j*q
2 楼
plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
全溶解。有什么好的办法吗？
全溶解。有什么好的办法吗？
c*o
3 楼
sf
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
w*e
4 楼
did u speed vac? completely dry pellets are hard to dissolve. did you get
very high conc. in your solution? (>1ug/ul)
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
very high conc. in your solution? (>1ug/ul)
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
Q*Q
5 楼
大秋秋 咱们一起调戏版主吧
【在 c**o 的大作中提到】
: sf
【在 c**o 的大作中提到】
: sf
j*q
6 楼
vac is vacume?
i washed the pellet with 70% EtOH and dry in air 5 min, so it is not too dry.
then dissovle the pellet in water. i think i put enough water. the
concentration will not be higher than 200ug/ml.but a samll damn pellet is
still floating in the water even after 37 degree overnight.
any one has better ideas?
i washed the pellet with 70% EtOH and dry in air 5 min, so it is not too dry.
then dissovle the pellet in water. i think i put enough water. the
concentration will not be higher than 200ug/ml.but a samll damn pellet is
still floating in the water even after 37 degree overnight.
any one has better ideas?
c*o
7 楼
我怕他认真 :D
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 大秋秋 咱们一起调戏版主吧
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 大秋秋 咱们一起调戏版主吧
i*t
8 楼
do not use water, pH is lower than 7. use 50mM tris buffer ph8.0.
c*e
9 楼
很有意境。我也想借点青春玩玩。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
i*t
10 楼
do not use water, pH is lower than 7. use 50mM tris buffer ph8.0.
c*e
11 楼
版主介网了，急死他。
【在 c**o 的大作中提到】
: 我怕他认真 :D
【在 c**o 的大作中提到】
: 我怕他认真 :D
t*p
12 楼
我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
不知道有谁有好办法。
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
不知道有谁有好办法。
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
c*e
13 楼
一起上!
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 大秋秋 咱们一起调戏版主吧
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 大秋秋 咱们一起调戏版主吧
p*i
14 楼
以前用過QIAGEN的 HiSpeed Plasmid Maxi Kit，比MAXI貴一些
最後一步再過一個柱子，叫 QIAprecipitator，跳過了PELLET那一步
結果還不錯；
只不過由於最後需要把DNA從QIAprecipitator濾出來，終體積可能有點大——終濃度可
能比平時低一些。
土翁大俠不妨試試？
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
最後一步再過一個柱子，叫 QIAprecipitator，跳過了PELLET那一步
結果還不錯；
只不過由於最後需要把DNA從QIAprecipitator濾出來，終體積可能有點大——終濃度可
能比平時低一些。
土翁大俠不妨試試？
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
Q*Q
15 楼
莫怕~~
调戏完了咱们就跑路
【在 c**o 的大作中提到】
: 我怕他认真 :D
调戏完了咱们就跑路
【在 c**o 的大作中提到】
: 我怕他认真 :D
c*r
16 楼
我一般是4度overnight，都没有问题。
实在不行还有个办法，95度，3分钟。。。不过我没试过，不知道行不行？反正DNA不怕
加热一下。RNA我知道的溶解办法是62度（？好像）overnight，因为RNase在这个温度
下失去活性。再高我就不知道了。
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
实在不行还有个办法，95度，3分钟。。。不过我没试过，不知道行不行？反正DNA不怕
加热一下。RNA我知道的溶解办法是62度（？好像）overnight，因为RNase在这个温度
下失去活性。再高我就不知道了。
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
Q*Q
17 楼
…………快点还我师傅
【在 c********e 的大作中提到】
: 很有意境。我也想借点青春玩玩。
【在 c********e 的大作中提到】
: 很有意境。我也想借点青春玩玩。
k*o
18 楼
离心完倒的时候尽量倒干净.
稍微大点的DNA你只要vac一会儿就可以了,不要让它completely dry,反正你用的是70%
Ethanol,里面最先出来的都是ethanol,留下的那点儿都是纯水(如果你做70%Ethanol用
的是ddH2O的话).
基本所有对大DNA提取的protocol都是说不要蒸干.不过才16kb的话干了也无所谓,加水
静置overnight自己就融了,不行枪吹打两下就OK了.要是不溶的话就是你DNA提的不纯，
16kbDNA提出来应该很透明，一砣一砣的那些基本是蛋白。
为了看里面酒精是否全部蒸干,可以用直接鼻子上去闻,你可以闻出来有没有酒精的.
稍微大点的DNA你只要vac一会儿就可以了,不要让它completely dry,反正你用的是70%
Ethanol,里面最先出来的都是ethanol,留下的那点儿都是纯水(如果你做70%Ethanol用
的是ddH2O的话).
