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转染293细胞怎么样才能不漂起来？
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转染293细胞怎么样才能不漂起来？# Biology - 生物学
h*I
1 楼
首先祝大家圣诞快乐。现有一个很棘手的问题向大家求助，是关于我妹妹的事，实在是
不知道该怎么办了。
1年半前我妹妹是一个学校环境专业的学生（美国排名前50左右），当时是全额奖学金
来的，由于之前报的导师名额已满，学校转给了一个新来的印度教授。开学后日常只是
上课，还没有太多的接触。期末考试的时候，其中一门课程由于我妹网上交作业的时候
交错了一个版本，引用的文献已经列出来了，但是引用的几个句子还没有改，结果被判
了个F（引用文献不当），虽然学校也承认不是有意的错误，但是毕竟交的时候版本是
有问题的，不过还是给了个重修的机会，可以replace这个成绩。我妹当时立刻去恳求
她的印度教授，但他表明这和他没有关系，也帮不上忙，让我妹自己去处理。最后找到
任课老师和系主任去认错和恳求，无论如何奖学金最终还是没了。
后来校方表示只要 一年后GPA合格，拿到博士生资格还是可以再有奖学金的。由于没有
奖学金，生活的负担就一下加重了，而且还有F的记录心里的负担更重，接下来的半年
里我妹非常非常的努力大概一天睡5个小时左右，剩下的时间都在学习，生活上也非常
非常的节省, 因为他们的学费非常的贵，通过半年的努力，最后我妹其他课都拿了A，
可没想到的是却没有拿到博士生资格，半年里她一直帮她的印度导师做了很多工作，写
文章什么的。博士生资格答辩的时候，其他的同学紧张的话都说不出来还哭了，最后都
过了，我妹准备充分并且正常发挥，最后竟然让我妹再次挂了，也没有拿到奖学金。后
来，她的印度老师又招了一个印度学生，他们的经费很少，只能供一个学生的奖学金。
为了能毕业，我妹更加努力，完全配合她的印度教授工作并且给他写文章，统计数据。
通过持续不断的努力和坚持，我妹今年终于通过了答辩。现在马上master就毕业了，联
系到了一个博士生导师，通过面试，新导师对我妹也满意，背景和专业都非常的合适。
但是需要我妹现在印度导师的推荐信，刚开始他痛快答应，但却一直拖，不给写。后来
我妹去找他，他说，写，可以，但绝对不会是好的推荐信，如果我妹需要好的推荐信，
去找别人。并且一直在追问，申请的是哪里的学校和专业。
面对这个推荐信，现在很痛苦的纠结，这种情况，不知道版上有没有人遇到过？我妹真
的很努力，除了那门replace的课还有印度老师给的科研分是B，其他都是A. 一年的时
间还做了两篇文章，除了周日我们都没有打电话的时间，平时都是互相留语音邮件知道
每天的生活状况。真不知道我妹这一年是怎么过来的。现在，这个是唯一一个机会了。
我个人感觉这个印度老师对我妹是要断了她在美国的学业！一个刚在美国从事科学研究
的人，怎么可以狠心这样，谁没有当过学生啊！?而且是我妹刚送了圣诞礼物给他之后
，他说这样的话。
我妹从来没和别人说过她印度老师的坏话，也没有在工作和学习期间发生过任何冲突和
顶撞，老师布置什么都努力去完成，最后却遭到这样的打压，她刚来的时候是犯了粗心
大意的错，可也不至于这样啊？现在我妹真的很绝望，能做的都做了，请问大家怎么可
以继续学业啊，没有老师的推荐信怎么办？有什么补救的办法吗？
谢谢大家了！
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M*u
2 楼
如题，谢谢！
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x*y
3 楼
俺都到了才问是不是迟了， 赫赫
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l*e
4 楼
很久没用过台机了！
不知道300块钱能不能diy一台？
就是普通家用，不会玩什么大游戏？
大家有什么建议没？
谢谢啦！
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d*i
5 楼
superfect的protocol还要用PBS洗一遍，发现好多细胞漂起来了，后面再换液一次很多
细胞就被吸走了。
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s*u
6 楼
switch to another University or change a new major?
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i*n
7 楼
延期是延身份，不是延签证，签证是延不了的。
拜托有点基本常识好不好

