破防！清纯小师妹深夜给师兄发信息竟遭拒：求你了！这20个实验protocol我送你！

欢迎来到实验室吐槽现场（师兄版）！又是一年新学期，又迎来了各式各样的懵懂小师妹，咱就是说，这做实验不仅废她们，更废我们这当师兄的！

为啥这么说呢？

因为有的师兄还沉浸在师妹一声声的呼唤中，宁愿牺牲自己也要替师妹的实验加把油；而有的师兄已经能从各届师妹对自己的称呼中，分辨出她们的实验需求了，比如我，强忍痛苦每天听着师妹不同的称呼，并给出一堆已经说了八百遍的实验建议。

当师妹叫我学长时

多半刚入学，此时我说啥她就做啥，这个阶段相对好带。

当师妹叫我师兄时

已经入学两三月，初步踏入修炼厚脸皮的道路，需要反复理解我说的实验建议。

当师妹叫我华哥时

是我痛苦的开始，她的脸皮逐步增厚，让她打好实验基础，她已经开始着急下一步是啥。

当师妹叫我哥哥时

此时她下一句话一定是：“这个实验我不太会，帮我做一下吧~”。

当师妹叫我张工时

她100%是某个实验做扯了，让我紧急给她补救……

当师妹叫我张教授/张长江/张院士时

！！！我会打起120分注意，她要捧杀我了！让我迷失在她一声声的呼唤中，然后不得不给她翻来覆去讲实验，从原理讲到步骤，还要抽空解答常见问题……

我现在听见师妹叫我，就像孙悟空听见紧箍咒，脑壳疼！话说回来，俺也不是时时刻刻都有空给师妹讲这么细致，索性直接送了她一本《20个经典实验protocol》，师妹从头到尾，边操作，边翻书，书翻完了，实验也做出来了！

看到这，各位还在发愁实验的科研人有没有狠狠心动？好消息来了！

为了助力每位科研人顺利搞定实验，按时毕业，解螺旋决定：0元包邮送给各位解螺旋这本口碑超高的科研书《20个经典实验protocol》，哪步不会，翻哪页，朴实无华，现学现用，让你的实验越做越简单！

《20个经典实验protocol》

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全书内容共20章，一类实验一个章节，从实验原理、到实验目的、再到实验步骤，包括所需试剂以及各个实验的常见问题，在这本书里全都有！

接下来，再带大家看看它的亮点和优势。

一、系统介绍20种经典实验protocol，超全面！

这份实验protocol包含20个经典热门实验详细操作教程，从入门到初级，再到中阶实验，全都包含！

1.细胞周期检测实验

细胞周期是肿瘤研究的重要表型之一，是分子生物学和药理学研究解决的问题之一，超全的细胞实验protocol，等你get！

■ 细胞计数法

■ BrdU参入法

细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。

单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。

■ 流式细胞仪

流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。

通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。

2.外泌体相关实验

外泌体的研究套路更是进入到多细胞交互的科研境界，收服一区期刊、拿下国自然都不在话下。

■ 外泌体抽提

外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是超速离心法，二是过滤离心，三是密度梯度离心法，四是免疫磁珠法，五是 PS 亲和法，六是色谱法。

■ 外泌体电镜观察

外泌体在 30~300nm 左右，需要透射电子显微镜、扫描电子显微镜或原子力显微镜才能观察到。结合特定的染色(如负染色)可以使外泌体更加可视化。

■ 外泌体示踪

外泌体具有典型的脂质双分子层结构；参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持。

对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料和膜渗透型化合物等。

3.染色质免疫共沉淀（ChIP）实验

染色质免疫共沉淀可以：(1)组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”；(2)转录调控分析；(3)药物开发研究；(4)DNA 损失与凋亡分析。

4.蛋白互作实验

Co-IP、GST-pulldown等机制实验，在这份实验protocol里带你将玩转信号转导、转录调控研究！

■ 免疫共沉淀（Co-IP）实验

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。

■ GST-pulldown实验

利用重组技术将目标蛋白与 GST(Glutathione S transferase)融合，融合蛋白通过 GST 与固相化在载体上的 GTH(Glutathione)亲和结合。

■ 荧光共振能量转移

荧光共振能量转移技术 (fluorescence resonance energy transfer，FRET)，是采用物理方法去检测分子间的相互作用的方法，适用于在细胞正常的生理条件下，验证已知分子间是否存在相互作用。

■ 酵母双杂交系统

酵母的转录激活因子 GAL4 由两个可以分开的、功能上相互独立的结构域 DNA 结合域(DNA binding domain, BD)和的转录激活域(transcription activation domain, AD)。

BD 可以和上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)结合，而 AD 则能激活 UAS 下游的基因进行转录。

更多经典实验内容

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二、全面展现实验过程和步骤，超实用！

每一个实验，都有原理和步骤，让你既明白理论，又能上手实操，非常实用了！而且还有超多实验技巧和干货，以及实验要点，省时又实用，等你来学！

1.划痕愈合实验

2.TRIzoI抽提细胞RNA

3.反转录

反转录是在反转录酶的作用下以 RNA 为模板合成 DNA 的过程，合成的 DNA 链称为与

RNA 互补 DNA(complementary DNA，cDNA)。

4.qPCR检测实验

更多实验步骤

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三、标书、论文实验必备，一书多用！

很多科研新手都说实验入门难，往往是没有掌握实验原理，缺乏科研框架性思维。在这本书里，我们不仅为大家总结了超级详细的WB、PCR引物设计、RNA抽提、免疫组化等入门实验protocol，还为大家准备了常用的实验方法，包含表型确认、分子机制、细胞交互等内容。

除此之外，在这份实验干货合集中，我们还为大家列举出了一些常用实验的细节、注意事项等，尽最大可能为大家避免踩到实验中的坑！无论是论文还是标书写作，有了这份实验protocol，都能轻松搞定科研实验，不踩坑！

RT-QPCR实验

细胞周期检测实验常见问题

ChIP实验注意事项

四、中科院博士亲授，扫清实验中的一切障碍！

本书作者猫大老师是中国科学院上海生命科学研究院博士，实验技能极为丰富全面。

操刀制作了解螺旋《酸谈实验室》课程，手把手地教学员细胞、分子生物学实验实操技巧。

所以不管你在实验过程中遇到什么技术难题，猫大老师都能帮你解决！

总之，为了师兄师姐们的身心健康，为了大家能顺利搞定实验，强烈建议大家修炼好实验技能，并背诵本书实验技能教程！

最后，再啰嗦一句，想要系统掌握实验技能，或者希望自己实验技能更加精湛的同学，快来把这本书0元带回家吧，以后绝不在实验上出丑！

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