G*1
2 楼
Buffalo Wild Wings - buy 6 traditional get 6 free, Apr 07
Buffalo Wild Wings has a new coupon: buy 6 traditional get 6 free. Offer
valid through 4/25/2010.
Comments (10) ›Add Comments
04/07/2010, 12:09pm By anonymous
Good Wings? :)
04/07/2010, 12:17pm By anonymous
Awesome wings!!! Wings are so good you might fly!!
04/07/2010, 01:04pm By anonymous
Fly to Pandora
04/07/2010, 01:54pm By anonymous
Does the buffalo have wings?
04/07/2010, 02:14pm By anonymous
wings are gooooood. but your chole
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04/07/2010, 12:09pm By anonymous
Good Wings? :)
04/07/2010, 12:17pm By anonymous
Awesome wings!!! Wings are so good you might fly!!
04/07/2010, 01:04pm By anonymous
Fly to Pandora
04/07/2010, 01:54pm By anonymous
Does the buffalo have wings?
04/07/2010, 02:14pm By anonymous
wings are gooooood. but your chole
t*o
3 楼
最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
伤ssDNA分子。
试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
概是60%。我得用50个柱子才行。
在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
多谢了。
有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
伤ssDNA分子。
试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
概是60%。我得用50个柱子才行。
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只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
多谢了。
F*Q
4 楼
let me google that for you:
http://bit.ly/u8FQ8v
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B*6
5 楼
乙醇沉淀？
【在 t*******o 的大作中提到】
: 最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
: 伤ssDNA分子。
: 试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
: 概是60%。我得用50个柱子才行。
: 在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
: 只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
: 暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
: 多谢了。
【在 t*******o 的大作中提到】
: 最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
: 伤ssDNA分子。
: 试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
: 概是60%。我得用50个柱子才行。
: 在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
: 只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
: 暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
: 多谢了。
A*y
6 楼
haha，这么好玩，谢谢
【在 F***Q 的大作中提到】
: let me google that for you:
: http://bit.ly/u8FQ8v
【在 F***Q 的大作中提到】
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M*g
7 楼
dialysis?
f*0
8 楼
去WALMART 买WEATHER STRIP，回来一贴就好了。
r*d
9 楼
用Amicon,买分子量cut off 3000那种，一管子15ml,一次离心就可以同时装6管还是8管
【在 t*******o 的大作中提到】
: 最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
: 伤ssDNA分子。
: 试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
: 概是60%。我得用50个柱子才行。
: 在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
: 只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
: 暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
: 多谢了。
【在 t*******o 的大作中提到】
: 最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
: 伤ssDNA分子。
: 试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
: 概是60%。我得用50个柱子才行。
: 在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
: 只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
: 暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
: 多谢了。
p*y
10 楼
我感觉此地的房子不仅是窗缝，简直是到处透风。。。:(
f*e
11 楼
超滤，G25柱脱盐，透析都可以
t*o
12 楼
多谢楼上几位。
乙醇沉淀考虑过， 怕DTT和乙醇弄不干净，影响下一步的应用。
dialysis需要的时间比较长，可能需要overnight才能除干净。已经reduced的oligo可
能又被氧化了。不过可以考虑。
desalting受体积的影响，需要大量的柱子。或者请问有什么比较大的柱子能一次
desalting比较大的volume? 还是说需要自己pack柱子？
超滤的话有什么装置可以推荐的吗?
【在 f****e 的大作中提到】
: 超滤，G25柱脱盐，透析都可以
乙醇沉淀考虑过， 怕DTT和乙醇弄不干净，影响下一步的应用。
dialysis需要的时间比较长，可能需要overnight才能除干净。已经reduced的oligo可
能又被氧化了。不过可以考虑。
desalting受体积的影响，需要大量的柱子。或者请问有什么比较大的柱子能一次
desalting比较大的volume? 还是说需要自己pack柱子？
超滤的话有什么装置可以推荐的吗?
【在 f****e 的大作中提到】
: 超滤，G25柱脱盐，透析都可以
g*x
13 楼
amicon 15
100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
【在 t*******o 的大作中提到】
: 多谢楼上几位。
: 乙醇沉淀考虑过， 怕DTT和乙醇弄不干净，影响下一步的应用。
: dialysis需要的时间比较长，可能需要overnight才能除干净。已经reduced的oligo可
: 能又被氧化了。不过可以考虑。
: desalting受体积的影响，需要大量的柱子。或者请问有什么比较大的柱子能一次
: desalting比较大的volume? 还是说需要自己pack柱子？
: 超滤的话有什么装置可以推荐的吗?