【在 M******u 的大作中提到】
: 如题，谢谢！
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i*i
8 楼
版上那谁和那谁不都在包子屯么？
快站内信、电话联系啊！

【在 x******y 的大作中提到】
: 俺都到了才问是不是迟了， 赫赫
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r*o
9 楼
看你要求了，一般家用的300刀应该够了

【在 l*****e 的大作中提到】
: 很久没用过台机了！
: 不知道300块钱能不能diy一台？
: 就是普通家用，不会玩什么大游戏？
: 大家有什么建议没？
: 谢谢啦！
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s*y
10 楼
不要用PBS洗。直接转染即可。293细胞特别容易转染。
如果真的需要洗的话，用含Ca, Mg的PBS

【在 d****i 的大作中提到】
: superfect的protocol还要用PBS洗一遍，发现好多细胞漂起来了，后面再换液一次很多
: 细胞就被吸走了。
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F*D
11 楼
找别的上过课的老师呗，mean的人学术圈很多就是，也许绝对数量不是那么大，但足以
毁人不倦了。

【在 h******I 的大作中提到】
: 首先祝大家圣诞快乐。现有一个很棘手的问题向大家求助，是关于我妹妹的事，实在是
: 不知道该怎么办了。
: 1年半前我妹妹是一个学校环境专业的学生（美国排名前50左右），当时是全额奖学金
: 来的，由于之前报的导师名额已满，学校转给了一个新来的印度教授。开学后日常只是
: 上课，还没有太多的接触。期末考试的时候，其中一门课程由于我妹网上交作业的时候
: 交错了一个版本，引用的文献已经列出来了，但是引用的几个句子还没有改，结果被判
: 了个F（引用文献不当），虽然学校也承认不是有意的错误，但是毕竟交的时候版本是
: 有问题的，不过还是给了个重修的机会，可以replace这个成绩。我妹当时立刻去恳求
: 她的印度教授，但他表明这和他没有关系，也帮不上忙，让我妹自己去处理。最后找到
: 任课老师和系主任去认错和恳求，无论如何奖学金最终还是没了。
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j*c
12 楼
这个好像不算常识吧。。。

【在 i*n 的大作中提到】
: 延期是延身份，不是延签证，签证是延不了的。
: 拜托有点基本常识好不好
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t*5
13 楼
小楼去Boston了，开会？
拉几个同事到Chinatown的新金门吃龙虾，顺便去金叶居去K歌，呵呵。
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t*t
14 楼
显然没问题

【在 l*****e 的大作中提到】
: 很久没用过台机了！
: 不知道300块钱能不能diy一台？
: 就是普通家用，不会玩什么大游戏？
: 大家有什么建议没？
: 谢谢啦！
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D*9
15 楼
use Fugene 6
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a*9
16 楼
换个老师写推荐信, 把那个印度教授曝光, 免的别的中国学生掉进狼窝.
我招过几个在美国拿了硕士的中国学生读博, 从来不看他们的推荐信:-)
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k*y
17 楼
No, VISA and status are two different things.

【在 M******u 的大作中提到】
: 如题，谢谢！
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t*5
18 楼
谁啊？对了，知心哥在。可惜不知他是不是回国了，呵呵。可惜，我是离开那里了，早
两年还成，呵呵。

【在 i****i 的大作中提到】
: 版上那谁和那谁不都在包子屯么？
: 快站内信、电话联系啊！
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O*O
19 楼
200就够了

【在 l*****e 的大作中提到】
: 很久没用过台机了！
: 不知道300块钱能不能diy一台？
: 就是普通家用，不会玩什么大游戏？
: 大家有什么建议没？
: 谢谢啦！
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d*i
20 楼
感谢sunnyday！
今天转染293结果非常惨烈，尽管操作很小心，最后细胞还是所剩无几。
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y*c
21 楼
跟新老板说说,看是否可以不要旧老板的推荐信.有时候只要解释合理,用其他老师的推
荐信也是可以的.
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l*y
22 楼
不要去金叶居，又脏又贵，效果还不好，去过一次就再也不想去了。。。。
天天，新金门在哪里啊？我就去过南北风味和喜临门

