Re: a question for protein expression in pichia# Biology - 生物学
r*o
1 楼
你最好做个阴性对照看看那些条带是不是杂蛋白。
我觉得75KD的那条带很有可能只是杂蛋白吧。之所以
你能在WB上看到这条带应该是因为它量太大，二抗
与它有非特异性结合的原因。
糖基化不可能让24KD的SIZE增大那么多，况且
你用的pichia 比较低等，只能加一些最简单的N-LINK
糖基在上面。
BTW：我们实验室也有人做这个系统。也是表达
HUMAN或者MOUSE的蛋白。你们有没有表达什么酶过呢？
如果有活性如何呢？
我觉得75KD的那条带很有可能只是杂蛋白吧。之所以
你能在WB上看到这条带应该是因为它量太大，二抗
与它有非特异性结合的原因。
糖基化不可能让24KD的SIZE增大那么多，况且
你用的pichia 比较低等，只能加一些最简单的N-LINK
糖基在上面。
BTW：我们实验室也有人做这个系统。也是表达
HUMAN或者MOUSE的蛋白。你们有没有表达什么酶过呢？
如果有活性如何呢？