仇子龙的申明中说他们实验室用韩春雨的NgAgo在293细胞中看到测# Biology - 生物学
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1 楼
仇子龙的声称:
目前总结下我自己实验室对NgAgo的实验结果。
1,NBT Fig3c实验,对共转染的质粒表达的GFP蛋白确实可以看到显著的抑制表达作用
,但是DNA水平的切割并未看到,这个实验里面因为被切割的质粒有可能被降解,检测
不到突变也不能说明对DNA没作用,当然也不能排除,也许,NgAgo并非作用在DNA水平
对基因表达进行了抑制等可能性。
2, 基因组水平的实验重复,
a. 我们用NBT文章中的一模一样的ssDNA与薛天老师带回来的NLS-NgAgo进行实验,在
293细胞中无法重复NBT文章中的dyrk1a等基因的切割与Indel等等。没有在Hela细胞中
进行实验。
b. 我们自己设计了针对人源的kras, p53等基因的ssDNA,分别在293细胞中human kras
, p53基因上看到过测序水平的indel,且是ssDNA靶点区域的deletion,但是频率不高
,低于5%,同批比较的cas9切割效率20%。
c, 我们自己实验室还在重复,优化各种条件,比如筛选等等。
3,这是我们自己实验室的结果,其他的老师的结果我没有发言权,不评论
4,我呼吁一下,目前这些实验结果距离NBT文章中的结果相差甚远。目前急需韩春雨老
师提供可重复NBT发表文章的NgAgo,或者优化的Ngago2.0, smart版本等等进行实验。
越多实验室的重复与推广,才能越将NgAgo的工具发扬光大。
仇子龙为什么不把这个当做是重复出来了的证据呢?
有什么难言之隐还是怀有什么鬼胎?
目前总结下我自己实验室对NgAgo的实验结果。
1,NBT Fig3c实验,对共转染的质粒表达的GFP蛋白确实可以看到显著的抑制表达作用
,但是DNA水平的切割并未看到,这个实验里面因为被切割的质粒有可能被降解,检测
不到突变也不能说明对DNA没作用,当然也不能排除,也许,NgAgo并非作用在DNA水平
对基因表达进行了抑制等可能性。
2, 基因组水平的实验重复,
a. 我们用NBT文章中的一模一样的ssDNA与薛天老师带回来的NLS-NgAgo进行实验,在
293细胞中无法重复NBT文章中的dyrk1a等基因的切割与Indel等等。没有在Hela细胞中
进行实验。
b. 我们自己设计了针对人源的kras, p53等基因的ssDNA,分别在293细胞中human kras
, p53基因上看到过测序水平的indel,且是ssDNA靶点区域的deletion,但是频率不高
,低于5%,同批比较的cas9切割效率20%。
c, 我们自己实验室还在重复,优化各种条件,比如筛选等等。
3,这是我们自己实验室的结果,其他的老师的结果我没有发言权,不评论
4,我呼吁一下,目前这些实验结果距离NBT文章中的结果相差甚远。目前急需韩春雨老
师提供可重复NBT发表文章的NgAgo,或者优化的Ngago2.0, smart版本等等进行实验。
越多实验室的重复与推广,才能越将NgAgo的工具发扬光大。
仇子龙为什么不把这个当做是重复出来了的证据呢?
有什么难言之隐还是怀有什么鬼胎?