求教，HPLC分离DNA# Chemistry - 化学
n*s
1 楼
发了20几所学校，才发现自己CV的本科就读时间写的是 1990-2003 （should be 1999
），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
太粗心了
），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
太粗心了
y*x
2 楼
我们有5款化妆品， 美国生产， 国内有批文，3款已经在大陆销售，可在大型百货公司
， 超市，美容院线，连锁店，微信上销售。 目前正在找国内的电子商务或微信销售商
拓展销售渠道，
如果您本人，或国内的亲戚朋友有兴趣， 请联[email protected]/* */， 或微信：
hbgvictor,谢谢！
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m*p
3 楼
因为dividend少于$10所以没有1099－div。虽然一点都不影响tax filing的结果，但是
请有经验的大牛指点一下，这个要不要填进税表，新手第一次填有股票交易的税表，非
常感激！
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常感激！
T*n
4 楼
分别是和大老婆撒娇两张、和俺粘乎、娇羞照、酣睡。
t*e
5 楼
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最近申请chase家的这个信用卡会弹出一个页面，写着Before you go…We hope you
will reconsider 难不成他们家最近被人拿太多这个100刀了！ 不用对它客气，赶
紧点击Return&Apply， 拿到落袋为安。
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2. 免费的250刀 Chase SapphireSM Preferred Card需要满足这个offer的条件
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4. 免费的12000mile from Miles Card by Discover
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a*e
6 楼
不知道生物 WSN 会不会上春晚?
K*l
7 楼
先谢谢...
最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
用的是waters的XBridge OST C18 Columns
但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
之后几十分钟都没峰出现了
我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
谢谢
最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
用的是waters的XBridge OST C18 Columns
但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
之后几十分钟都没峰出现了
我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
谢谢
a*s
8 楼
说明基础扎实吧。。。
1999
【在 n*******s 的大作中提到】
: 发了20几所学校，才发现自己CV的本科就读时间写的是 1990-2003 （should be 1999
: ），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
: 太粗心了
1999
【在 n*******s 的大作中提到】
: 发了20几所学校，才发现自己CV的本科就读时间写的是 1990-2003 （should be 1999
: ），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
: 太粗心了
y*x
9 楼
本人的联系邮件是： [email protected]/* */
M*s
10 楼
要
P*l
11 楼
啥意思？
c*m
12 楼
你的柱子有多长？梯度？流速？进样溶剂和进样量？你进空白会有峰吗？
我怀疑是
（1）溶剂前峰，把峰接了去做MS就知道了
（2）没有保留，同样去做MS
（3）上一针残留，换梯度和进样溶剂
【在 K****l 的大作中提到】
: 先谢谢...
: 最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
: 用的是waters的XBridge OST C18 Columns
: 但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
我怀疑是
（1）溶剂前峰，把峰接了去做MS就知道了
（2）没有保留，同样去做MS
（3）上一针残留，换梯度和进样溶剂
【在 K****l 的大作中提到】
: 先谢谢...
: 最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
: 用的是waters的XBridge OST C18 Columns
: 但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
i0
13 楼
....
