L*l
2 楼
金庸的一些小说里的人物设置还是有挺大的相似之处，比如《倚天屠龙记》跟《笑傲江
湖》，就有很多的相似了，尤其是女一号和女二号。
岳灵珊是小师妹，周芷若是周师妹。
俩人都是很温柔正派的形象，后来都有不同程度的黑化，以及跟男主都有不同程度的反
目，而且都是从自己的长辈开始跟男主反目的，岳灵珊是因为她爹岳不群跟令狐冲反目
，周芷若是因为她师父灭绝师太跟张无忌所在的明教反目，同时也是跟张无忌反目。
任盈盈是魔教之女，赵敏是朝廷郡主，被称为是妖女。
俩人在刚开始，都是比较反面的女性形象，很任性，很嚣张，很大小姐脾气和架子，但
是后期都是变得正面了，而且跟男主的感情也是很深厚了，超过了女二号跟男主的青梅
竹马的关系和萌芽时期的好感或者青涩的恋爱。
只是赵敏的身世跟任盈盈不太一样而已，所以赵敏没有一个武功盖世的像任我行那样的
爹，不过赵敏的王爷爹是有兵权的，也是个重量级人物，只是跟江湖的关系不大。
至于说令狐冲和张无忌，不太一样，但是也有一点点的类似之处，这两部算是相似度高
的。
湖》，就有很多的相似了，尤其是女一号和女二号。
岳灵珊是小师妹，周芷若是周师妹。
俩人都是很温柔正派的形象，后来都有不同程度的黑化，以及跟男主都有不同程度的反
目，而且都是从自己的长辈开始跟男主反目的，岳灵珊是因为她爹岳不群跟令狐冲反目
，周芷若是因为她师父灭绝师太跟张无忌所在的明教反目，同时也是跟张无忌反目。
任盈盈是魔教之女，赵敏是朝廷郡主，被称为是妖女。
俩人在刚开始，都是比较反面的女性形象，很任性，很嚣张，很大小姐脾气和架子，但
是后期都是变得正面了，而且跟男主的感情也是很深厚了，超过了女二号跟男主的青梅
竹马的关系和萌芽时期的好感或者青涩的恋爱。
只是赵敏的身世跟任盈盈不太一样而已，所以赵敏没有一个武功盖世的像任我行那样的
爹，不过赵敏的王爷爹是有兵权的，也是个重量级人物，只是跟江湖的关系不大。
至于说令狐冲和张无忌，不太一样，但是也有一点点的类似之处，这两部算是相似度高
的。
l*y
3 楼
一个游戏上个月打还不卡,过了一个月打突然很卡,电脑啥也没换,怎么会使?
f*n
4 楼
小弟最近在做RNA in vitro transcription，用的是ambion 的MEGAscript kit。
可是不论是用PCR产物直接做模板，还是连接到质粒上再线性化做模板，都得不到sharp
的条带，size比预期小很多并且有拖尾，但kit里阳性对照可以出来。
已经排除了RNase污染。估计是DNA模板纯度的问题，请问各位PCR产物用啥方法纯化？
另外，我在T7promoter序列前面加了7个碱基，难道是这个影响酶的效率？
请各位高手帮忙！
可是不论是用PCR产物直接做模板，还是连接到质粒上再线性化做模板，都得不到sharp
的条带，size比预期小很多并且有拖尾，但kit里阳性对照可以出来。
已经排除了RNase污染。估计是DNA模板纯度的问题，请问各位PCR产物用啥方法纯化？
另外，我在T7promoter序列前面加了7个碱基，难道是这个影响酶的效率？
请各位高手帮忙！
m*d
5 楼
韩国店肯定有
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
K*c
6 楼
有那么点这个意思
Z*o
7 楼
莫非是SB平台的？
o*y
8 楼
Qiagen PCR clean up kit
sharp
【在 f****n 的大作中提到】
: 小弟最近在做RNA in vitro transcription，用的是ambion 的MEGAscript kit。
: 可是不论是用PCR产物直接做模板，还是连接到质粒上再线性化做模板，都得不到sharp
: 的条带，size比预期小很多并且有拖尾，但kit里阳性对照可以出来。
: 已经排除了RNase污染。估计是DNA模板纯度的问题，请问各位PCR产物用啥方法纯化？
: 另外，我在T7promoter序列前面加了7个碱基，难道是这个影响酶的效率？
: 请各位高手帮忙！
sharp
【在 f****n 的大作中提到】
: 小弟最近在做RNA in vitro transcription，用的是ambion 的MEGAscript kit。
: 可是不论是用PCR产物直接做模板，还是连接到质粒上再线性化做模板，都得不到sharp
: 的条带，size比预期小很多并且有拖尾，但kit里阳性对照可以出来。
: 已经排除了RNase污染。估计是DNA模板纯度的问题，请问各位PCR产物用啥方法纯化？
: 另外，我在T7promoter序列前面加了7个碱基，难道是这个影响酶的效率？
: 请各位高手帮忙！
d*8
9 楼
韩国店
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
B*e
10 楼
胡扯，岳灵珊根本没周芷若的心机。
【在 K********c 的大作中提到】
: 有那么点这个意思
【在 K********c 的大作中提到】
: 有那么点这个意思
l*y
11 楼
不是i7 8core普通平台,5730的显卡,难道是显卡好久不用不灵了?玩星际2就不卡,古剑
卡.
