i*y
2 楼
当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
5'LncRNA---GFP 3'
考！！！！
所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
我现在有个想法，就是：
1. 首先确认GFP前面有没有IRES
2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
5' LncRNA---polyA----IRES----GFP 3'
可行否？
不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
5'LncRNA---GFP 3'
考！！！！
所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
我现在有个想法，就是：
1. 首先确认GFP前面有没有IRES
2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
5' LncRNA---polyA----IRES----GFP 3'
可行否？
m*y
3 楼
应该三张
【在 z**********g 的大作中提到】
: 765 和 131 应该也有receipt 吧？
【在 z**********g 的大作中提到】
: 765 和 131 应该也有receipt 吧？
i*y
4 楼
Actually, 我想到了一个更好的方法
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps-bidirectional
去买bidirectional 或者dual-promoter lentiviral vector? 哪位大侠有用过这两种
vector的经验嘛？
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps-bidirectional
去买bidirectional 或者dual-promoter lentiviral vector? 哪位大侠有用过这两种
vector的经验嘛？
p*e
5 楼
你是什么时候寄出去的？可能没这么快
【在 z**********g 的大作中提到】
: 765 和 131 应该也有receipt 吧？
【在 z**********g 的大作中提到】
: 765 和 131 应该也有receipt 吧？
W*1
6 楼
你个傻逼 lncRNA不编码coding gene, 也就是说不会被翻译 串联GFP有毛线用
a*o
7 楼
我是20号寄出的，大概什么时候能收到RECEIPT啊？
W*1
8 楼
我可以打折卖给你一套lentivirus系统来表达lncRNA
y*0
9 楼
问问你的律师，看看律师收到了几封。
w*n
10 楼
老实交代你是怎么混进来的？
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
y*0
11 楼
下周应该收到了。
【在 a**o 的大作中提到】
: 我是20号寄出的，大概什么时候能收到RECEIPT啊？
【在 a**o 的大作中提到】
: 我是20号寄出的，大概什么时候能收到RECEIPT啊？
j*u
12 楼
我看着也纳闷
【在 w******n 的大作中提到】
: 老实交代你是怎么混进来的？
【在 w******n 的大作中提到】
: 老实交代你是怎么混进来的？
z*g
13 楼
20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 p****e 的大作中提到】
: 你是什么时候寄出去的？可能没这么快
更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 p****e 的大作中提到】
: 你是什么时候寄出去的？可能没这么快
w*n
14 楼
老实交代你是怎么混进来的？
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
t*p
15 楼
请问下收到收据之前有没有收到手机短信啥的
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
D*n
16 楼
人家没准是想检测一下这个LncRNA是否表达未知peptide，你们这么激动干啥？
m*y
17 楼
多等一天 就不用发这个帖子了
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
x*e
18 楼
人说了啊，看GFP表达估计感染效率
【在 W*********1 的大作中提到】
: 你个傻逼 lncRNA不编码coding gene, 也就是说不会被翻译 串联GFP有毛线用
【在 W*********1 的大作中提到】
: 你个傻逼 lncRNA不编码coding gene, 也就是说不会被翻译 串联GFP有毛线用
p*e
19 楼
收到就好，cft
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
x*e
20 楼
不了解lncRNA, 不过我会担心lncRNA跟mRNA的结合蛋白不同，带到的地方也不同。所以
最后你的核糖体不一定有机会接触到lncRNA。另外，lncRNA后面挂那么大一坨，肯定会
影响它的功能吧。
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
最后你的核糖体不一定有机会接触到lncRNA。另外，lncRNA后面挂那么大一坨，肯定会
影响它的功能吧。
【在 i********y 的大作中提到】
: 当初从别的实验室弄来一个带GFP的lentiviral vector.刚开始的时候还想着这个载体
: 不错，到时可以通过看GFP来估量感染效率。
: 结果今天把cDNA终于克完之后，突然意识到一个问题。载体里的GFP序列也会链接到我
: 的LncRNA的序列后面，等于最后出来的transcript是：
: 5'LncRNA---GFP 3'
: 考！！！！
: 所以想请问各位大侠，有没有表达LncRNA的经验。
: 我现在有个想法，就是：
: 1. 首先确认GFP前面有没有IRES
: 2. 如果有，我可否在我的LncRNA后面加一段polyA,所以最后的序列就是：
a*o
21 楼
为什么你周日还能收到信件啊？还有，你的check被cash out了吗？
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 20号寄出，485的收据昨天收到，显示21号的RD.
