Scientist, associate Scientist, HPLC, LC/MS 背景 - 未名空间MITBBS历史存档

Scientist, associate Scientist, HPLC, LC/MS 背景# Chemistry - 化学

D*92018-08-07 07:08

1 楼

父母四年前，也就是2010年来美国，因为不得已的原因延期了。现在父母又要办签证，
通过中信代办就行了。但延期的那个approval 已经lost了，请问，会因为延期信不见
而要求补交材料或者签证被拒吗？有什么解决办法吗？

M*t2018-08-07 07:08

2 楼

EB2两个OVERSUBSCRIBED 国家目前的DEMAND已经基本用尽,新年度的VB即将开出.根据以
前的分析,新年度排期进展应该跟往年不同.可是,历年的经验告诉俺们,奥本是个偏执狂
-他偏袒IND弟兄不遗余力.俺们应该提高警惕,防止他耍新的花招.
如果新年度VB EB2没有进展,几乎可以断定,新的年度,DOS(奥本)没有进一步消化解决新
的EB2 DEMAND(未知)的计划.这个时间最晚可以给他到公布11月份的VB.(EB2CI应该有前
进到07年8月-越过大潮.)
在这个时刻,俺们的当务之急应该是推动-善意地提醒奥本尽早地有步骤地开放485递交-
没有库存不等于没有需求.
因为EB2没进展意味着他要用新年度的SO来解决EB3I的BACKLOG.
按照有些同学的说法,早交485一定是一刀切,EB2,EB3一起来.俺的看法是,不尽然.目前
来看,EB2 DEMAND已经基本解决,反观EB3,截止到本年度9月份,2007年1月前EB3的DEMAND
还有近10万-其中IND 5万多占 50%以上....
(更多请到NIU中文网站继续观看.)
http://www.niunational.com/forum.php?mod=viewthread&tid=580&ext

d*w2018-08-07 07:08

3 楼

上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
40ug这中大小的？
另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
里做的不对？谢谢指教

x*g2018-08-07 07:08

4 楼

大型CDMO 公司，在北卡RTP地区，permanent position, MS或PhD 以上学位，招有
HPLC 和或 LC/MS背景，最好有工作经验的朋友。要求有绿卡或绿卡EAD卡。如
果感兴趣，请私信我。谢谢！ [email protected]

D*92018-08-07 07:08

5 楼

我来更新一下，由于过去四年了，我妈妈的延期信不见了，VO问你延期批了吗？我妈妈
说批了，但是过去四五年了，我的延期信找不到了。
对方给黄条，说一个星期以后给答复，两天以后就批了

w*a2018-08-07 07:08

6 楼

http://dshb.biology.uiowa.edu/Antibody-list

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

e*22018-08-07 07:08

7 楼

有绿卡早改行了，谁还干这个技术员

【在 x*********g 的大作中提到】

: 大型CDMO 公司，在北卡RTP地区，permanent position, MS或PhD 以上学位，招有
: HPLC 和或 LC/MS背景，最好有工作经验的朋友。要求有绿卡或绿卡EAD卡。如
: 果感兴趣，请私信我。谢谢！ [email protected]

w*a2018-08-07 07:08

8 楼

lysate buffer得专门配吧，至少得有proteinase inhibitor那些
你的蛋白搞不好degrade了。

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

v*a2018-08-07 07:08

9 楼

我买过GeneScript的40ug的
他们的客服也还好

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

Z*52018-08-07 07:08

10 楼

我也在用c-MYC的抗体，用了两家公司的，杂带都很多。 abcam的还勉强可以用。

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

Z*52018-08-07 07:08

11 楼

c-Myc内源性的很难检测，信号很弱，HepG2，A549的都是这样。检测knockdown的效果
感觉就是在YY。不过转入pcDNA3.1过表达的，信号非常非常非常（n个非常）强。

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

d*w2018-08-07 07:08

12 楼

谢谢！

【在 w***a 的大作中提到】

: http://dshb.biology.uiowa.edu/Antibody-list

d*w2018-08-07 07:08

13 楼

SDS上样buffer里面有beta-ME，那个不是可以抑制蛋白酶吗？我就没有另外配了。

【在 w***a 的大作中提到】

: lysate buffer得专门配吧，至少得有proteinase inhibitor那些
: 你的蛋白搞不好degrade了。

d*w2018-08-07 07:08

14 楼

你的意思是样品上样量有可能不够？

【在 Z******5 的大作中提到】

: c-Myc内源性的很难检测，信号很弱，HepG2，A549的都是这样。检测knockdown的效果
: 感觉就是在YY。不过转入pcDNA3.1过表达的，信号非常非常非常（n个非常）强。

Z*52018-08-07 07:08

15 楼

应该不是上样量的问题，我striping后（或者跑的久一点，从45kD处剪开），用beta-
actin杂交，内参的信号已经非常强了，而内源性的c-myc还是很弱。
我用过的两家c-myc的抗体都能杂处很多条带，其中在48-65kD之间有三条条带，转入质
粒过表达显示最上面的条带才是c-myc的（有抗体公司说是表观分子量68kD，有文章说
是64kD，不过所指的是同一条带）。你可以参考这篇文章Nucleolar localization of
hepatic c-Myc: a potential mechanism for c-Myc regulation
关于内源性c-myc杂交很弱的问题，我查过很多文章，多数都是杂带很多，64kD处很弱
。有个别条带很专一，信号很强的，我很怀疑，因为我知道有人拿其它抗体，比如
actin抗体做了个figure，然后说是c-myc杂交的，还发了不错的文章。

【在 d*******w 的大作中提到】

: 你的意思是样品上样量有可能不够？

r*e2018-08-07 07:08

16 楼

Myc蛋白，不是Myc-tag，据说很容易降解，所以很难看到信号。

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教

c*r2018-08-07 07:08

17 楼

你load了多少蛋白？有定量不？

【在 d*******w 的大作中提到】

: 上次大家在讨论抗体的时候（具体忘了哪个帖子），有提到过某个大学的抗体中心会卖
: 一些常见的抗体相当便宜，谁能帮忙给个连接？或者有哪些公司会卖比较少量的像
: 40ug这中大小的？
: 另外想问一个关于c-myc抗体的问题，我用的是Cell Signaling 的抗兔抗体。做WB的时
: 候后用1：1000，但是从来没出现过。我的cell lysates 是直接将SDS上样buffer加到
: 细胞里，煮10分钟后，离心，上样。不知道有没有人和我出现同样的问题？或者我有哪
: 里做的不对？谢谢指教