【在 t*********5 的大作中提到】
: 小楼去Boston了，开会？
: 拉几个同事到Chinatown的新金门吃龙虾，顺便去金叶居去K歌，呵呵。
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l*e
23 楼
那我是不是就找最便宜的deal配就行了？
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m*7
24 楼
Seed 293 cells on ECM coated tissue culture dishes.
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h*I
25 楼
谢谢各位的建议， 我妹今天就要和新的老师解释。实在是没有其他办法可以想。我不
是同专业的，真是一点忙也帮不上。新的老师是不同校的。希望可以顺利通过。
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h*8
26 楼
看见龙虾又流口水ING！！！
如果小楼稀饭，周末看新英格兰爱国者滴橄榄球啊！！附近lexington好像也是个历史
点，意义有点像那个江西南昌滴说。。。

【在 t*********5 的大作中提到】
: 小楼去Boston了，开会？
: 拉几个同事到Chinatown的新金门吃龙虾，顺便去金叶居去K歌，呵呵。
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g*n
27 楼
配个14寸显示器？

【在 t**t 的大作中提到】
: 显然没问题
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a*d
28 楼
293 cells are easily detached from the dish. I normally didn't wash 293
cells if using superfect or Fugene6. Sometimes I used Ca2+ Phosphatase
method and had to wash the cells with PBS, I washed the cells very gently
and quickly.Try not to leave the cells without liquid for too long and add/
remove the PBS very gently. Coating the dish with Gelatin can prevent cell
detaching too.
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h*I
29 楼
这样做很开明。如果不是特殊的理由，谁也不会轻易换导师的啊！

【在 a***9 的大作中提到】
: 换个老师写推荐信, 把那个印度教授曝光, 免的别的中国学生掉进狼窝.
: 我招过几个在美国拿了硕士的中国学生读博, 从来不看他们的推荐信:-)
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x*y
30 楼
刚在chiantown吃完龙虾阿,忘了啥名字的海鲜馆了。 嘿嘿， 挺好吃的
avatar
z*i
31 楼
不要显示器的话可以配个性能还不错的主机
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d*i
32 楼
谢谢大家！回复迟了！学习了！
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d*a
33 楼
我对楼主说的情况表示同情，不过我也得说，国人在国内的一些习惯，
带到美国来是可能会吃大亏的。
“交错了一个版本，引用的文献已经列出来了，但是引用的几个句子
还没有改，结果被判了个F（引用文献不当）”：实际上，一开始就
不应该cut and paste。
刚过去的这个学期，我的一个本科生班上有17-18名中国学生，出现
的情况确实比较多。有次作业，一次抓到五个一组的抄袭。我严肃
地给他们警告，但不知能起多少作用。
还有一个更严重的，但不一是中国学生做的。我教的是大课，期中
考试分两个时间考，结果有学生报告，看到一个参加第一次考试的
亚洲学生，带出了一份考卷，交给了另一个学生。事先我已经反复
强调，绝不能做这样的事情。如果被抓到了，恐怕就直接开除了。
这种“我为什么不能做”的态度，终究是要吃大亏的。
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t*5
34 楼
唱K的地方只有这里还方便点，另一个在Quincy，比较远。
新金门在南北风味同侧的右边，紧挨着小肥羊，靠近牌坊。
南北风味当初是俺们家食堂，特别是我住RI，在Boston上班那一年，经常买了外卖然后
坐火车回家去吃，呵呵。现在啥也吃不着了。。。
想念龙虾和肥仔的烤鸭啊。。。哭。。。