: 更新，刚刚收到765和131的收据。
i*y
22 楼
我是楼主。当时被告知是和链接里的plasmid类似的东西(CD550A-1)
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps
结果后来发现是个N-term GFP tag...Anyways, 反正cDNA也还没克完，也不算浪费时间
。
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps
结果后来发现是个N-term GFP tag...Anyways, 反正cDNA也还没克完，也不算浪费时间
。
z*g
23 楼
没有短信啥的。我填了G1145了，很奇怪。
【在 t********p 的大作中提到】
: 请问下收到收据之前有没有收到手机短信啥的
【在 t********p 的大作中提到】
: 请问下收到收据之前有没有收到手机短信啥的
i*y
24 楼
对，所以我准备买这个载体（CD550A-1)
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps
【在 x********e 的大作中提到】
: 不了解lncRNA, 不过我会担心lncRNA跟mRNA的结合蛋白不同，带到的地方也不同。所以
: 最后你的核糖体不一定有机会接触到lncRNA。另外，lncRNA后面挂那么大一坨，肯定会
: 影响它的功能吧。
https://www.systembio.com/lentiviral-technology/expression-vectors/cdna/
vector-maps
【在 x********e 的大作中提到】
: 不了解lncRNA, 不过我会担心lncRNA跟mRNA的结合蛋白不同，带到的地方也不同。所以
: 最后你的核糖体不一定有机会接触到lncRNA。另外，lncRNA后面挂那么大一坨，肯定会
: 影响它的功能吧。
z*g
25 楼
可能是邮局昨晚送的，我不知道吧。
cash 26号就划走了。
【在 a**o 的大作中提到】
: 为什么你周日还能收到信件啊？还有，你的check被cash out了吗？
cash 26号就划走了。
【在 a**o 的大作中提到】
: 为什么你周日还能收到信件啊？还有，你的check被cash out了吗？
a*o
26 楼
你的是tsc吗？
【在 z**********g 的大作中提到】
: 可能是邮局昨晚送的，我不知道吧。
: cash 26号就划走了。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 可能是邮局昨晚送的，我不知道吧。
: cash 26号就划走了。
z*g
27 楼
NSC
你呢？
【在 a**o 的大作中提到】
: 你的是tsc吗？
你呢？
【在 a**o 的大作中提到】
: 你的是tsc吗？
a*o
28 楼
我的是tsc的，但是咱俩是同一天递的，以后可以保持联系，互相交流！
【在 z**********g 的大作中提到】
: NSC
: 你呢？
【在 z**********g 的大作中提到】
: NSC
: 你呢？
z*g
29 楼
好的。
【在 a**o 的大作中提到】
: 我的是tsc的，但是咱俩是同一天递的，以后可以保持联系，互相交流！
【在 a**o 的大作中提到】
: 我的是tsc的，但是咱俩是同一天递的，以后可以保持联系，互相交流！
a*o
30 楼
我加你为好友了，你确认下呗！
【在 z**********g 的大作中提到】
: 好的。
【在 z**********g 的大作中提到】
: 好的。
相关阅读
为啥Qiagen Maxi Prep提大点质粒不work问个V5抗体的问题Impact of High-throughput screening in biomedical research都趁早改行吧有遇到过这种情况的吗？土问：histag 只有5个his行吗？Naoshige Uchida 是不要被赶了？berkeley的John Coates实验室怎么样啊抓到一个在ncbi下载whole genomce seq为什么都是2bit格式的？有没有人用cisplatin？为什么受体在膜表面是一团一团的？[求助]万年不变的转行话题，我该怎么办？hypothalamus贴子我删了，谢谢帮我回帖给建议的同学!paper needed. Thanks!请教各位大牛，如何把蛋白的N端定位到质膜上？3.0左右的文章有没有意义？ (转载)发包子，攒人品关于authorship，这种情况怎么办？