卡.
f*n
12 楼
我用的切胶回收 然后QIAquick Gel Extraction Kit
【在 o********y 的大作中提到】
: Qiagen PCR clean up kit
:
: sharp
【在 o********y 的大作中提到】
: Qiagen PCR clean up kit
:
: sharp
F*t
13 楼
没有新鲜的那冷冻柜里呢?
l*y
14 楼
不是i7 8core普通平台,5730的显卡,难道是显卡好久不用不灵了?玩星际2就不卡,古剑
卡.
卡.
m*5
15 楼
同问
c*b
16 楼
带鱼味道很重.做的时候把家里门窗都打开.
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
f*t
17 楼
i7 8 core, 5730,这是什么奇葩配置？
【在 l********y 的大作中提到】
: 不是i7 8core普通平台,5730的显卡,难道是显卡好久不用不灵了?玩星际2就不卡,古剑
: 卡.
a*k
18 楼
这个kit用过之后对transcription很不好
我一般都是尽量保证PCR的质量，run 1ul检测一下之后就直接用PCR product做，不会
经过任何gel purify的过程
【在 f****n 的大作中提到】
: 我用的切胶回收 然后QIAquick Gel Extraction Kit
我一般都是尽量保证PCR的质量，run 1ul检测一下之后就直接用PCR product做，不会
经过任何gel purify的过程
【在 f****n 的大作中提到】
: 我用的切胶回收 然后QIAquick Gel Extraction Kit
C*o
19 楼
中国超市
婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
谢谢
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
谢谢
【在 x******r 的大作中提到】
: 婆婆特别想吃，可是附近的超市都没有
: 谢谢
y*n
20 楼
假8核 + 移动GPU
笔记本的家伙。
【在 f*****t 的大作中提到】
:
: i7 8 core, 5730,这是什么奇葩配置？
笔记本的家伙。
【在 f*****t 的大作中提到】
:
: i7 8 core, 5730,这是什么奇葩配置？
V*n
21 楼
用过这个KIT。看了一下以前的记录，俺用PCR产物，经胶纯化后（切胶，乙醇沉淀，洗
，干燥，重悬）做模板。俺觉得是模板设计的问题。建议检查一下序列里是否有其他
promoter sequence或者stop codon。还有就是你合成的序列是否过大？
，干燥，重悬）做模板。俺觉得是模板设计的问题。建议检查一下序列里是否有其他
promoter sequence或者stop codon。还有就是你合成的序列是否过大？
f*t
22 楼
嗯，thought so.
【在 y*******n 的大作中提到】
: 假8核 + 移动GPU
: 笔记本的家伙。
f*n
23 楼
谢谢！！下次我也试试你的方法。
【在 a****k 的大作中提到】
: 这个kit用过之后对transcription很不好
: 我一般都是尽量保证PCR的质量，run 1ul检测一下之后就直接用PCR product做，不会
: 经过任何gel purify的过程
【在 a****k 的大作中提到】
: 这个kit用过之后对transcription很不好
: 我一般都是尽量保证PCR的质量，run 1ul检测一下之后就直接用PCR product做，不会
: 经过任何gel purify的过程
l*y
24 楼
i7 4core,hyper thread 8core
独立显卡5730,不明白什么是移动GPU?