【在 l****y 的大作中提到】
: 不要去金叶居，又脏又贵，效果还不好，去过一次就再也不想去了。。。。
: 天天，新金门在哪里啊？我就去过南北风味和喜临门
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M*G
35 楼
300块可以自己DIY，不用钱都可以
avatar
a*v
36 楼
the easiest (cheapest) way is coating plates with gelatine
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h*I
37 楼
我也感觉这个印度老板每一次都想让别人前途尽毁。

【在 F**D 的大作中提到】
: 找别的上过课的老师呗，mean的人学术圈很多就是，也许绝对数量不是那么大，但足以
: 毁人不倦了。
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t*5
38 楼
小楼还可以去海之味去吃吃台湾小吃，那里的招牌排骨饭是我的最爱，味美量足还便宜
，不到6刀一大盘，还跟汤。。。
哎呀，不行了，越说我越馋了。。。

【在 x******y 的大作中提到】
: 刚在chiantown吃完龙虾阿,忘了啥名字的海鲜馆了。 嘿嘿， 挺好吃的
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l*e
39 楼
强烈想知道不用钱的方法

【在 M********G 的大作中提到】
: 300块可以自己DIY，不用钱都可以
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z*y
40 楼
Does gelatine or poly-lysine affect the normal functions/properties of cells
?
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h*I
41 楼
说的很对，我也提醒我妹要小心，认真。可她还是犯了这个错误，很深刻的教训。国内
没有这方面的训练。不过她以后再也没出过类似的错误，还处处提醒别人交作业的时候
仔细检查。

【在 d***a 的大作中提到】
: 我对楼主说的情况表示同情，不过我也得说，国人在国内的一些习惯，
: 带到美国来是可能会吃大亏的。
: “交错了一个版本，引用的文献已经列出来了，但是引用的几个句子
: 还没有改，结果被判了个F（引用文献不当）”：实际上，一开始就
: 不应该cut and paste。
: 刚过去的这个学期，我的一个本科生班上有17-18名中国学生，出现
: 的情况确实比较多。有次作业，一次抓到五个一组的抄袭。我严肃
: 地给他们警告，但不知能起多少作用。
: 还有一个更严重的，但不一是中国学生做的。我教的是大课，期中
: 考试分两个时间考，结果有学生报告，看到一个参加第一次考试的
avatar
l*y
42 楼
呵呵，我也喜欢南北风味的菜

【在 t*********5 的大作中提到】
: 唱K的地方只有这里还方便点，另一个在Quincy，比较远。
: 新金门在南北风味同侧的右边，紧挨着小肥羊，靠近牌坊。
: 南北风味当初是俺们家食堂，特别是我住RI，在Boston上班那一年，经常买了外卖然后
: 坐火车回家去吃，呵呵。现在啥也吃不着了。。。
: 想念龙虾和肥仔的烤鸭啊。。。哭。。。
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S*w
43 楼
捡

【在 l*****e 的大作中提到】
: 强烈想知道不用钱的方法
avatar
a*g
44 楼
I'm sure 10% FBS and plastic dish affect the normal function/properties of c
ells....
Just teasing....

cells

【在 z*y 的大作中提到】
: Does gelatine or poly-lysine affect the normal functions/properties of cells
: ?
avatar
z*i
45 楼
我招了一个联合培养的学生，还没过来。研究计划中有一段明显看着不像他写的。
google一下很快就找到出处了。我告诉他这一段一定要重写，而且给出出处。这些事情
从一开始就抓起来，几次下来就知道该怎么做了。

【在 h******I 的大作中提到】
: 说的很对，我也提醒我妹要小心，认真。可她还是犯了这个错误，很深刻的教训。国内
: 没有这方面的训练。不过她以后再也没出过类似的错误，还处处提醒别人交作业的时候
: 仔细检查。
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i*i
46 楼
嗯哪，还有飞人也在。附近应该还有不少人，比如百合，哈哈。。。

