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怎样将一个细菌感染的人组织标本中的细菌RNA和人RNA分离开?
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怎样将一个细菌感染的人组织标本中的细菌RNA和人RNA分离开?# Biology - 生物学
q*0
1
请教高人:将一个细菌感染的人组织标本中的细菌RNA和人RNA分离开作细菌的
transcriptome分析,用什么方法/技术?谢谢先!
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m*D
2
能想出来的就是polyA了。过Poly-T的柱子,也许能把人的mRNA搞掉大部分。
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q*0
3
谢谢回复!
细菌mRNA也是Polyadenylated的吧?过Poly-T的柱也会跟着一起下来的。

【在 m*********D 的大作中提到】
: 能想出来的就是polyA了。过Poly-T的柱子,也许能把人的mRNA搞掉大部分。
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s*6
4
这在分析时用不同的参考基因组和GTF文件,人的和细菌的应该差异很大,估计不需要
分别做文库。
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c*y
5
bacterial mRNA polyadenylation不是主流吧

【在 q**********0 的大作中提到】
: 谢谢回复!
: 细菌mRNA也是Polyadenylated的吧?过Poly-T的柱也会跟着一起下来的。

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x*a
6
如果只是分析细菌transcriptome,无需将两者的RNA分开,直接进行mapping即可。
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C*n
7
如果你只是需要提取细菌的RNA,你可以先把细菌从感染的人体组织里提取出来。如果
你用的组织是血液或者细胞,可以用专门的溶剂把血液和细胞破坏掉,我记得有一种含
有deoxycolate自己可以配,然后spin down wash几次。如果感染的组织是器官,可以先
用meganetic beats。
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q*0
8
Sequencing facility requires separation of bacteria RNA.

【在 x***a 的大作中提到】
: 如果只是分析细菌transcriptome,无需将两者的RNA分开,直接进行mapping即可。
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q*0
9
Thanks. Do you know the catalog of the kit to separate bacteria from tissue
or blood cells?

【在 C*********n 的大作中提到】
: 如果你只是需要提取细菌的RNA,你可以先把细菌从感染的人体组织里提取出来。如果
: 你用的组织是血液或者细胞,可以用专门的溶剂把血液和细胞破坏掉,我记得有一种含
: 有deoxycolate自己可以配,然后spin down wash几次。如果感染的组织是器官,可以先
: 用meganetic beats。

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C*n
10
A new technique for obtaining whole pathogen transcriptomes from infected
host tissues
搜一下
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q*0
11
Thanks a million.

【在 C*********n 的大作中提到】
: A new technique for obtaining whole pathogen transcriptomes from infected
: host tissues
: 搜一下

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