B*v
2 楼
很影响试验心情,是不是trypsin时间太长,还是trypsin浓度太高(0.25%)?
我摸索了一下还是经常成团。
哪位同学有经验?
我摸索了一下还是经常成团。
哪位同学有经验?
f*s
3 楼
你这个485是对应现在降级的eb3的140,你填eb2干嘛,填了后,估计移民官都会搞糊涂
,直接锯掉你的485申请,原因就是你的eb2没current,我建议是不填,不过你还是问
问律师最保险把
,直接锯掉你的485申请,原因就是你的eb2没current,我建议是不填,不过你还是问
问律师最保险把
s*y
4 楼
我一般是trypsin把细胞消化好,就马上用血清中和。这样细胞就不会成团。
n*7
5 楼
我也这么想,可是律师坚决说要填怎么办?
律师还说不要听外面论坛,想问问大家的律师怎么说的。
律师还说不要听外面论坛,想问问大家的律师怎么说的。
D*a
8 楼
我怎么觉得是没吹打开
h*k
9 楼
你律师是对的。应该填EB2 140 A#,这样可以relink你EB2的PD。
T*e
10 楼
没吹打开吧 缓慢的多次的吹打
n*7
11 楼
谢谢, 这下放心了。
a*r
12 楼
没吹开
l*u
13 楼
反正你要附上原来的140批件,不用担心他们找不到你的PD
m*D
14 楼
我的感觉是你over-treated.细胞成团往往是DNA出来的缘故。我看了我们的trypsin/
EDTA,我们用的是0。05%,比你的低五倍。
我一般的程序是:PBS洗一次后,T75加1-1。5 mltrypsin,用手转动flask,让trypsin
cover所有的细胞表面,然后把trypsin suck away。把flask放iincubator 3-5分钟就
可以了。不晃动,在microscope下改看到的都市单细胞。如果下不来,往往是PBS没洗
好,可以多洗一次。
肝细胞会例外。它们本来就抱团。这个只能靠needle来处理。
EDTA,我们用的是0。05%,比你的低五倍。
我一般的程序是:PBS洗一次后,T75加1-1。5 mltrypsin,用手转动flask,让trypsin
cover所有的细胞表面,然后把trypsin suck away。把flask放iincubator 3-5分钟就
可以了。不晃动,在microscope下改看到的都市单细胞。如果下不来,往往是PBS没洗
好,可以多洗一次。
肝细胞会例外。它们本来就抱团。这个只能靠needle来处理。
c*r
15 楼
明显是细胞在抱团取暖。
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