基本所有对大DNA提取的protocol都是说不要蒸干.不过才16kb的话干了也无所谓,加水
静置overnight自己就融了,不行枪吹打两下就OK了.要是不溶的话就是你DNA提的不纯，
16kbDNA提出来应该很透明，一砣一砣的那些基本是蛋白。
为了看里面酒精是否全部蒸干,可以用直接鼻子上去闻,你可以闻出来有没有酒精的.
c*e
19 楼
你戒网以前写好哈
【在 Q*Q 的大作中提到】
: …………快点还我师傅
【在 Q*Q 的大作中提到】
: …………快点还我师傅
t*p
20 楼
不溶的话怎么整都不行。95度难道不会导致DNA变性？下面还怎么做酶切啥的？
【在 c******r 的大作中提到】
: 我一般是4度overnight，都没有问题。
: 实在不行还有个办法，95度，3分钟。。。不过我没试过，不知道行不行？反正DNA不怕
: 加热一下。RNA我知道的溶解办法是62度（？好像）overnight，因为RNase在这个温度
: 下失去活性。再高我就不知道了。
【在 c******r 的大作中提到】
: 我一般是4度overnight，都没有问题。
: 实在不行还有个办法，95度，3分钟。。。不过我没试过，不知道行不行？反正DNA不怕
: 加热一下。RNA我知道的溶解办法是62度（？好像）overnight，因为RNase在这个温度
: 下失去活性。再高我就不知道了。
c*e
21 楼
一周过去了
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
c*r
22 楼
。。。DNA变性？DNA变性又不影响酶切，也不影响PCR，只要不断就可以啊。反正一降
温不就重新anneal了吗？如果担心可以慢慢降温啊，比如放60度10分钟。不要95度然后
直接放冰上，那个会影响DNA的annealing。
不过加热好不好使我真的没直接试验过
【在 t****p 的大作中提到】
: 不溶的话怎么整都不行。95度难道不会导致DNA变性？下面还怎么做酶切啥的？
温不就重新anneal了吗？如果担心可以慢慢降温啊，比如放60度10分钟。不要95度然后
直接放冰上，那个会影响DNA的annealing。
不过加热好不好使我真的没直接试验过
【在 t****p 的大作中提到】
: 不溶的话怎么整都不行。95度难道不会导致DNA变性？下面还怎么做酶切啥的？
Q*Q
23 楼
装作没有看见路过
【在 c********e 的大作中提到】
: 一周过去了
【在 c********e 的大作中提到】
: 一周过去了
t*y
24 楼
室温沉淀还是-20度沉淀？
我有一次-80度沉淀，最后DNA怎么也不能溶解了。
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
我有一次-80度沉淀，最后DNA怎么也不能溶解了。
【在 t****p 的大作中提到】
: 我用qiagen的中抽大抽，用isopropanol沉淀，ethanol wash后，用vacuun吸上清后立
: 即用水溶解（TE溶解也一样），稍微干燥一点都没法溶解（这个ethanol肯定没有完全
: 去掉）。跟质粒是不是很大没有关系。
: 不知道有谁有好办法。
c*o
25 楼
突然发现这整个贴就是一行为艺术
青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
有过来人提醒，还一副不鸟的样子
牛啊小邱～
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 装作没有看见路过
青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
有过来人提醒，还一副不鸟的样子
牛啊小邱～
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 装作没有看见路过
t*p
26 楼
-20
【在 t******y 的大作中提到】
: 室温沉淀还是-20度沉淀？
: 我有一次-80度沉淀，最后DNA怎么也不能溶解了。
【在 t******y 的大作中提到】
: 室温沉淀还是-20度沉淀？
: 我有一次-80度沉淀，最后DNA怎么也不能溶解了。
M*g
27 楼
你牛
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
t*p
28 楼
质粒这么大的DNA可以做到完全无错误复性吗？内切酶可以切单链DNA吗?
【在 c******r 的大作中提到】
: 。。。DNA变性？DNA变性又不影响酶切，也不影响PCR，只要不断就可以啊。反正一降
: 温不就重新anneal了吗？如果担心可以慢慢降温啊，比如放60度10分钟。不要95度然后
: 直接放冰上，那个会影响DNA的annealing。
: 不过加热好不好使我真的没直接试验过
【在 c******r 的大作中提到】
: 。。。DNA变性？DNA变性又不影响酶切，也不影响PCR，只要不断就可以啊。反正一降
: 温不就重新anneal了吗？如果担心可以慢慢降温啊，比如放60度10分钟。不要95度然后
: 直接放冰上，那个会影响DNA的annealing。
: 不过加热好不好使我真的没直接试验过
Q*Q
29 楼
叫qiu的人都是我的知己~！！！
继续晃悠悠路过
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
继续晃悠悠路过
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
c*r
30 楼
多数内切酶切不了单链DNA，好像有个别的可以，具体不记得了，要查一下。
anneal我觉得应该没问题吧？你说呢？我没试过
【在 t****p 的大作中提到】
: 质粒这么大的DNA可以做到完全无错误复性吗？内切酶可以切单链DNA吗?