【在 y*******n 的大作中提到】
: 假8核 + 移动GPU
: 笔记本的家伙。
独立显卡5730,不明白什么是移动GPU?
【在 y*******n 的大作中提到】
: 假8核 + 移动GPU
: 笔记本的家伙。
f*n
25 楼
谢谢！
sense primer有45bases，primer序列也有影响？
T7promoter前面需要加6-10个碱基么？我看promega的手册上这样建议，但有些paper直
接用T7promoter最小序列
【在 V********n 的大作中提到】
: 用过这个KIT。看了一下以前的记录，俺用PCR产物，经胶纯化后（切胶，乙醇沉淀，洗
: ，干燥，重悬）做模板。俺觉得是模板设计的问题。建议检查一下序列里是否有其他
: promoter sequence或者stop codon。还有就是你合成的序列是否过大？
sense primer有45bases，primer序列也有影响？
T7promoter前面需要加6-10个碱基么？我看promega的手册上这样建议，但有些paper直
接用T7promoter最小序列
【在 V********n 的大作中提到】
: 用过这个KIT。看了一下以前的记录，俺用PCR产物，经胶纯化后（切胶，乙醇沉淀，洗
: ，干燥，重悬）做模板。俺觉得是模板设计的问题。建议检查一下序列里是否有其他
: promoter sequence或者stop codon。还有就是你合成的序列是否过大？
y*n
26 楼
ati的笔记本GPU都冠名Radeon Mobility。有时候名字跟台式GPU差不多，但其实实际性
能差的很远。
比如台式机的5770，有800个运算单元，但移动版5770就只有400个了。频率也从800降
到650.性能只有非移动版的40%。
【在 l********y 的大作中提到】
: i7 4core,hyper thread 8core
: 独立显卡5730,不明白什么是移动GPU?
能差的很远。
比如台式机的5770，有800个运算单元，但移动版5770就只有400个了。频率也从800降
到650.性能只有非移动版的40%。
【在 l********y 的大作中提到】
: i7 4core,hyper thread 8core
: 独立显卡5730,不明白什么是移动GPU?
M*n
27 楼
repurify your PCR product and use RNase-free water.
l*y
28 楼
哦涨见识了,不过这个显卡刚买来的时候玩得好好的,今天突然就开始卡了.也许是有别
的程序也占用了GPU的资源了吧.
【在 y*******n 的大作中提到】
: ati的笔记本GPU都冠名Radeon Mobility。有时候名字跟台式GPU差不多，但其实实际性
: 能差的很远。
: 比如台式机的5770，有800个运算单元，但移动版5770就只有400个了。频率也从800降
: 到650.性能只有非移动版的40%。
的程序也占用了GPU的资源了吧.
【在 y*******n 的大作中提到】
: ati的笔记本GPU都冠名Radeon Mobility。有时候名字跟台式GPU差不多，但其实实际性
: 能差的很远。
: 比如台式机的5770，有800个运算单元，但移动版5770就只有400个了。频率也从800降
: 到650.性能只有非移动版的40%。
y*n
29 楼
可能你开了抗锯齿。或者分辨率调高了。
也可能重启一下就好了。
试试重装显卡驱动。
还有笔记本打游戏要插外接电源，否则cpu、gpu可能都在省电模式下工作。
【在 l********y 的大作中提到】
: 哦涨见识了,不过这个显卡刚买来的时候玩得好好的,今天突然就开始卡了.也许是有别
: 的程序也占用了GPU的资源了吧.
也可能重启一下就好了。
试试重装显卡驱动。
还有笔记本打游戏要插外接电源，否则cpu、gpu可能都在省电模式下工作。
【在 l********y 的大作中提到】
: 哦涨见识了,不过这个显卡刚买来的时候玩得好好的,今天突然就开始卡了.也许是有别
: 的程序也占用了GPU的资源了吧.
l*y
30 楼
thanks
【在 y*******n 的大作中提到】
: 可能你开了抗锯齿。或者分辨率调高了。
: 也可能重启一下就好了。
: 试试重装显卡驱动。
: 还有笔记本打游戏要插外接电源，否则cpu、gpu可能都在省电模式下工作。
【在 y*******n 的大作中提到】
: 可能你开了抗锯齿。或者分辨率调高了。
: 也可能重启一下就好了。
: 试试重装显卡驱动。
: 还有笔记本打游戏要插外接电源，否则cpu、gpu可能都在省电模式下工作。
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