l*3
2 楼
250ul 到 500ul PBS重悬细胞后，用1% formaldehyde固定，发现立即结团。各位大神
觉得是什么问题？
也有试过直接在dish上固定细胞，然后刮下来，似乎大部分都是结团的细胞。好苦恼啊
！
觉得是什么问题？
也有试过直接在dish上固定细胞，然后刮下来，似乎大部分都是结团的细胞。好苦恼啊
！
p*n
3 楼
这儿药店里就有卖，diabetic stocking
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
H*N
4 楼
结团为什么不能做？器官组织都能做
B*e
5 楼
这样压迫着肉肉，估计会有后遗症？
l*3
6 楼
我前几次做都没有这种问题，近几次出现这种情况。所以不知道是不是做的什么地方不
对。
而且一般protocol上说过度crosslink会导致细胞结团，影响超生shear chromatin。而
我加入formaldehyde一颠倒混匀就出现结团。
【在 H****N 的大作中提到】
: 结团为什么不能做？器官组织都能做
T*n
7 楼
这就去找找看。。
【在 p****n 的大作中提到】
: 这儿药店里就有卖，diabetic stocking
【在 p****n 的大作中提到】
: 这儿药店里就有卖，diabetic stocking
U*s
8 楼
the cell density is too high. you may try the formaldehyde crosslink in 10ml
growth medium (w/o serum; 1% formaldehyde) in falcon tubes.
If you grow adherent cells in monolayers, it's better to perform the
crosslink in petri dishes.
The basic principle is that: you want to take a snapshot of all kinds of
interactions with the minimum disturbance to the cells.
【在 l******3 的大作中提到】
:
: 我前几次做都没有这种问题，近几次出现这种情况。所以不知道是不是做的什么地方不
: 对。
: 而且一般protocol上说过度crosslink会导致细胞结团，影响超生shear chromatin。而
: 我加入formaldehyde一颠倒混匀就出现结团。
growth medium (w/o serum; 1% formaldehyde) in falcon tubes.
If you grow adherent cells in monolayers, it's better to perform the
crosslink in petri dishes.
The basic principle is that: you want to take a snapshot of all kinds of
interactions with the minimum disturbance to the cells.
【在 l******3 的大作中提到】
:
: 我前几次做都没有这种问题，近几次出现这种情况。所以不知道是不是做的什么地方不
: 对。
: 而且一般protocol上说过度crosslink会导致细胞结团，影响超生shear chromatin。而
: 我加入formaldehyde一颠倒混匀就出现结团。
i*a
9 楼
you have nice legs
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
l*3
10 楼
10ml
Thanks so much. Your information is really helpful. I will give a try.The
reason I initially tried fixing cells in eppendorf tubes with such a high
density was because I followed the protocol by Covarisinc (the
ultrasonicator I am using).
【在 U**s 的大作中提到】
: the cell density is too high. you may try the formaldehyde crosslink in 10ml
: growth medium (w/o serum; 1% formaldehyde) in falcon tubes.
: If you grow adherent cells in monolayers, it's better to perform the
: crosslink in petri dishes.
: The basic principle is that: you want to take a snapshot of all kinds of
: interactions with the minimum disturbance to the cells.
x*s
11 楼
ft我真的量了一下，我大腿比她粗
D*r
12 楼
以前都是在dish上直接固定，效果也还行
f*l
13 楼
怎么量的?
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
h*n
14 楼
我原来也遇到过类似问题，基本上就是细胞太多，而且贴壁细胞消化以后可能膜不完整
，更容易成团。有时候固定时间太长也会成团。
，更容易成团。有时候固定时间太长也会成团。
x*s
15 楼
拿跟她一样的皮尺啊
【在 f*******l 的大作中提到】
: 怎么量的?
【在 f*******l 的大作中提到】
: 怎么量的?
l*3
16 楼
谢谢，我在dish上试过两次，看起来还不错
【在 D********r 的大作中提到】
: 以前都是在dish上直接固定，效果也还行
【在 D********r 的大作中提到】
: 以前都是在dish上直接固定，效果也还行
v*s
17 楼
无图无真相
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
l*3
18 楼
很有可能，我一加入formaldehyde就开始结团。或许降低细胞密度有帮助。目前我试了
两次dish上固定，看起来还行。
【在 h****n 的大作中提到】
: 我原来也遇到过类似问题，基本上就是细胞太多，而且贴壁细胞消化以后可能膜不完整
: ，更容易成团。有时候固定时间太长也会成团。
两次dish上固定，看起来还行。
【在 h****n 的大作中提到】
: 我原来也遇到过类似问题，基本上就是细胞太多，而且贴壁细胞消化以后可能膜不完整
: ，更容易成团。有时候固定时间太长也会成团。
J*1
19 楼
也可以用来瘦腰，瘦身嘛？
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
f*e
20 楼
大部分人不都是dish上直接固定嘛，就是损失会大一点，结块就是细胞太密然后酶消化
造成的呗
造成的呗
f*l
21 楼
哦。原图美仔细看。
我还以为是绑腿上的，原来是皮尺。
着袜40cm，不着袜42cm?