anneal我觉得应该没问题吧？你说呢？我没试过
【在 t****p 的大作中提到】
: 质粒这么大的DNA可以做到完全无错误复性吗？内切酶可以切单链DNA吗?
c*e
31 楼
买买提挥霍的青春？
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
P*m
32 楼
isopropanol回收时离心是室温还是4度，要是不小心4度离心的话基本上很难溶。
c*e
33 楼
。。。。。。。。。大秋付我版权费。明明我先领悟的。
【在 c********e 的大作中提到】
: 很有意境。我也想借点青春玩玩。
【在 c********e 的大作中提到】
: 很有意境。我也想借点青春玩玩。
t*y
34 楼
我一般室温沉淀，4度离心，最后的pullet很干也能够溶解到水里。
c*e
35 楼
我的青春假装没有看见我，一晃而过了。
---小邱
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
---小邱
【在 c**o 的大作中提到】
: 突然发现这整个贴就是一行为艺术
: 青春就是欠帐么，把不该挥霍的先挥霍了
: 有过来人提醒，还一副不鸟的样子
: 牛啊小邱～
l*s
36 楼
Protein coprecipitation?
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
c*o
37 楼
我把小邱的青春分给你
一点
【在 c********e 的大作中提到】
: 。。。。。。。。。大秋付我版权费。明明我先领悟的。
一点
【在 c********e 的大作中提到】
: 。。。。。。。。。大秋付我版权费。明明我先领悟的。
m*z
38 楼
genomic DNA太干也不好溶，可能要溶overnight，不过你16kb，不算大。
估计是蛋白没除尽共沉淀了。
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
估计是蛋白没除尽共沉淀了。
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
c*e
39 楼
算了，我一身青春，竟然一点都再也放不下了。
【在 c**o 的大作中提到】
: 我把小邱的青春分给你
: 一点
【在 c**o 的大作中提到】
: 我把小邱的青春分给你
: 一点
n*k
40 楼
time to make up some molecular biology:)))...were u biology major in college
?
【在 t****p 的大作中提到】
: 质粒这么大的DNA可以做到完全无错误复性吗？内切酶可以切单链DNA吗?
?
【在 t****p 的大作中提到】
: 质粒这么大的DNA可以做到完全无错误复性吗？内切酶可以切单链DNA吗?
Q*Q
41 楼
究竟
是青春遗弃了我
还是我废弃了她
【在 c********e 的大作中提到】
: 算了，我一身青春，竟然一点都再也放不下了。
是青春遗弃了我
还是我废弃了她
【在 c********e 的大作中提到】
: 算了，我一身青春，竟然一点都再也放不下了。
n*k
42 楼
very likely proteins...I overdry my RNA/DNA all the times as I don't like
any trace of ethanol, rarely have any
problems with non-genome DNA or small amount genome DNA/RNA...BTW, pure DNA/
RNA is transparent,
hard to see...if white/color stuff being seen, it is non-purity(Salt, and/or
proteins etc)...
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
any trace of ethanol, rarely have any
problems with non-genome DNA or small amount genome DNA/RNA...BTW, pure DNA/
RNA is transparent,
hard to see...if white/color stuff being seen, it is non-purity(Salt, and/or
proteins etc)...
