s*y
2 楼
需要western blot 用的。我们试了两个公司的都没有信号。用了乳腺癌和前列腺癌细
胞作为阳性对照还是看不到,也不知道到底是公司的问题还是我们自己的问题。
如果有用过而且好用的麻烦推荐一下,谢谢!
胞作为阳性对照还是看不到,也不知道到底是公司的问题还是我们自己的问题。
如果有用过而且好用的麻烦推荐一下,谢谢!
g*5
4 楼
我用过epitomics 的,效果不错。
g*5
10 楼
epitomics的抗体90%都work,不过被 abcam买了。
http://www.abcam.com/hif-1-alpha-antibody-ab156685.html
http://www.abcam.com/hif-1-alpha-antibody-ab156685.html
g*5
12 楼
可惜我不在实验室了,不然就给你寄一点了。
z*8
14 楼
http://www.novusbio.com/productsearch?keys=HIF-1+alpha
这个公司的这类抗体很好。
你查文献就知道, 大部分人用这个公司的。
【在 s******y 的大作中提到】
: 需要western blot 用的。我们试了两个公司的都没有信号。用了乳腺癌和前列腺癌细
: 胞作为阳性对照还是看不到,也不知道到底是公司的问题还是我们自己的问题。
: 如果有用过而且好用的麻烦推荐一下,谢谢!
a*r
19 楼
胖老师,HIF field用的最多的HIF1A的抗体是BD的#610958(鼠单抗),WB的band在~
120kD
在normoxia培养条件的cell lysate信号几乎没有或者很低
需要进行一定的处理才能看见robust的信号,例如
(1)MG132 ~2hr
(2)CoCl2/iron chelator(比如DFO)
(3)PHD inhibitor(比如DMOG)
(4)如果你有Hypoxic incubator,用低于2% O2
(5)或是直接使用某些Mutant细胞,例如RCC4 (VHL inactivated)
【在 s******y 的大作中提到】
: 需要western blot 用的。我们试了两个公司的都没有信号。用了乳腺癌和前列腺癌细
: 胞作为阳性对照还是看不到,也不知道到底是公司的问题还是我们自己的问题。
: 如果有用过而且好用的麻烦推荐一下,谢谢!
120kD
在normoxia培养条件的cell lysate信号几乎没有或者很低
需要进行一定的处理才能看见robust的信号,例如
(1)MG132 ~2hr
(2)CoCl2/iron chelator(比如DFO)
(3)PHD inhibitor(比如DMOG)
(4)如果你有Hypoxic incubator,用低于2% O2
(5)或是直接使用某些Mutant细胞,例如RCC4 (VHL inactivated)
【在 s******y 的大作中提到】
: 需要western blot 用的。我们试了两个公司的都没有信号。用了乳腺癌和前列腺癌细
: 胞作为阳性对照还是看不到,也不知道到底是公司的问题还是我们自己的问题。
: 如果有用过而且好用的麻烦推荐一下,谢谢!
Z*5
20 楼
HIFa主要是蛋白降解非常快,从hypoxic下拿出来最好不要超过一个小时,最好是消化
或刮下来直接加loading buffer煮。
或刮下来直接加loading buffer煮。
d*u
21 楼
妤间富-澶ч儴鍒嗛鐢ㄦ姉浣撴槸Novus鐨勶紝浠婂ぉ鍒氬悜鏃佽竟瀹為獙瀹ゆ眰璇佷
簡锛屼汉缁嗚優WB鏈ソ鐨勬槸NB100-449锛屼絾瑕佷綆姘
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s*y
22 楼
谢谢!我已经订了Epitomics 的了。如果不好使的话我再用你说的这个。
【在 a*****r 的大作中提到】
: 胖老师,HIF field用的最多的HIF1A的抗体是BD的#610958(鼠单抗),WB的band在~
: 120kD
: 在normoxia培养条件的cell lysate信号几乎没有或者很低
: 需要进行一定的处理才能看见robust的信号,例如
: (1)MG132 ~2hr
: (2)CoCl2/iron chelator(比如DFO)
: (3)PHD inhibitor(比如DMOG)
: (4)如果你有Hypoxic incubator,用低于2% O2
: (5)或是直接使用某些Mutant细胞,例如RCC4 (VHL inactivated)
【在 a*****r 的大作中提到】
: 胖老师,HIF field用的最多的HIF1A的抗体是BD的#610958(鼠单抗),WB的band在~
: 120kD
: 在normoxia培养条件的cell lysate信号几乎没有或者很低
: 需要进行一定的处理才能看见robust的信号,例如
: (1)MG132 ~2hr
: (2)CoCl2/iron chelator(比如DFO)
: (3)PHD inhibitor(比如DMOG)
: (4)如果你有Hypoxic incubator,用低于2% O2
: (5)或是直接使用某些Mutant细胞,例如RCC4 (VHL inactivated)
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