这也没差多少嘛。
另外，测量什么部位呢？
不同部位这个误差也很大吧。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 拿跟她一样的皮尺啊
我还以为是绑腿上的，原来是皮尺。
着袜40cm，不着袜42cm?
这也没差多少嘛。
另外，测量什么部位呢？
不同部位这个误差也很大吧。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 拿跟她一样的皮尺啊
x*s
22 楼
对，位置不对的话，差很多的
【在 f*******l 的大作中提到】
: 哦。原图美仔细看。
: 我还以为是绑腿上的，原来是皮尺。
: 着袜40cm，不着袜42cm?
: 这也没差多少嘛。
: 另外，测量什么部位呢？
: 不同部位这个误差也很大吧。
【在 f*******l 的大作中提到】
: 哦。原图美仔细看。
: 我还以为是绑腿上的，原来是皮尺。
: 着袜40cm，不着袜42cm?
: 这也没差多少嘛。
: 另外，测量什么部位呢？
: 不同部位这个误差也很大吧。
f*l
23 楼
所以嘛。你怎么能确定你的大腿比她粗。
建议奔图证明。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 对，位置不对的话，差很多的
建议奔图证明。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 对，位置不对的话，差很多的
x*s
24 楼
因为我量在很靠膝盖的位置也有40...
没她好看，就不丢人了
【在 f*******l 的大作中提到】
: 所以嘛。你怎么能确定你的大腿比她粗。
: 建议奔图证明。
没她好看，就不丢人了
【在 f*******l 的大作中提到】
: 所以嘛。你怎么能确定你的大腿比她粗。
: 建议奔图证明。
f*l
25 楼
bso.
原图着袜40，不着袜42啊。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 因为我量在很靠膝盖的位置也有40...
: 没她好看，就不丢人了
原图着袜40，不着袜42啊。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 因为我量在很靠膝盖的位置也有40...
: 没她好看，就不丢人了
x*s
26 楼
在她那个位置我有50
【在 f*******l 的大作中提到】
: bso.
: 原图着袜40，不着袜42啊。
【在 f*******l 的大作中提到】
: bso.
: 原图着袜40，不着袜42啊。
f*l
27 楼
她不也是量的膝盖上面吗？
【在 x**********s 的大作中提到】
: 在她那个位置我有50
【在 x**********s 的大作中提到】
: 在她那个位置我有50
x*s
28 楼
好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
【在 f*******l 的大作中提到】
: 她不也是量的膝盖上面吗？
【在 f*******l 的大作中提到】
: 她不也是量的膝盖上面吗？
r*e
29 楼
赞
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
f*l
30 楼
【在 r*********e 的大作中提到】
: 赞
r*e
31 楼
记得上次要保养活动中奔的那张,很瘦的...
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
x*s
32 楼
哈哈是的是的那张有点不真实了
【在 r*********e 的大作中提到】
: 记得上次要保养活动中奔的那张,很瘦的...
【在 r*********e 的大作中提到】
: 记得上次要保养活动中奔的那张,很瘦的...
a*c
33 楼
如此霸气的横在窗台上，腿长的人表示毫无压力啊。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
f*l
34 楼
咋回事？ps的？
【在 x**********s 的大作中提到】
: 哈哈是的是的那张有点不真实了
【在 x**********s 的大作中提到】
: 哈哈是的是的那张有点不真实了
x*s
35 楼
没有p过。可能是角度
【在 f*******l 的大作中提到】
: 咋回事？ps的？
【在 f*******l 的大作中提到】
: 咋回事？ps的？
f*l
36 楼
错过了。
哪里能看？
【在 x**********s 的大作中提到】
: 没有p过。可能是角度
哪里能看？
【在 x**********s 的大作中提到】
: 没有p过。可能是角度
x*s
37 楼
【在 f*******l 的大作中提到】
: 错过了。
: 哪里能看？
a*c
38 楼
赞，版花今天好爽快。
【在 x**********s 的大作中提到】
【在 x**********s 的大作中提到】
r*e
39 楼
好像还有一张，更清楚
【在 x**********s 的大作中提到】
【在 x**********s 的大作中提到】
x*s
40 楼
这不都是老图了么。。。我回收站里翻出来的
【在 a*****c 的大作中提到】
: 赞，版花今天好爽快。
【在 a*****c 的大作中提到】
: 赞，版花今天好爽快。
r*e
41 楼
那个时候,还有床睡
【在 x**********s 的大作中提到】
【在 x**********s 的大作中提到】
x*s
42 楼
我翻不到了。。。
【在 r*********e 的大作中提到】