【在 j*****q 的大作中提到】
: plasmid很大，16kb， linearize以后用isopropanol回收，沉淀的DNA用水老是不能完
: 全溶解。有什么好的办法吗？
m*y
43 楼
你居然一直都在！！
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 究竟
: 是青春遗弃了我
: 还是我废弃了她
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 究竟
: 是青春遗弃了我
: 还是我废弃了她
j*q
44 楼
dna是maxi kit纯化出来的。
定了个qiagen的kit，纯化大片段的，看看能回收多少dna
定了个qiagen的kit，纯化大片段的，看看能回收多少dna
Q*Q
45 楼
没有啊 刚好路过 打酱油走人
【在 m**y 的大作中提到】
: 你居然一直都在！！
【在 m**y 的大作中提到】
: 你居然一直都在！！
c*e
46 楼
说神马呢。。你不就是青春嘛？日游市井，泼皮的青春啊。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 没有啊 刚好路过 打酱油走人
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 没有啊 刚好路过 打酱油走人
Q*Q
47 楼
那就是废弃了青春
不甘心的心情低落ing
【在 c********e 的大作中提到】
: 说神马呢。。你不就是青春嘛？日游市井，泼皮的青春啊。
不甘心的心情低落ing
【在 c********e 的大作中提到】
: 说神马呢。。你不就是青春嘛？日游市井，泼皮的青春啊。
c*e
48 楼
三月芳菲
人间最美却是四月天
我踮起脚尖张望我的青春
也许
是时候把她掏出重新穿上
再照一照镜子
那就是我废弃了的青春？
不甘心的心情低落ing
(以下省略1k字，未完待续，哈哈哈)
——邱邱
人间最美却是四月天
我踮起脚尖张望我的青春
也许
是时候把她掏出重新穿上
再照一照镜子
那就是我废弃了的青春？
不甘心的心情低落ing
(以下省略1k字，未完待续，哈哈哈)
——邱邱
M*g
49 楼
not a qiustyle
【在 c********e 的大作中提到】
: 三月芳菲
: 人间最美却是四月天
: 我踮起脚尖张望我的青春
: 也许
: 是时候把她掏出重新穿上
: 再照一照镜子
: 那就是我废弃了的青春？
: 不甘心的心情低落ing
: (以下省略1k字，未完待续，哈哈哈)
: ——邱邱
【在 c********e 的大作中提到】
: 三月芳菲
: 人间最美却是四月天
: 我踮起脚尖张望我的青春
: 也许
: 是时候把她掏出重新穿上
: 再照一照镜子
: 那就是我废弃了的青春？
: 不甘心的心情低落ing
: (以下省略1k字，未完待续，哈哈哈)
: ——邱邱
c*e
50 楼
踮起脚尖张望 这样的，应该就她和小馅儿能写出来吧。挺青春的。
【在 M****g 的大作中提到】
: not a qiustyle
【在 M****g 的大作中提到】
: not a qiustyle
Q*Q
51 楼
……！！
前一截是我写的
后一节肯定是我那臭师傅接的
【在 c********e 的大作中提到】
: 踮起脚尖张望 这样的，应该就她和小馅儿能写出来吧。挺青春的。
前一截是我写的
后一节肯定是我那臭师傅接的
【在 c********e 的大作中提到】
: 踮起脚尖张望 这样的，应该就她和小馅儿能写出来吧。挺青春的。
c*e
52 楼
三月芳菲
人间最美却是四月天
我踮起脚尖张望我的青春
也许
是时候把她掏出重新穿上
再照一照镜子
那就是我废弃了的青春？
不甘心的心情低落ing
.............要残忍才能对得起青春
人间最美却是四月天
我踮起脚尖张望我的青春
也许
是时候把她掏出重新穿上
再照一照镜子
那就是我废弃了的青春？
不甘心的心情低落ing
.............要残忍才能对得起青春
Q*Q
53 楼
可怜的师傅
【在 c********e 的大作中提到】
: 三月芳菲
: 人间最美却是四月天
: 我踮起脚尖张望我的青春
: 也许
: 是时候把她掏出重新穿上
: 再照一照镜子
: 那就是我废弃了的青春？
: 不甘心的心情低落ing
: .............要残忍才能对得起青春
【在 c********e 的大作中提到】
: 三月芳菲
: 人间最美却是四月天
: 我踮起脚尖张望我的青春
: 也许
: 是时候把她掏出重新穿上
: 再照一照镜子
: 那就是我废弃了的青春？
: 不甘心的心情低落ing
: .............要残忍才能对得起青春
Q*Q
54 楼
(一）
青春，我亲爱的偏执狂
青春就像夏天
从指间掠过
稍纵即逝却永驻心头
我一直不明白
我的青春到底怎么就过去了
既没有青春的狂躁症
也没有青春的叛逆期
既没有青春的自我陶醉
也没有青春的孤独无助
我的青春
安静得窘迫
温暖得要睡着
像夏日的练习曲
温柔却又偏执
永远跟自己过不去
对着月亮坚定不移
对着骄阳却开始彷徨
拂晓的时候满心欢喜
夕落的时候却又悲伤满怀
总有些措手不及的情绪
犹如午后突如其来的倾盆大雨透彻而狼狈
青春是蒲公英对风的情话
是青蛙在水草间的放歌
是那勇敢的毛毛虫
不甘寂寞的爬上若即若离的柳枝
青春就是夏日里的白茉莉
若无其事的盛开
然而
青春还有另外一个名字 叫徒劳
青蛙渐渐沉默
蒲公英也消逝在风里
只剩了四季弯弯曲曲长长慢慢的落寞
究竟是青春遗弃了我
还是我废弃了她
浑身是刺满身是光的青春
就这么从指间溜走了
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
青春，我亲爱的偏执狂
青春就像夏天
从指间掠过
稍纵即逝却永驻心头
我一直不明白
我的青春到底怎么就过去了
既没有青春的狂躁症
也没有青春的叛逆期
既没有青春的自我陶醉
也没有青春的孤独无助
我的青春
安静得窘迫
温暖得要睡着
像夏日的练习曲
温柔却又偏执
永远跟自己过不去
对着月亮坚定不移
对着骄阳却开始彷徨
拂晓的时候满心欢喜
夕落的时候却又悲伤满怀
总有些措手不及的情绪
犹如午后突如其来的倾盆大雨透彻而狼狈
青春是蒲公英对风的情话
是青蛙在水草间的放歌
是那勇敢的毛毛虫
不甘寂寞的爬上若即若离的柳枝
青春就是夏日里的白茉莉
若无其事的盛开
然而
青春还有另外一个名字 叫徒劳
青蛙渐渐沉默
蒲公英也消逝在风里
只剩了四季弯弯曲曲长长慢慢的落寞
究竟是青春遗弃了我
还是我废弃了她
浑身是刺满身是光的青春
就这么从指间溜走了
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 先记账欠着 哈哈
c*e
55 楼
呱--呱--呱--
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
M*g
56 楼
不错，邱邱的文字比灌水功夫强
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
c*e
57 楼
yes, sUper...is she xxy?
