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问个培养细菌的问题

问个培养细菌的问题# Biology - 生物学

l*s2010-11-17 08:11

1 楼

【以下文字转载自 Programming 讨论区】
发信人: leileicats (Seeking a job in EDA industry), 信区: Programming
标题: Interview Question: System Crash
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 1 13:21:26 2009, 美东)
I to answer this interview question in 15 minutes:
We have a program which never crash in one system, but it crashes
occasionally in another system?
Two systems are exactly the same.
What is the reason?

k*c2010-11-17 08:11

2 楼

下午。就将是教会枢机主教团讨论李察最近动向的时候了。新晋的枢机主教定下心来。
端了一碗清水。用手指蘸着水。在木桌上将李察的话写了下来。仔细揣摩。过了片刻。
桌上的字迹渐渐干了。他就会再蘸清水重写一遍。如是十余遍后。布斯克茨终于觉得自
己有些明白了李察的意思。
他拿出一块黑面包。和着碗里剩余的清水吃下。就算是一顿午餐。此时距离下午
还有些时间。他合衣躺到床上。闭目小憩。将养精神。下午的会议。将会是一场漫长而
艰苦的战争。
木床很简朴。麻布的床单会让人感觉粗糙难受。可是不知从何时起。第一时间更
新躺在这样的床上。过着极至简朴的生活。却会让布斯克茨的心安静下来。也不再有
彷徨和畏惧。有时午夜沉思。他也会有所迷茫。不明白自己的方向是在哪里。
下午三时。所有的枢机主教均准时到场。教皇和主教团书记官分别坐在长桌的两
端。书记官敲响手边的铜铃后。会议正式开始。这次会议就是为了讨论如何应对李察的
召集令。上一次宗教战争的惨败还铭刻在众主教们的心底。丢失了整整一个王国的教区
。对勇气之神的打击是空前的。还好布斯克茨展示了神迹般的口才。硬是从李察手中要
回了两个行省的教区。这才挽回了一些损失。第一时间更新
转眼间就是许多年过去了。深红公国已经变成了一个可怕的庞然大物。沉甸甸地
压在所有人的心口。许多枢机主教都在相互私语。他们显然倾向于一开始就加入到战争
中去。因为勇气之神的教区和李察的势力相邻。而且李察没有理由会放过一个被削弱的
敌人。
但当正式发言开始时。一向低调的枢机主教布斯克茨却是第一个站了起来。众人
知道。这意味着布斯克茨有了不容动摇的主张。在历史上。这样的时候并不多。但每一
次布斯克茨都是对了。
这一次。新晋枢机主教的第一句话就震动了全场：“我认为。第一时间更新这次
我们不是李察的敌人……”
尽管布斯克茨说出这句话显然经过了深思熟虑。但是和大多数人的意见相左。因
此引起了一场激烈而漫长的辩论。会议从下午一直开到深夜。再到天色微明。纵然主教
们个个神力深厚。但到了这个时候。都已筋疲力尽。最终还是布斯克茨取得了胜利。教
皇决定在这场战争中先执中立立场。但要全力备战。以防万一。在宣布决定时。教皇罕
见地说。这个决定并不是基于理智的判断。而是基于对布斯克茨的信任。
时间一天天的在过去。距离李察召集追随者的最后时限已经不到三天了。此刻在
铁三角帝国国都。皇帝和所有内阁大臣也都在近乎于不眠不休地开着会。会议已经持续
了数天。却还没有一个结果。
铁三角帝国内阁会议讨论的内容。就是李察使者送来的三项要求。第一项要求就
是立刻交出撒伦威尔。并且要保证撒伦威尔肯以诸神之名起誓。从此一心为深红公国效
力。第二项要求就是彻底清剿帝国内部一切与红色哥萨克相关的势力。所有幕后的贵族
必须放弃对红色哥萨克的支持。并且所有头领都要缉拿归案。并交给李察处置。第三项
要求则是在帝国内部宣布时间之神西奈为不受欢迎、不受保护的教会。第一时间更新
李察有权利派少量精锐进入帝国打击时间之神的教会。
这三项要求。可以说每一项都让铁三角帝国难以接受。但是从使者到来的那一刻
起。帝国高层就都认识到。这次李察的战争目标就是铁三角帝国。只要想起李察麾下多
如牛毛的镇国强者。如钢铁洪流般的精锐骑士。以及装备精良得堪比帝国皇家禁卫的军
队。即使是最强硬的主战派也会为之失声。