【在 t*********5 的大作中提到】
: 谁啊？对了，知心哥在。可惜不知他是不是回国了，呵呵。可惜，我是离开那里了，早
: 两年还成，呵呵。
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n*d
47 楼
建议你去dell outlet看看，如果有10%或者15%off的话就更好了。不过现在好像没有。
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w*r
48 楼
all kinds of artificial crap

c

【在 a*****g 的大作中提到】
: I'm sure 10% FBS and plastic dish affect the normal function/properties of c
: ells....
: Just teasing....
:
: cells
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h*I
49 楼
给文献出处了，就是交了几个句子还没改的版本。现在已经重修过了。其他课都是a.一
年还做了两篇文章。
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x*y
50 楼
天天在哪个广阔的田地里逍遥？

【在 t*********5 的大作中提到】
: 小楼还可以去海之味去吃吃台湾小吃，那里的招牌排骨饭是我的最爱，味美量足还便宜
: ，不到6刀一大盘，还跟汤。。。
: 哎呀，不行了，越说我越馋了。。。
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s*8
51 楼
确实200刀就行了。我老家的赛扬，我妈妈说用着很好很快。
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a*g
52 楼
the harding thing is experimenting with several artificial crap and convinci
ng oneself it not the plastic causing this...

【在 w*****r 的大作中提到】
: all kinds of artificial crap
:
: c
avatar
h*I
53 楼
希望我妹能有机会继续学业。
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l*y
54 楼
没在，在周边。。。。要在波士顿我还说小地方么，还是表问哪里来的了。。。
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M*G
55 楼
I 服了 U

【在 l*****e 的大作中提到】
: 强烈想知道不用钱的方法
avatar
c*e
56 楼
use glycine-coated plate.
when wash cells or change medium, be super gentle.

【在 d****i 的大作中提到】
: superfect的protocol还要用PBS洗一遍，发现好多细胞漂起来了，后面再换液一次很多
: 细胞就被吸走了。
avatar
V*l
57 楼
Bless, 找个nice的教课老师帮着写吧
avatar
t*5
58 楼
哈哈，俺现在在你家隔壁，只是你不知道而已，嘿嘿。

【在 x******y 的大作中提到】
: 天天在哪个广阔的田地里逍遥？
avatar
t*8
59 楼
for 293, fugene6 is better.
avatar
d*a
60 楼
就象前面建议的，找别人写推荐信吧。没有导师的推荐信有一些影响，
但在美国也不少见。

【在 h******I 的大作中提到】
: 希望我妹能有机会继续学业。
avatar
h*8
61 楼
莫怕，单说无妨。。。出不了事，嘿嘿。。。

【在 l****y 的大作中提到】
: 没在，在周边。。。。要在波士顿我还说小地方么，还是表问哪里来的了。。。
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z*a
62 楼
anybody using Polyethylenimine, such as jetPEI?
avatar
B*G
63 楼
你妹有美国硕士还有两篇文章，干嘛不转校去个前十的？还留在原来系的话，印度老师
会一直对她有影响力。

【在 h******I 的大作中提到】
: 首先祝大家圣诞快乐。现有一个很棘手的问题向大家求助，是关于我妹妹的事，实在是
: 不知道该怎么办了。
: 1年半前我妹妹是一个学校环境专业的学生（美国排名前50左右），当时是全额奖学金
: 来的，由于之前报的导师名额已满，学校转给了一个新来的印度教授。开学后日常只是
: 上课，还没有太多的接触。期末考试的时候，其中一门课程由于我妹网上交作业的时候
: 交错了一个版本，引用的文献已经列出来了，但是引用的几个句子还没有改，结果被判
: 了个F（引用文献不当），虽然学校也承认不是有意的错误，但是毕竟交的时候版本是
: 有问题的，不过还是给了个重修的机会，可以replace这个成绩。我妹当时立刻去恳求
: 她的印度教授，但他表明这和他没有关系，也帮不上忙，让我妹自己去处理。最后找到
: 任课老师和系主任去认错和恳求，无论如何奖学金最终还是没了。
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z*n
64 楼
你们怎回贴都这么神速呀! 刚删了想重来，你早回了，呵呵。
俺想说，推荐一个K歌的好去处，经常去BOSTON。上个月出差只是在Pearl Restaurant
吃了顿美餐，公司15个人花了近500刀。