【在 M****g 的大作中提到】
: 不错，邱邱的文字比灌水功夫强
【在 M****g 的大作中提到】
: 不错，邱邱的文字比灌水功夫强
M*g
58 楼
不认识xxy
【在 c********e 的大作中提到】
: yes, sUper...is she xxy?
【在 c********e 的大作中提到】
: yes, sUper...is she xxy?
c*e
59 楼
反正邱邱是才女，特别配码工或者源古。
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
c*e
60 楼
不过这篇有点伤感，所以少了她特有的调皮气息。都怪dreamer非礼她的那个变态，弄得
她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
c*e
61 楼
你的青春干吗了
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
【在 M****g 的大作中提到】
: 不认识xxy
M*g
62 楼
好像她以前说过喜欢有点文青的理工男
【在 c********e 的大作中提到】
: 反正邱邱是才女，特别配码工或者源古。
【在 c********e 的大作中提到】
: 反正邱邱是才女，特别配码工或者源古。
M*g
63 楼
安静下来才是最真实的吧
弄得
【在 c********e 的大作中提到】
: 不过这篇有点伤感，所以少了她特有的调皮气息。都怪dreamer非礼她的那个变态，弄得
: 她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
弄得
【在 c********e 的大作中提到】
: 不过这篇有点伤感，所以少了她特有的调皮气息。都怪dreamer非礼她的那个变态，弄得
: 她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
m*y
64 楼
哇噻，好文！
邱邱是最棒的
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
邱邱是最棒的
【在 Q*Q 的大作中提到】
: (一）
: 青春，我亲爱的偏执狂
: 青春就像夏天
: 从指间掠过
: 稍纵即逝却永驻心头
: 我一直不明白
: 我的青春到底怎么就过去了
: 既没有青春的狂躁症
: 也没有青春的叛逆期
: 既没有青春的自我陶醉
Q*Q
65 楼
呱呱呱 师傅变青蛙
【在 c********e 的大作中提到】
: 呱--呱--呱--
【在 c********e 的大作中提到】
: 呱--呱--呱--
Q*Q
66 楼
胡说 我灌水招小妹纸 这多大的能耐
【在 M****g 的大作中提到】
: 不错，邱邱的文字比灌水功夫强
【在 M****g 的大作中提到】
: 不错，邱邱的文字比灌水功夫强
Q*Q
67 楼
……！！！
一百遍 yuangu配三姑娘
【在 c********e 的大作中提到】
: 反正邱邱是才女，特别配码工或者源古。
一百遍 yuangu配三姑娘
【在 c********e 的大作中提到】
: 反正邱邱是才女，特别配码工或者源古。
Q*Q
68 楼
是
把我气坏了
弄得
【在 c********e 的大作中提到】
: 不过这篇有点伤感，所以少了她特有的调皮气息。都怪dreamer非礼她的那个变态，弄得
: 她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
把我气坏了
弄得
【在 c********e 的大作中提到】
: 不过这篇有点伤感，所以少了她特有的调皮气息。都怪dreamer非礼她的那个变态，弄得
: 她说再也不去dreamer了。你可能没看见。
Q*Q
69 楼
M哥你记错了 是闷骚的理工男
【在 M****g 的大作中提到】
: 好像她以前说过喜欢有点文青的理工男
【在 M****g 的大作中提到】
: 好像她以前说过喜欢有点文青的理工男
Q*Q
70 楼
啵一个
走人
配合神和某师绝交
【在 m**y 的大作中提到】
: 哇噻，好文！
: 邱邱是最棒的
走人
配合神和某师绝交
【在 m**y 的大作中提到】
: 哇噻，好文！
: 邱邱是最棒的
c*e
71 楼
都是真实的。double sides
【在 M****g 的大作中提到】
: 安静下来才是最真实的吧
:
: 弄得
【在 M****g 的大作中提到】
: 安静下来才是最真实的吧
:
: 弄得
c*e
72 楼
好吧，看来你的眼里只有码工。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 啵一个
: 走人
: 配合神和某师绝交
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 啵一个
: 走人
: 配合神和某师绝交
c*e
73 楼
要是神，估计她很得意。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 啵一个
: 走人
: 配合神和某师绝交
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 啵一个
: 走人
: 配合神和某师绝交
Q*Q
74 楼
