d*e
2 楼
最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达,目的蛋白会形成一个五聚体,大小在60KDa
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性,跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方(和上样
的MARKER比较),少了20多KDa, 尝试用native-PAGE 胶跑电泳,但是条带size一下子
又很大了(和上样的MARKER比较),偏差很大,还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的?有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性,跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方(和上样
的MARKER比较),少了20多KDa, 尝试用native-PAGE 胶跑电泳,但是条带size一下子
又很大了(和上样的MARKER比较),偏差很大,还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的?有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
r*y
3 楼
Take it easy. It is still not late.
b*u
5 楼
多谢鼓励~~~慢慢等了...
k*0
6 楼
糖链修饰或超强输水,都引起表观分子量异常。
非变性胶,不是用来测分子量的。
检查抗体特异性如何或是否目标蛋白质发生降解或切除信号肽,等等。
非变性胶,不是用来测分子量的。
检查抗体特异性如何或是否目标蛋白质发生降解或切除信号肽,等等。
n*w
7 楼
您的结果只有1条带吗?
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