g*n
2 楼
我最近在比较C. elegans不同的突变体里的两个蛋白表达量的变化，结果总是重复性不
好。
1：我预测蛋白A在某个突变体里表达量增加，用了两组biological repeats，都很明显
。但因为actin量不一样（mutant比wt 的actin少5倍，但蛋白A的量反而还高一些），
我就重新调整了上样量想做个好看的图(technical repeats)，结果调整了之后反而A的
增加没有那么明显了，只是略微增高。
2：蛋白B我预测也是在突变体里增加，做了一遍WB很明显，然后做了两个不同的
biological repeats，结果变成了几乎没有变化。
我现在纠结的是到底是我WB的技术环节出了问题，还是由于其他什么原因？我觉得1和2
很可能属于不同的原因。
PS：我用来做比较的WB条带没有饱和。
谢谢大家
好。
1：我预测蛋白A在某个突变体里表达量增加，用了两组biological repeats，都很明显
。但因为actin量不一样（mutant比wt 的actin少5倍，但蛋白A的量反而还高一些），
我就重新调整了上样量想做个好看的图(technical repeats)，结果调整了之后反而A的
增加没有那么明显了，只是略微增高。
2：蛋白B我预测也是在突变体里增加，做了一遍WB很明显，然后做了两个不同的
biological repeats，结果变成了几乎没有变化。
我现在纠结的是到底是我WB的技术环节出了问题，还是由于其他什么原因？我觉得1和2
很可能属于不同的原因。
PS：我用来做比较的WB条带没有饱和。
谢谢大家
e*t
3 楼
找作cabinet的公司，他们货全。
【在 W****3 的大作中提到】
: 我想要60W X 30H左右，2门的，去HomeDepot看了一下，没合适的，
【在 W****3 的大作中提到】
: 我想要60W X 30H左右，2门的，去HomeDepot看了一下，没合适的，
z*i
4 楼
同样的样品上，2ul 4ul 6ul 8ul，看你能否看到差别。
o*4
5 楼
1。有可能A降解了，有可能沉淀了（嗯，sds解不了所有的沉淀）。2.biological
repeat不出来很正常，多repeat几次看个SEM
repeat不出来很正常，多repeat几次看个SEM
g*n
6 楼
谢谢回复和建议。
另外有没有可能反复的加热和冰冻造成DTT失活？
另外有没有可能反复的加热和冰冻造成DTT失活？
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