我居然看过The Double Life of Veronique
蛮好看的
【在 c********e 的大作中提到】
: 都是真实的。double sides
蛮好看的
【在 c********e 的大作中提到】
: 都是真实的。double sides
Q*Q
75 楼
我专一也有错么
【在 c********e 的大作中提到】
: 好吧，看来你的眼里只有码工。
【在 c********e 的大作中提到】
: 好吧，看来你的眼里只有码工。
c*o
76 楼
赞 吾妹多才！ :D
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
M*g
77 楼
都有才，还有材
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
c*o
78 楼
又在端详网图？
【在 M****g 的大作中提到】
: 都有才，还有材
【在 M****g 的大作中提到】
: 都有才，还有材
c*e
79 楼
可能没看过。中文名呢
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
c*e
80 楼
我忘了写"们"。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 我专一也有错么
M*g
81 楼
左手一抓，右手一抓
【在 c**o 的大作中提到】
: 又在端详网图？
【在 c**o 的大作中提到】
: 又在端详网图？
c*e
82 楼
是不是你马甲？你俩都很才。
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
c*o
83 楼
图都破了
【在 M****g 的大作中提到】
: 左手一抓，右手一抓
【在 M****g 的大作中提到】
: 左手一抓，右手一抓
c*e
84 楼
还是你知道得多
【在 M****g 的大作中提到】
: 都有才，还有材
【在 M****g 的大作中提到】
: 都有才，还有材
c*e
85 楼
lol, 网图都没见到的飘过。
【在 c**o 的大作中提到】
: 又在端详网图？
【在 c**o 的大作中提到】
: 又在端详网图？
c*o
86 楼
我也没见到过
只有你徒弟跟M俩人分享了
【在 c********e 的大作中提到】
: lol, 网图都没见到的飘过。
只有你徒弟跟M俩人分享了
【在 c********e 的大作中提到】
: lol, 网图都没见到的飘过。
M*g
87 楼
要不我们一人一个吧
你先选
【在 c********e 的大作中提到】
: 是不是你马甲？你俩都很才。
你先选
【在 c********e 的大作中提到】
: 是不是你马甲？你俩都很才。
M*g
88 楼
狼也看了
网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
【在 c**o 的大作中提到】
: 我也没见到过
: 只有你徒弟跟M俩人分享了
网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
【在 c**o 的大作中提到】
: 我也没见到过
: 只有你徒弟跟M俩人分享了
Q*Q
89 楼
喂喂喂 不要装作我没看见的样子好不好
【在 M****g 的大作中提到】
: 狼也看了
: 网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
【在 M****g 的大作中提到】
: 狼也看了
: 网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
c*o
90 楼
你已经太多了，不要害我们姐妹的
【在 M****g 的大作中提到】
: 要不我们一人一个吧
: 你先选
【在 M****g 的大作中提到】
: 要不我们一人一个吧
: 你先选
c*e
91 楼
听着很甜蜜。
替m
【在 c**o 的大作中提到】
: 我也没见到过
: 只有你徒弟跟M俩人分享了
替m
【在 c**o 的大作中提到】
: 我也没见到过
: 只有你徒弟跟M俩人分享了
c*o
92 楼
pia他
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 喂喂喂 不要装作我没看见的样子好不好
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 喂喂喂 不要装作我没看见的样子好不好
Q*Q
93 楼
坑蒙拐骗妹妹我最擅长啦
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
【在 c**o 的大作中提到】
: 赞 吾妹多才！ :D
M*g
94 楼
君子坦荡荡，光着屁股也不怕你偷窥
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 坑蒙拐骗妹妹我最擅长啦
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 坑蒙拐骗妹妹我最擅长啦
c*e
95 楼
羞了，
我就选漂亮的吧。
【在 M****g 的大作中提到】
: 要不我们一人一个吧
: 你先选
我就选漂亮的吧。