【在 l****y 的大作中提到】
: 没在，在周边。。。。要在波士顿我还说小地方么，还是表问哪里来的了。。。
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h*I
65 楼
Not the same university. She found another Prof in a different university.
avatar
l*y
66 楼
刚刚用起了ctem，比web快了很多，呵呵。
我不知道啊，只去过一次金叶居，不怎么去boston的，我很宅的。。。。

Restaurant

【在 z******n 的大作中提到】
: 你们怎回贴都这么神速呀! 刚删了想重来，你早回了，呵呵。
: 俺想说，推荐一个K歌的好去处，经常去BOSTON。上个月出差只是在Pearl Restaurant
: 吃了顿美餐，公司15个人花了近500刀。
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h*I
67 楼
谢谢各位！我妹刚和新导师谈过了，遇到了一个非常好心和通情达理的中国导师。非常
理解我妹的境遇。其实在国外帮中国人的还是中国人。祝所有海外的中国人圣诞快乐。
再次感谢各位。
恶梦醒了，天亮了...
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j*t
68 楼
我也喜欢

【在 t*********5 的大作中提到】
: 小楼还可以去海之味去吃吃台湾小吃，那里的招牌排骨饭是我的最爱，味美量足还便宜
: ，不到6刀一大盘，还跟汤。。。
: 哎呀，不行了，越说我越馋了。。。
avatar
b*t
69 楼
gx

【在 h******I 的大作中提到】
: 谢谢各位！我妹刚和新导师谈过了，遇到了一个非常好心和通情达理的中国导师。非常
: 理解我妹的境遇。其实在国外帮中国人的还是中国人。祝所有海外的中国人圣诞快乐。
: 再次感谢各位。
: 恶梦醒了，天亮了...
avatar
j*t
70 楼
以前大概在south station火车站见过天天偶像, 赫赫

【在 t*********5 的大作中提到】
: 唱K的地方只有这里还方便点，另一个在Quincy，比较远。
: 新金门在南北风味同侧的右边，紧挨着小肥羊，靠近牌坊。
: 南北风味当初是俺们家食堂，特别是我住RI，在Boston上班那一年，经常买了外卖然后
: 坐火车回家去吃，呵呵。现在啥也吃不着了。。。
: 想念龙虾和肥仔的烤鸭啊。。。哭。。。
avatar
F*D
71 楼
master+2paper能保证top10吗

【在 B*G 的大作中提到】
: 你妹有美国硕士还有两篇文章，干嘛不转校去个前十的？还留在原来系的话，印度老师
: 会一直对她有影响力。
avatar
x*y
72 楼
俺来猜， c市

【在 t*********5 的大作中提到】
: 哈哈，俺现在在你家隔壁，只是你不知道而已，嘿嘿。
avatar
F*D
73 楼
你说对了，中国老师里面，其实极品的比例没那么多。很多会很push，然后沟通方式会
有问题，但是如果你情商高点，还是好沟通得多。 我的观点，要么白人，要么老中，其
他的不了解还真不好说，阿三是肯定向着阿三的。

【在 h******I 的大作中提到】
: 谢谢各位！我妹刚和新导师谈过了，遇到了一个非常好心和通情达理的中国导师。非常
: 理解我妹的境遇。其实在国外帮中国人的还是中国人。祝所有海外的中国人圣诞快乐。
: 再次感谢各位。
: 恶梦醒了，天亮了...
avatar
d*a
74 楼
过了一坎，Bless!

【在 h******I 的大作中提到】
: 谢谢各位！我妹刚和新导师谈过了，遇到了一个非常好心和通情达理的中国导师。非常
: 理解我妹的境遇。其实在国外帮中国人的还是中国人。祝所有海外的中国人圣诞快乐。
: 再次感谢各位。
: 恶梦醒了，天亮了...
avatar
h*I
75 楼
再次感谢大家的关心和祝福。
祝大家以后都远离mean的人，顺利健康！！
avatar
B*i
76 楼
新导师说不定也是混这个版的，楼主你成功了。哈哈哈哈哈哈
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