缘故。我看了我们的trypsin/
EDTA,我们用的是0。05%,比你的低五倍。
我一般的程序是:PBS洗一次后,T75加1-1。5 mltrypsin,用手转动flask,让trypsin
cover所有的细胞表面,然后把trypsin suck away。把flask放iincubator 3-5分钟就
可以了。不晃动,在microscope下改看到的都市单细胞。如果下不来,往往是PBS没洗
好,可以多洗一次。
肝细胞会例外。它们本来就抱团。这个只能靠needle来处理。
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c*r
15
明显是细胞在抱团取暖。
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