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Lentivirus 中残留的293 细胞

Lentivirus 中残留的293 细胞# Biology - 生物学

W*22010-12-10 08:12

1 楼

恋爱时男方表达感情的终极方式，大概就是我想娶你吧！可当男方想娶之时也不是所有
女生都会想嫁，而娱乐圈中就有不少这样的例子，不过如今回过头来看，下面要讲的这
6位男明星或许都会感谢前任的不嫁之恩，因为不是她们自己如今就不会遇到真正对的
人！
最近《独孤天下》正在热播，最让小编惊喜的就是剧中饰演王女官的张茜，她也算是一
位多年不红的老戏骨了。虽然事业发展的一般不过在感情上她却是大赢家了，她和张卫
健两人相识相恋了20多年依然恩爱如初，幸福的两人令人十分羡慕。说起来张卫健真是
一个好男人了，在感情上多年来以来他从无绯闻，而且不止是在和张茜的感情中是这样
，他早年有一个前女友，张卫健对她也是非常好，如果不是女方甩了他或许他们二人就
步入婚姻的殿堂了，而原因就是张卫健那会太穷了因为还没有出名，在一次拍戏的时候
张卫健受伤做手术，手术完了之后他第一眼就看到了自己的女友，当时的他非常感动，
谁知女友给他说的第一句话却是分手，她对张卫健说：不是你有什么不好，但我不想我
们结婚之后买个LV包包还要想半年.....不知道之后他的前女友在看到张卫健的事业起
飞之后心里后悔吗？
陈豪也是一个要感谢前任“不嫁之恩”的例子了，早年廖碧儿和刘恺威在一起时，因为
看不到希望所以她就开始搭上了正在走红的陈豪，当年两人走到一起之后还是很甜蜜的
，唯一让陈豪介怀的就是他们已经在一起6年了，但是廖碧儿还是不太愿意公开陈豪是
自己男友的事实，后来她又攀上了某富二代，但见多识广的富二代对她只是玩玩而已，
在被甩了之后她也无颜在见陈豪

c*d2010-12-10 08:12

2 楼

lenovo的G455本本。显卡是ATI Mobility Radeon HD 4200。买的时候配置是512M显存。
可是我用优化大师和everest检测一下，报告的显存都是256M。有没有可能联想弄错了
？还是检测到的不准确？

l*n2010-12-10 08:12

3 楼

最近做lentivirus，用293T包装，取病毒，离心，然后感染平滑肌细胞。
发现感染后有的dish中有293T细胞（形态上很好辨认）。
有人告诉我可以用0.4um filter过滤可以去除293T细胞，但是病毒滴度会降低。
大家有没有更好的办法？

t*t2010-12-10 08:12

4 楼

HD4200是集成显卡吧。
显存是动态的。

存。

【在 c******d 的大作中提到】

: lenovo的G455本本。显卡是ATI Mobility Radeon HD 4200。买的时候配置是512M显存。
: 可是我用优化大师和everest检测一下，报告的显存都是256M。有没有可能联想弄错了
: ？还是检测到的不准确？

h*a2010-12-10 08:12

5 楼

sucrose centrifuge?

p*x2010-12-10 08:12

6 楼

估计是最高可共享512M，现在是设置在了256M，好像要进bios改。

d*p2010-12-10 08:12

7 楼

商清收集以后，离心10分钟，2000rpm, 4.5um过滤, 超速离心。
我比较过4.5um过滤与不过滤上清，过滤不会降低滴度。

m*72010-12-10 08:12

8 楼

我以为过滤是standard practice呢。不过滤的东西我用着不放心。

l*n2010-12-10 08:12

9 楼

多谢！
你说的是0.45微米的filter 吧？

【在 d*p 的大作中提到】

: 商清收集以后，离心10分钟，2000rpm, 4.5um过滤, 超速离心。
: 我比较过4.5um过滤与不过滤上清，过滤不会降低滴度。

w*a2010-12-10 08:12

10 楼

我都是用0.45微米的filter，效果很稳定。

d*p2010-12-10 08:12

11 楼

sorry, it is 0.45um

d*u2010-12-10 08:12

12 楼

不用那么麻烦吧，你把你的病毒放-80度冻一个晚上，293T就差不多死光了吧

n*k2010-12-10 08:12

13 楼

Spin is enough...although I never heard the 0.45 um would hurt the titer...0
.22 might...as the particle size of lenti is pretty close to that I believe.
..0.22 might be ok with retro if my memory is not wrong...

【在 l**********n 的大作中提到】

: 最近做lentivirus，用293T包装，取病毒，离心，然后感染平滑肌细胞。
: 发现感染后有的dish中有293T细胞（形态上很好辨认）。
: 有人告诉我可以用0.4um filter过滤可以去除293T细胞，但是病毒滴度会降低。
: 大家有没有更好的办法？

n*k2010-12-10 08:12

14 楼

Btw, I wouldn't concentrate or freeze my production if working with cells
that use serum-containing medium, too much loss along the process and the
titer decreases with freezing...I used to do small virus production
everytime I need a new infection...take a bit planning but very easy and
reproducible...

【在 l**********n 的大作中提到】

l*n2010-12-10 08:12

15 楼

Thanks a lot to the responses from you and all other people!

【在 n********k 的大作中提到】

: Btw, I wouldn't concentrate or freeze my production if working with cells
: that use serum-containing medium, too much loss along the process and the
: titer decreases with freezing...I used to do small virus production
: everytime I need a new infection...take a bit planning but very easy and
: reproducible...

d*p2010-12-10 08:12

16 楼

I guess he needs high titer, otherwise he could have simply used the viral
sup.