: 好像还有一张，更清楚
【在 r*********e 的大作中提到】
: 好像还有一张，更清楚
f*l
43 楼
这张超赞。
字看不清楚。
【在 x**********s 的大作中提到】
字看不清楚。
【在 x**********s 的大作中提到】
a*c
44 楼
那可能我以前错过了，这张是第一次看到。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 这不都是老图了么。。。我回收站里翻出来的
【在 x**********s 的大作中提到】
: 这不都是老图了么。。。我回收站里翻出来的
x*s
45 楼
管饭
哈哈
【在 f*******l 的大作中提到】
: 这张超赞。
: 字看不清楚。
哈哈
【在 f*******l 的大作中提到】
: 这张超赞。
: 字看不清楚。
x*s
46 楼
说的好辛酸啊。。。
【在 r*********e 的大作中提到】
: 那个时候,还有床睡
【在 r*********e 的大作中提到】
: 那个时候,还有床睡
r*e
47 楼
上面写的"求一夜情，管饭"
【在 f*******l 的大作中提到】
: 这张超赞。
: 字看不清楚。
【在 f*******l 的大作中提到】
: 这张超赞。
: 字看不清楚。
f*l
48 楼
哈哈。。
想起来了。我以前好像看过。
【在 r*********e 的大作中提到】
: 上面写的"求一夜情，管饭"
想起来了。我以前好像看过。
【在 r*********e 的大作中提到】
: 上面写的"求一夜情，管饭"
r*e
49 楼
那是娇客版上红极一时的运动,求保养运动
【在 f*******l 的大作中提到】
: 哈哈。。
: 想起来了。我以前好像看过。
【在 f*******l 的大作中提到】
: 哈哈。。
: 想起来了。我以前好像看过。
r*e
50 楼
橙子也不出来给版花办一个欢送活动....
【在 r*********e 的大作中提到】
: 那是娇客版上红极一时的运动,求保养运动
【在 r*********e 的大作中提到】
: 那是娇客版上红极一时的运动,求保养运动
x*s
51 楼
这个吧
我翻了好久
哈哈
【在 r*********e 的大作中提到】
: 上面写的"求一夜情，管饭"
我翻了好久
哈哈
【在 r*********e 的大作中提到】
: 上面写的"求一夜情，管饭"
r*e
52 楼
就是这张,赫赫
【在 x**********s 的大作中提到】
: 这个吧
: 我翻了好久
: 哈哈
【在 x**********s 的大作中提到】
: 这个吧
: 我翻了好久
: 哈哈
x*s
53 楼
那时候真是少年不知愁滋味啊。。。
现在后悔死了吧！
【在 r*********e 的大作中提到】
: 就是这张,赫赫
现在后悔死了吧！
【在 r*********e 的大作中提到】
: 就是这张,赫赫
r*e
54 楼
后悔什么啊?
【在 x**********s 的大作中提到】
: 那时候真是少年不知愁滋味啊。。。
: 现在后悔死了吧！
【在 x**********s 的大作中提到】
: 那时候真是少年不知愁滋味啊。。。
: 现在后悔死了吧！
x*s
55 楼
后悔把时间都用来玩了，没好好看书，没好好找工作。。。
【在 r*********e 的大作中提到】
: 后悔什么啊?
【在 r*********e 的大作中提到】
: 后悔什么啊?
f*l
56 楼
怎么听着真有师姐师弟的味道了。
看来石油情况。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 那时候真是少年不知愁滋味啊。。。
: 现在后悔死了吧！
看来石油情况。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 那时候真是少年不知愁滋味啊。。。
: 现在后悔死了吧！
r*e
57 楼
你们家相公不能争取点时间给你?
【在 x**********s 的大作中提到】
: 后悔把时间都用来玩了，没好好看书，没好好找工作。。。
【在 x**********s 的大作中提到】
: 后悔把时间都用来玩了，没好好看书，没好好找工作。。。
x*s
58 楼
你看，管饭都没人要，行情不好啊
【在 r*********e 的大作中提到】
: 你们家相公不能争取点时间给你?
【在 r*********e 的大作中提到】
: 你们家相公不能争取点时间给你?
v*a
59 楼
从象腿瘦成猪腿
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
y*e
60 楼
这有啥，我胳膊都比她粗
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
【在 x**********s 的大作中提到】
: ft我真的量了一下，我大腿比她粗
i*a
61 楼
ahhhhh I missed it!
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
【在 x**********s 的大作中提到】
: 好吧，奔个黑丝吧。质量比较差，自己手机随手拍的
h*i
62 楼
男腿吗
s*q
63 楼
要问我是原腿好还是瘦腿袜绑着好，自然是原腿更sexy!
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
【在 r*********e 的大作中提到】
: 传说中的瘦腿袜，有MM想要么？.jpg
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