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请教提取细胞核蛋白后WB背景高的问题
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请教提取细胞核蛋白后WB背景高的问题# Biology - 生物学
t*d
1
I like to see some concert, but I don't know if this is a good idea to buy
TicketMaster GC or not? I heard AMerican Express Card provides presale and
better seat. If I buy GC, maybe I cannot get those good deal and good seat.
Anyone know about TicketMaster?
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c*1
2
也谈不上喜欢,但也不会讨厌。
天蝎有时候觉得不太有人情味,但有时候也有它特有的人情味
总之,不敢接近,接近了,也没那么可怕。嗯
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s*y
3
好不容易,被针扎了以后,结果有了improve:)
我提取了nuclear fraction后,那个suspension很黏糊糊的,应该是DNA很多的原因吧?
anyway,我用针头fitler了好久,然后做WB。
结果能看到我要的带,但是背景很高,看图,
我又把膜多洗了几遍,也没明显效果,请问有什么办法,能消除背景吗?
很明显,旁边的cytosolic 同一个蛋白,就没这个背景问题,谢谢。
BTW, 目标蛋白是150kd左右的那个,图片上是不同的曝光时间的结果。
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j*n
4
恨就是一种浪费时间,浪费生命资源
一个人的记忆可以勾起众多人早已放下的往事
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s*s
5
load太多了,或者DNA太多,或者盐太高

吧?

【在 s******y 的大作中提到】
: 好不容易,被针扎了以后,结果有了improve:)
: 我提取了nuclear fraction后,那个suspension很黏糊糊的,应该是DNA很多的原因吧?
: anyway,我用针头fitler了好久,然后做WB。
: 结果能看到我要的带,但是背景很高,看图,
: 我又把膜多洗了几遍,也没明显效果,请问有什么办法,能消除背景吗?
: 很明显,旁边的cytosolic 同一个蛋白,就没这个背景问题,谢谢。
: BTW, 目标蛋白是150kd左右的那个,图片上是不同的曝光时间的结果。

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c*1
6
有时候恨别人,也同时在伤害着自己。

【在 j**n 的大作中提到】
: 恨就是一种浪费时间,浪费生命资源
: 一个人的记忆可以勾起众多人早已放下的往事

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Y*j
7
DNA酶消化,降低上样量(10x?),加大洗涤体积和时间,等等吧,效果会好很多的。实
在不行沉淀重溶一次,也会好一些。

吧?

【在 s******y 的大作中提到】
: 好不容易,被针扎了以后,结果有了improve:)
: 我提取了nuclear fraction后,那个suspension很黏糊糊的,应该是DNA很多的原因吧?
: anyway,我用针头fitler了好久,然后做WB。
: 结果能看到我要的带,但是背景很高,看图,
: 我又把膜多洗了几遍,也没明显效果,请问有什么办法,能消除背景吗?
: 很明显,旁边的cytosolic 同一个蛋白,就没这个背景问题,谢谢。
: BTW, 目标蛋白是150kd左右的那个,图片上是不同的曝光时间的结果。

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z*x
8
恩, 吃好玩好比恨有意思!

【在 j**n 的大作中提到】
: 恨就是一种浪费时间,浪费生命资源
: 一个人的记忆可以勾起众多人早已放下的往事

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s*i
9
我也不恨,可能有几个天蝎恨我,嗬嗬
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p*s
10
对阿,为什么要恨别人呢,被恨的人仍在快乐的生活,自己的仇恨影响不了被恨的人的
快乐,所以仇恨木有意义:D。

【在 c*********1 的大作中提到】
: 有时候恨别人,也同时在伤害着自己。
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h*e
11
蝎子们自己也纠结,原谅他们得了~

【在 c*********1 的大作中提到】
: 也谈不上喜欢,但也不会讨厌。
: 天蝎有时候觉得不太有人情味,但有时候也有它特有的人情味
: 总之,不敢接近,接近了,也没那么可怕。嗯

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h*e
12
对爱恨这东西感觉很深刻的人也不是凡夫俗子啊。。。

【在 j**n 的大作中提到】
: 恨就是一种浪费时间,浪费生命资源
: 一个人的记忆可以勾起众多人早已放下的往事

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t*0
13
我突然觉得蝎子好可怜啊,世人不了解我们的疾苦,还经常被骂……

【在 c*********1 的大作中提到】
: 也谈不上喜欢,但也不会讨厌。
: 天蝎有时候觉得不太有人情味,但有时候也有它特有的人情味
: 总之,不敢接近,接近了,也没那么可怕。嗯

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P*I
14
你敢再近点么?

【在 c*********1 的大作中提到】
: 也谈不上喜欢,但也不会讨厌。
: 天蝎有时候觉得不太有人情味,但有时候也有它特有的人情味
: 总之,不敢接近,接近了,也没那么可怕。嗯

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