答应了李察的三项要求。铁三角帝国也就是损失了些尊严。另外丧失部分主权。
可是如果不答应。战争就迫在眉睫。撒伦威尔已经被紧急召回。第一时间更新他是内
阁中极少数坚决主张与李察一战的人。但是皇帝还在犹豫不定。
毕竟。这将是决定铁三角帝国国运的一战。
在蓝水绿洲城。李察集中精力。终于完成了深红流火。当他还在思索应该如何把
深红流火与自身的构装结合在一起时。一个意外的访客打断了李察的思路。
“主人。”这是希姆看到李察的第一句话。顿时让李察一阵恶寒。追随者中有不
少管李察叫主人的。但如提拉米苏这样的。那是它们的种族习惯。可是这句话从白白嫩
嫩的希姆嘴里叫出来。实在让李察难以接受。
接下来。希姆就一跃而起。扑向李察。
李察咳嗽一声。不动声色地横移一步。恰好避开了希姆的一扑。让他拍在地上。
希姆爬了起来。满脸堆笑。上来就是一句“主人。您的武力更加强大了。”然后各式各
样的阿谀奉承滚滚而出。
李察意外于希姆的突然出现。更加意外于他的实力。细细询问之后。李察也不禁
有些感慨独角兽血脉的强大。只凭大睡一觉就能够从一个废物变成圣域强者这一点。就
足以列名诺兰德上位血脉。
接下来。希姆坚决要求重归追随者之列。要把自己牢牢绑在李察的战车上。此刻
希姆空有一身圣域武力。实战经验却基本为零。就是遇上十二级的无面。估计三两下之
内就会被她切了。不过能够多一名圣域总归是好事。至于实战经验。在李察麾下。还怕
没有仗打。
李察刚刚答应下来。母巢就插了进来。说：“主人。我从希姆身上感觉到了异常
甜美的气息。他的独角兽血脉对我非常有用。您是否可以把他‘借’给我几天。您放心
。我只是需要他的一点血而已。不会伤及性命。也不会影响到他今后的成长。”
李察苦笑：“象宗虎那样。那可不行。他承受不住的。”
“我会温柔对待他的。”母巢说话越来越艺术了。
一番讨论后。李察发现希姆确实对母巢的进化有巨大作用。于是同意了母巢的要
求。所以一天后。希姆就绝望地尖叫着。被分脑提上天空。飞速向动荡之地飞去。
希姆走后。李察沉思一会。然后花了整整一天时间。在意识中将母巢的资料全都
重新过了一遍。终于发现了母巢的一个局限之处。从功能上来说。母巢只能复制和完善
。而不能创造。这就是为什么得到过希姆血液的母巢。现在又需要新的血液的原因。希
姆在沉睡中觉醒了血脉能力。独角兽血脉有极大进化。和当初不可同日而语。但母巢却
无法做到这一点。它只有汲取到最新的血液。并且进行一段时间的解析。才能够把这个
血脉能力复制。或者是模拟出来。但是越强大的生物数量就越稀少。也越难得到它们的
血脉。
所以母巢虽然强大。却也不是全无弱点。在顶级战力上的缺失。就是母巢最大的
弱点。
思虑至此。李察也就知道了今后的发展方向。
时间过得很快。当李察围绕着母巢。重新审定了在法罗的发展战略时。他召集追
随者的最后时限终于到了。这一时刻。也是李察给铁三角帝国的最后时限。帝国使者已
经通过超远程传送来到了蓝水绿洲。将帝国皇帝的决定交给了李察。
李察在自己的书房召见的帝国使者。随手撕开有魔法封印的文书。快速扫了一眼
内容。面色忽然一变。惊讶地看了使者一眼。说：“拒绝全部要求。并且……即刻开战
。”
使者微微躬身。说：“是的。这是伟大的皇帝陛下的决定。我们铁三角帝国愿意
为了尊严奋战到底。”
李察掂了掂手中的文书。感觉着那似轻实重的份量。叹了口气。说：“撒伦威尔
还好吧。这多半是他的主意。”
使者说：“我并不清楚这是不是撒伦威尔殿下的决定。但我可以自豪且骄傲地通
知您。这次帝国远征军将会由撒伦威尔殿下统帅。”
李察失笑：“帝国远征军。远征……呵呵。你们想要远征哪里。难道还以为有机
会打进我的深红公国不成。这个撒伦威尔。在我手上输了那么多次。怎么还这么盲目自
信。”
使者凛然喝道：“李察殿下。请您尊重撒伦威尔大人。否则的话。我有理由要求
您道歉。”
李察看了看使者。淡然道：“我知道你有不惧一死的心。但是激怒我的话。只是
白丢了一条命而已。利益都是从刀锋上得来的。而不是靠一张嘴空谈。你回去吧。告诉
撒伦威尔。他的主力要是能够深入我的深红公国三十公里。这场战争就算我输了。”
使者愕然。张了张嘴。却不知道该说什么。李察说的话极为狂妄。但是在这个男
人的身上出现了太多的奇迹。使者最终向李察行了一礼。就匆匆离去。赶往超远程传送
阵。看着使者的背影。李察不禁摇了摇头。
法罗不同于诺兰德。这里的超远程传送技术还不成熟。对传送者的身体负担极大
。这名使者连续进行了两次如此远距离的传送。中间没有经过休整和身体修整。回去后
多半活不过十年。可是他却毅然选择了传送。好在第一时间把情报传送回去。
任何一个国家。总是刚烈和不畏生死的人。只不过。战争的结局有时并不是光由
勇气决定的。