【在 M****g 的大作中提到】
: 要不我们一人一个吧
: 你先选
Q*Q
96 楼
……！！ 一脸黑线ing
【在 c**o 的大作中提到】
: 又在端详网图？
c*e
97 楼
网图是借口。。。我没看也知道是真的。
【在 M****g 的大作中提到】
: 狼也看了
: 网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
【在 M****g 的大作中提到】
: 狼也看了
: 网图还蒙脸了，这个很诡异，是邱邱疯了呢还是邱邱疯了呢
M*g
98 楼
那不行啊，说了一人一个，你不可以两个都要
【在 c********e 的大作中提到】
: 羞了，
: 我就选漂亮的吧。
【在 c********e 的大作中提到】
: 羞了，
: 我就选漂亮的吧。
c*e
99 楼
转过来吧
【在 M****g 的大作中提到】
: 君子坦荡荡，光着屁股也不怕你偷窥
【在 M****g 的大作中提到】
: 君子坦荡荡，光着屁股也不怕你偷窥
M*g
100 楼
但是不太像，胸有点大
【在 c********e 的大作中提到】
: 网图是借口。。。我没看也知道是真的。
【在 c********e 的大作中提到】
: 网图是借口。。。我没看也知道是真的。
Q*Q
101 楼
维罗妮卡的双面生活？
我是听一个波兰妞介绍 刚好学校的电影院放映还有解说 我就去看了
估计网上不好找吧
没找过
【在 c********e 的大作中提到】
: 可能没看过。中文名呢
我是听一个波兰妞介绍 刚好学校的电影院放映还有解说 我就去看了
估计网上不好找吧
没找过
【在 c********e 的大作中提到】
: 可能没看过。中文名呢
c*e
102 楼
最真甜啊。
都有才
【在 M****g 的大作中提到】
: 那不行啊，说了一人一个，你不可以两个都要
都有才
【在 M****g 的大作中提到】
: 那不行啊，说了一人一个，你不可以两个都要
Q*Q
103 楼
请加个限定词 闷骚……
【在 c********e 的大作中提到】
: 我忘了写"们"。
【在 c********e 的大作中提到】
: 我忘了写"们"。
c*e
104 楼
好象见过我胸似的。
--球
【在 M****g 的大作中提到】
: 但是不太像，胸有点大
--球
【在 M****g 的大作中提到】
: 但是不太像，胸有点大
Q*Q
105 楼
M哥你简直是自我破坏高大形象啊
【在 M****g 的大作中提到】
: 左手一抓，右手一抓
【在 M****g 的大作中提到】
: 左手一抓，右手一抓
Q*Q
106 楼
噗~~
【在 c**o 的大作中提到】
: 图都破了
【在 c**o 的大作中提到】
: 图都破了
c*o
107 楼
这才是他的真面孔
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 噗~~
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 噗~~
c*e
108 楼
哦，听着有点意思。写篇日记介绍下吧？
反正你不去孟班，有时间写。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 噗~~
反正你不去孟班，有时间写。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 噗~~
M*g
109 楼
好像你很了解我似的
【在 c**o 的大作中提到】
: 这才是他的真面孔
【在 c**o 的大作中提到】
: 这才是他的真面孔
Q*Q
110 楼
M哥把梦版妹纸都划拉了
【在 c**o 的大作中提到】
: 你已经太多了，不要害我们姐妹的
【在 c**o 的大作中提到】
: 你已经太多了，不要害我们姐妹的
Q*Q
111 楼
旋风腿
【在 c**o 的大作中提到】
: pia他
【在 c**o 的大作中提到】
: pia他
Q*Q
112 楼
……！！
M哥光屁股灌水
【在 M****g 的大作中提到】
: 君子坦荡荡，光着屁股也不怕你偷窥
M哥光屁股灌水
【在 M****g 的大作中提到】
: 君子坦荡荡，光着屁股也不怕你偷窥
c*o
113 楼
哦，那我说错了
不了解
不熟
【在 M****g 的大作中提到】
: 好像你很了解我似的
不了解
不熟
【在 M****g 的大作中提到】
: 好像你很了解我似的
Q*Q
114 楼
那就是我姐了
呼~~
【在 c********e 的大作中提到】
: 羞了，
: 我就选漂亮的吧。
呼~~
【在 c********e 的大作中提到】
: 羞了，
: 我就选漂亮的吧。
Q*Q
115 楼
……！！
爬过
【在 c********e 的大作中提到】
: 网图是借口。。。我没看也知道是真的。
爬过
【在 c********e 的大作中提到】
: 网图是借口。。。我没看也知道是真的。
c*o
116 楼
吐了
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……！！
: 爬过
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……！！
: 爬过
c*e
117 楼
波霸，现原形吧。
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……！！
