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请教Co-IP,A蛋白能拉下来B蛋白,B蛋白拉不下A蛋白
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请教Co-IP,A蛋白能拉下来B蛋白,B蛋白拉不下A蛋白# Biology - 生物学
l*y
1
什么流行就用什么呗??你们tm整天把时间精力用在研究这些消费电子产品上,很无聊
,有什么意义?有那功夫泡泡妞,健健身,什么的,不好吗??
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b*n
2
对照设置完备,Co-IP,A蛋白能拉下来B蛋白,B蛋白拉不下A蛋白;怕抗体不好,用已
经报道的标签蛋白融合,还是一样的结果,A能拉下来B,且突变体不能拉下来;B蛋白
拉不下来A。
什么道理?
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s*s
3
IP的蛋白是不变性的,检测的蛋白是变性过的,各种抗体对检测和IP的能力不同很正常

【在 b*****n 的大作中提到】
: 对照设置完备,Co-IP,A蛋白能拉下来B蛋白,B蛋白拉不下A蛋白;怕抗体不好,用已
: 经报道的标签蛋白融合,还是一样的结果,A能拉下来B,且突变体不能拉下来;B蛋白
: 拉不下来A。
: 什么道理?

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t*m
4
固定B的时候把标签换一头儿试试

【在 b*****n 的大作中提到】
: 对照设置完备,Co-IP,A蛋白能拉下来B蛋白,B蛋白拉不下A蛋白;怕抗体不好,用已
: 经报道的标签蛋白融合,还是一样的结果,A能拉下来B,且突变体不能拉下来;B蛋白
: 拉不下来A。
: 什么道理?

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b*n
5
检测的抗体可以识别input蛋白没有问题。融合的标签蛋白是myc和flag,也试过不同标
签,是报道大家都用的,而且检测也没有问题。

【在 s******s 的大作中提到】
: IP的蛋白是不变性的,检测的蛋白是变性过的,各种抗体对检测和IP的能力不同很正常
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b*n
6
换了,没用。

【在 t**m 的大作中提到】
: 固定B的时候把标签换一头儿试试
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g*n
7
可能是量的问题。假如,一个复合体里有1个A 5个B,那A就少,不容易被检测到。增加
上样量试试。
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a*c
8
也许抗体和B作用的时候把A block了。Co-IP不一定非得两个方向都得work, 还是在其
他佐证上下功夫吧。
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w*d
9
co-localization的结果有吗?
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