100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
【在 t*******o 的大作中提到】
: 多谢楼上几位。
: 乙醇沉淀考虑过， 怕DTT和乙醇弄不干净，影响下一步的应用。
: dialysis需要的时间比较长，可能需要overnight才能除干净。已经reduced的oligo可
: 能又被氧化了。不过可以考虑。
: desalting受体积的影响，需要大量的柱子。或者请问有什么比较大的柱子能一次
: desalting比较大的volume? 还是说需要自己pack柱子？
: 超滤的话有什么装置可以推荐的吗?
A*y
14 楼
True, Amicon spin column is the best way if you don't want to do dialysis.
【在 g*****x 的大作中提到】
: amicon 15
: 100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
【在 g*****x 的大作中提到】
: amicon 15
: 100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
t*o
15 楼
Amicon还真不行。我能找到的最小的3KDa, 过滤5KDa的ssDNA，基本上都会漏掉。
【在 g*****x 的大作中提到】
: amicon 15
: 100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
【在 g*****x 的大作中提到】
: amicon 15
: 100 mL算个屁的大量啊，我点进来想回TFF的
N*n
16 楼
你是一次性的实验，还是要重复？cost不一样，方法会不同。
【在 t*******o 的大作中提到】
: 最近在研究如何大量buffer exchange ssDNA。
: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
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: 概是60%。我得用50个柱子才行。
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【在 t*******o 的大作中提到】
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: 有一批ssDNA, 大概10mg/mL, 100mL的样子。分子量大概5kDa，里面有100mM DTT需要除
: 掉。请问有什么办法可以快速有效的buffer exchange除掉DTT，而不怎么稀释浓度和损
: 伤ssDNA分子。
: 试过ZeBa column, 一个最大的柱子一次最多也就能过大概2mL*10mg/mL=20mg。yield大
: 概是60%。我得用50个柱子才行。
: 在AKTAexplorer上试过GE Hitrap Q and Hitrap DEAE的阴离子交换柱. 1mL的柱子大概
: 只能结合15-20mg DNA.样品会被稀释到大概3-4mg/mL.
: 暂时想不到什么其他有效的办法。版上高人众多。有过类似经验的能否介绍一下经验？
: 多谢了。
g*x
17 楼
那自己买1 kDa的UF membrane去TFF吧
【在 t*******o 的大作中提到】
: Amicon还真不行。我能找到的最小的3KDa, 过滤5KDa的ssDNA，基本上都会漏掉。
【在 t*******o 的大作中提到】
: Amicon还真不行。我能找到的最小的3KDa, 过滤5KDa的ssDNA，基本上都会漏掉。
t*o
18 楼
就一次性的实验。所以如果是disposable的东西最好。
【在 N****n 的大作中提到】
: 你是一次性的实验，还是要重复？cost不一样，方法会不同。
【在 N****n 的大作中提到】
: 你是一次性的实验，还是要重复？cost不一样，方法会不同。
t*o
19 楼
UF还真没用过。请问如果我想买500Da cutoff, vol 50-200mL 的超滤膜，哪里能买到
， 有什么可以推荐的吗？
【在 g*****x 的大作中提到】
: 那自己买1 kDa的UF membrane去TFF吧
， 有什么可以推荐的吗？
【在 g*****x 的大作中提到】
: 那自己买1 kDa的UF membrane去TFF吧
g*x
20 楼
Koch, 500 Da我不知道属于他们UF还是NF
也未必有现成的cartridge
【在 t*******o 的大作中提到】
: UF还真没用过。请问如果我想买500Da cutoff, vol 50-200mL 的超滤膜，哪里能买到
: ， 有什么可以推荐的吗？
也未必有现成的cartridge
【在 t*******o 的大作中提到】
: UF还真没用过。请问如果我想买500Da cutoff, vol 50-200mL 的超滤膜，哪里能买到
: ， 有什么可以推荐的吗？
t*o
21 楼
anyway, Thanks a lot!
【在 g*****x 的大作中提到】
: Koch, 500 Da我不知道属于他们UF还是NF
: 也未必有现成的cartridge
【在 g*****x 的大作中提到】
: Koch, 500 Da我不知道属于他们UF还是NF
: 也未必有现成的cartridge
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