o*n2010-11-17 08:11

3 楼

背景：
1. 有个酶能分解一种底物，其产物可作为细菌的唯一氮源。这个酶连带它上下游
flanking region一起放到质粒上，转到大肠杆菌里，大肠杆菌可以表达这种酶，别人
测过cell-free extract里的酶有活性。
2. 已知这种酶Km比较低，对底物亲和力低
3. 土壤细菌本身有这个酶的，在minimal media+底物的平板和液态培养基都可以长起
来，长得慢。
4. 大肠杆菌好像不太喜欢这个6 kb多的质粒，每次overnight culture都长得不太浓，
有floc,显微镜下看到细胞连成长条，肉眼可见细胞沉在管底。
现在我在minimal media+底物的液态培养基里想长带这个酶的质粒的大肠杆菌，就是长
不起来，我试了几种minimal media，加了trace elements，也不行。大肠杆菌在
minimal media加别的氮源可以长。
因为酶不给力吗？可是再怎么不至于一点都长不起来呀？换个很强的promoter，多产些
酶有用吗？
还是因为酶在质粒上，而大肠杆菌不喜欢这个质粒，在minimal media里，就不爱给表
达它了？
请大家给些建议意见，谢谢！

c*f2010-11-17 08:11

4 楼

认为造成的？

o*l2010-11-17 08:11

5 楼

又要两国大战了
其实更喜欢看高手对决，等忍几个星期了

【在 k*****c 的大作中提到】

: 下午。就将是教会枢机主教团讨论李察最近动向的时候了。新晋的枢机主教定下心来。
: 端了一碗清水。用手指蘸着水。在木桌上将李察的话写了下来。仔细揣摩。过了片刻。
: 桌上的字迹渐渐干了。他就会再蘸清水重写一遍。如是十余遍后。布斯克茨终于觉得自
: 己有些明白了李察的意思。
: 他拿出一块黑面包。和着碗里剩余的清水吃下。就算是一顿午餐。此时距离下午
: 还有些时间。他合衣躺到床上。闭目小憩。将养精神。下午的会议。将会是一场漫长而
: 艰苦的战争。
: 木床很简朴。麻布的床单会让人感觉粗糙难受。可是不知从何时起。第一时间更
: 新躺在这样的床上。过着极至简朴的生活。却会让布斯克茨的心安静下来。也不再有
: 彷徨和畏惧。有时午夜沉思。他也会有所迷茫。不明白自己的方向是在哪里。

s*n2010-11-17 08:11

6 楼

问题是你的MM里有没有氮源？这个酶的产物E. coli能够利用吗？

n*52010-11-17 08:11

7 楼

终于要有点内容了

c*r2010-11-17 08:11

8 楼

捉急啊，母巢跟雷蒙在背后算计李察，李察还在傻乎乎的卖命送资源给母巢。真是别人
把他卖了还在帮别人数钱

b*y2010-11-17 08:11

9 楼

啥目标呢？路唇不对马嘴嘛