1999
【在 n*******s 的大作中提到】
: 发了20几所学校，才发现自己CV的本科就读时间写的是 1990-2003 （should be 1999
: ），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
: 太粗心了
1999
【在 n*******s 的大作中提到】
: 发了20几所学校，才发现自己CV的本科就读时间写的是 1990-2003 （should be 1999
: ），13年啊！希望不会因此被直接唰掉～
: 太粗心了
y*x
14 楼
有感兴趣的朋友吗？请联系我，谢谢
: 本人的联系邮件是： [email protected]/* */
【在 y***x 的大作中提到】
: 本人的联系邮件是： [email protected]/* */
: 本人的联系邮件是： [email protected]/* */
【在 y***x 的大作中提到】
: 本人的联系邮件是： [email protected]/* */
h*e
15 楼
没人看春晚？
【在 P**l 的大作中提到】
: 啥意思？
【在 P**l 的大作中提到】
: 啥意思？
K*l
16 楼
4.6*50的柱子，一开始 A是12%-34.5% methanol，B是HFIP-TEA
0.5mL/m和1.0mL/m的流速都是试过
进样一般20ul，含1-3mole的样品
进空白几乎没有峰
接了峰去做MALDI，几乎就是进样的样品
而且只用buffer跑的话，也是瞬间下来。
看起来似乎是柱子出了问题，但是跑另外一个修饰过的DNA，出峰很正常~~
有方法判断是否柱子出问题了吗？
谢谢
【在 c******m 的大作中提到】
: 你的柱子有多长？梯度？流速？进样溶剂和进样量？你进空白会有峰吗？
: 我怀疑是
: （1）溶剂前峰，把峰接了去做MS就知道了
: （2）没有保留，同样去做MS
: （3）上一针残留，换梯度和进样溶剂
0.5mL/m和1.0mL/m的流速都是试过
进样一般20ul，含1-3mole的样品
进空白几乎没有峰
接了峰去做MALDI，几乎就是进样的样品
而且只用buffer跑的话，也是瞬间下来。
看起来似乎是柱子出了问题，但是跑另外一个修饰过的DNA，出峰很正常~~
有方法判断是否柱子出问题了吗？
谢谢
【在 c******m 的大作中提到】
: 你的柱子有多长？梯度？流速？进样溶剂和进样量？你进空白会有峰吗？
: 我怀疑是
: （1）溶剂前峰，把峰接了去做MS就知道了
: （2）没有保留，同样去做MS
: （3）上一针残留，换梯度和进样溶剂
a*o
17 楼
Any other Bill?
y*x
18 楼
【在 y***x 的大作中提到】
: 我们有5款化妆品， 美国生产， 国内有批文，3款已经在大陆销售，可在大型百货公司
: ， 超市，美容院线，连锁店，微信上销售。 目前正在找国内的电子商务或微信销售商
: 拓展销售渠道，
: 如果您本人，或国内的亲戚朋友有兴趣， 请联[email protected]/* */， 或微信：
: hbgvictor,谢谢！
L*r
19 楼
DNA亲水性大，楼主使用HILIC柱就可以了。
S*n
20 楼
重新发一份就行了.
K*l
21 楼
这个柱子多少钱？大概
【在 L****r 的大作中提到】
: DNA亲水性大，楼主使用HILIC柱就可以了。
【在 L****r 的大作中提到】
: DNA亲水性大，楼主使用HILIC柱就可以了。
L*r
22 楼
$700-800 from Waters.
g*0
23 楼
试试用Acetonitrile
从0％开始
每2分钟升1％
大概在20－30min处出来
【在 K****l 的大作中提到】
: 先谢谢...
: 最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
: 用的是waters的XBridge OST C18 Columns
: 但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
从0％开始
每2分钟升1％
大概在20－30min处出来
【在 K****l 的大作中提到】
: 先谢谢...
: 最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
: 用的是waters的XBridge OST C18 Columns
: 但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
c*m
24 楼
正解
【在 L****r 的大作中提到】
: DNA亲水性大，楼主使用HILIC柱就可以了。
【在 L****r 的大作中提到】
: DNA亲水性大，楼主使用HILIC柱就可以了。
t*e
25 楼
还有一种可能是，DNA 没有和固定相结合，你的样品是在什么里边？加一些ion-
pairing reagent试试。
【在 K****l 的大作中提到】
: 先谢谢...
: 最近用HPLC分离24个碱基对，分子量6600的DNA
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: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
pairing reagent试试。
【在 K****l 的大作中提到】
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: 但是每次一进样，大概30-40秒就出现一个类似产物的峰就出来了（260nm，Abs）
: 之后几十分钟都没峰出现了
: 我用的体系是A：methanol B：TEA-HFIP in water
: 后来试了TEA-HFIP&ACN的体系也是一样，一上样就下来
: 不知道这种现象是为什么？如果是柱子坏了的话，如何判断确定是否真的坏了？
: 谢谢
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