: 前一截是我写的
: 后一节肯定是我那臭师傅接的
:
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……！！
: 前一截是我写的
: 后一节肯定是我那臭师傅接的
:
Q*Q
118 楼
……！！！
师傅 ，徒儿森森感到 在攀登高峰的道理上 还有很多需要学习的
【在 c********e 的大作中提到】
: 转过来吧
师傅 ，徒儿森森感到 在攀登高峰的道理上 还有很多需要学习的
【在 c********e 的大作中提到】
: 转过来吧
Q*Q
119 楼
md
【在 M****g 的大作中提到】
: 但是不太像，胸有点大
【在 M****g 的大作中提到】
: 但是不太像，胸有点大
Q*Q
120 楼
md！！
【在 c********e 的大作中提到】
: 好象见过我胸似的。
: --球
【在 c********e 的大作中提到】
: 好象见过我胸似的。
: --球
M*g
121 楼
怎么做安全工作的，太不小心了
【在 c**o 的大作中提到】
: 吐了
【在 c**o 的大作中提到】
: 吐了
Q*Q
122 楼
可怜这么多妹纸迷上了他
【在 c**o 的大作中提到】
: 这才是他的真面孔
【在 c**o 的大作中提到】
: 这才是他的真面孔
Q*Q
123 楼
懒……
好久以前了
我发现波兰有很多有意思的电影
可惜我听不懂
【在 c********e 的大作中提到】
: 哦，听着有点意思。写篇日记介绍下吧？
: 反正你不去孟班，有时间写。
好久以前了
我发现波兰有很多有意思的电影
可惜我听不懂
【在 c********e 的大作中提到】
: 哦，听着有点意思。写篇日记介绍下吧？
: 反正你不去孟班，有时间写。
Q*Q
124 楼
……
修炼double z
【在 c********e 的大作中提到】
: 波霸，现原形吧。
修炼double z
【在 c********e 的大作中提到】
: 波霸，现原形吧。
M*g
125 楼
不信谣，不传谣
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……
: 修炼double z
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……
: 修炼double z
M*g
126 楼
double z是什么意思，看到你在鼓励你的好基友
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……
: 修炼double z
【在 Q*Q 的大作中提到】
: ……
: 修炼double z
Q*Q
127 楼
size啊
不过起因是我说以后梦版吵架不分胜负的时候比肚皮的尺寸
最后double z胜出
后来引申一下……
【在 M****g 的大作中提到】
: double z是什么意思，看到你在鼓励你的好基友
不过起因是我说以后梦版吵架不分胜负的时候比肚皮的尺寸
最后double z胜出
后来引申一下……
【在 M****g 的大作中提到】
: double z是什么意思，看到你在鼓励你的好基友
M*g
128 楼
哦，好像你们都在憋论文？
【在 Q*Q 的大作中提到】
: size啊
: 不过起因是我说以后梦版吵架不分胜负的时候比肚皮的尺寸
: 最后double z胜出
: 后来引申一下……
【在 Q*Q 的大作中提到】
: size啊
: 不过起因是我说以后梦版吵架不分胜负的时候比肚皮的尺寸
: 最后double z胜出
: 后来引申一下……
Q*Q
129 楼
不要提不开心的事好不好
白白
【在 M****g 的大作中提到】
: 哦，好像你们都在憋论文？
白白
【在 M****g 的大作中提到】
: 哦，好像你们都在憋论文？
M*g
130 楼
:) 加油
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 不要提不开心的事好不好
: 白白
【在 Q*Q 的大作中提到】
: 不要提不开心的事好不好
: 白白
c*e
131 楼
也加油
【在 M****g 的大作中提到】
: 不信谣，不传谣
【在 M****g 的大作中提到】
: 不信谣，不传谣
M*g
132 楼
加油泡女ID？
【在 c********e 的大作中提到】
: 也加油
【在 c********e 的大作中提到】
: 也加油
B*e
133 楼
错流氓你好
【在 M****g 的大作中提到】
: 加油泡女ID？
【在 M****g 的大作中提到】
: 加油泡女ID？
M*g
134 楼
漂亮妞你好，想和我谈恋爱么
【在 B********e 的大作中提到】
: 错流氓你好
【在 B********e 的大作中提到】
: 错流氓你好
B*e
135 楼
塔夫附体了？
【在 M****g 的大作中提到】
: 漂亮妞你好，想和我谈恋爱么
【在 M****g 的大作中提到】
: 漂亮妞你好，想和我谈恋爱么
c*e
136 楼
咳咳咳
【在 M****g 的大作中提到】
: 漂亮妞你好，想和我谈恋爱么
【在 M****g 的大作中提到】
: 漂亮妞你好，想和我谈恋爱么
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