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有人用什么高扩增效率的DNA polymerase(扩增极少量cDNA)?
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有人用什么高扩增效率的DNA polymerase(扩增极少量cDNA)?# Biology - 生物学
b*e
1
快垫砖 !
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w*z
2
今年太忙,没去。有谁说说?
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f*e
3
买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
是没有聚合酶做PCR啊
看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
少的cDNA。
谁做过的推荐下,非常感谢!
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b*e
4
1
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s*s
5
[email protected]
15-30 s/kb
超级牛b,很好用
现在NEB也有卖
http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html

做一

【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
: 次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下,非常感谢!

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b*e
6
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b*e
8
3
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a*d
9
LZ要扩多大的片段,能不能直接合成?

做一

【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
: 次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下,非常感谢!

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b*e
10
4
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f*e
11
我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR,就是常规的RTp
cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率(灵敏)的

【在 a****d 的大作中提到】
: LZ要扩多大的片段,能不能直接合成?
:
: 做一

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b*e
12
5
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L*s
13
和别的没比过,但相对于Taq、Vent之类,Phusion的效率绝对高的多。我从cDNA libra
ry里扩增某些gene的cDNA,taq做不出来的,换Phusion就全做出来了,而且cDNA libra
ry的用量可以减到用taq时的1/10,可能再低也行,不过没有去试。

RTp
但是

【在 f*******e 的大作中提到】
: 我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR,就是常规的RTp
: cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
: 还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
: 么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率(灵敏)的

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b*e
14
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b*e
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b*e
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b*e
18
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
23
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b*e
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b*e
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16
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b*e
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17
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b*e
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b*e
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J*i
29
合适吗

【在 b*****e 的大作中提到】
: 快垫砖 !
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b*e
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20
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J*i
31
别这样

【在 b*****e 的大作中提到】
: 20
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d*e
32
又不是让你宽衣解带

【在 J********i 的大作中提到】
: 别这样
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b*e
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21
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b*e
34
22
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b*e
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23
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b*e
36
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b*e
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25
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b*e
38
26
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J*i
39
那来吧

【在 d********e 的大作中提到】
: 又不是让你宽衣解带
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b*e
40
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w*i
41
100

【在 b*****e 的大作中提到】
: 22
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J*i
42
200

【在 w***i 的大作中提到】
: 100
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J*i
43
300

【在 J********i 的大作中提到】
: 200
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J*i
44
10000

【在 J********i 的大作中提到】
: 300
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J*i
45
99

【在 J********i 的大作中提到】
: 10000
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J*i
46
999

【在 J********i 的大作中提到】
: 99
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b*e
47
100
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J*i
48
777

【在 J********i 的大作中提到】
: 999
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J*i
49
888

【在 J********i 的大作中提到】
: 777
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J*i
50
111

【在 J********i 的大作中提到】
: 888
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b*e
51
200
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J*i
52
222

【在 J********i 的大作中提到】
: 111
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J*i
53
333

【在 b*****e 的大作中提到】
: 200
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J*i
54
444

【在 J********i 的大作中提到】
: 333
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J*i
55
555

【在 J********i 的大作中提到】
: 444
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J*i
56
666

【在 J********i 的大作中提到】
: 555
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J*i
57
777

【在 J********i 的大作中提到】
: 666
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b*e
58
1
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b*e
59
1
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b*e
60
1
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l*g
61
399999
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m*o
62
怎么抢
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d*e
63
骗子? 封!

【在 l*******g 的大作中提到】
: 399999
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d*e
64
早结束了

【在 m***o 的大作中提到】
: 怎么抢
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m*o
65

我来晚了。。。

【在 d********e 的大作中提到】
: 早结束了
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l*g
66
不是要垫砖抢399999吗

【在 d********e 的大作中提到】
: 骗子? 封!
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b*e
67
你要做作业嘛

【在 m***o 的大作中提到】
:
: 我来晚了。。。

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d*e
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这个任务交给你了

【在 l*******g 的大作中提到】
: 不是要垫砖抢399999吗
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l*g
69
等会开机器人来刷

【在 d********e 的大作中提到】
: 这个任务交给你了
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b*e
70
看你的机器人好用不

【在 l*******g 的大作中提到】
: 等会开机器人来刷
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l*g
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好用,刷一会儿钻风就来封人了。

【在 b*****e 的大作中提到】
: 看你的机器人好用不
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d*e
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钻风比较看重你们大版

【在 l*******g 的大作中提到】
: 好用,刷一会儿钻风就来封人了。
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m*o
73

嗯,你们灌,我写会儿作业。你没有作业吗?

【在 b*****e 的大作中提到】
: 你要做作业嘛
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b*e
74
没有,早就没有了

【在 m***o 的大作中提到】
:
: 嗯,你们灌,我写会儿作业。你没有作业吗?

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m*o
75

哦,你们学校真好。

【在 b*****e 的大作中提到】
: 没有,早就没有了
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b*e
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我的级别高

【在 m***o 的大作中提到】
:
: 哦,你们学校真好。

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m*o
77

你校长?

【在 b*****e 的大作中提到】
: 我的级别高
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b*e
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不用太仰慕我

【在 m***o 的大作中提到】
:
: 你校长?

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m*o
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必须的

【在 b*****e 的大作中提到】
: 不用太仰慕我
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b*e
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那就适当的仰慕吧

【在 m***o 的大作中提到】
:
: 必须的

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O*y
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竟然作业都有人帮你抄,还有天理吗

【在 b*****e 的大作中提到】
: 我的级别高
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b*e
82
你季度也没有用

【在 O**y 的大作中提到】
: 竟然作业都有人帮你抄,还有天理吗
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O*y
83
我们都是直接复印的

【在 b*****e 的大作中提到】
: 你季度也没有用
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b*e
84
我就喜欢抓这样的学生!

【在 O**y 的大作中提到】
: 我们都是直接复印的
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O*y
85
抓住以后呢?这个很关键

【在 b*****e 的大作中提到】
: 我就喜欢抓这样的学生!
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b*e
86
上报系里

【在 O**y 的大作中提到】
: 抓住以后呢?这个很关键
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O*y
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这么多年了,你还是这么喜欢打小报告

【在 b*****e 的大作中提到】
: 上报系里
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m*o
88

极度养目

【在 b*****e 的大作中提到】
: 那就适当的仰慕吧
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