同修们哪，为什么我提不出质粒啊？ - 未名空间MITBBS历史存档

同修们哪，为什么我提不出质粒啊？# Biology - 生物学

s*82011-09-01 07:09

1 楼

我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
触颇深。归纳出以下要点：
（1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
学生的。
（2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
公司的要求。
非常疑惑，在美国刚毕业没工作过的学生都是怎么找到工作的？？？？
苦苦思索，终得其解：
（1）美国人的文化是“个人主义”，即不考虑人家，只顾自己的文化

b*s2011-09-01 07:09

2 楼

给父母办的，他们来过美国4次了，这次申请代签。　老妈的倒是很快下来的，老爸的
到现在visa 还是AP状态。case是12/12号create的。
有等过这么长时间的么？是不是要作好面签的准备？
谢谢！！！

l*02011-09-01 07:09

3 楼

据台湾媒体报道，79岁作家琼瑶写下照顾老公平鑫涛住院过程，近日因为鼻胃管问题
和继子女意见不同，又被继子平云公开信反驳。她5月2日晚间发文向3名继子女道歉，
同时反指对方捏造事实，激动写道“我不该认识你爸爸，不该写出让你们不愉快的文字
，很多很多不该！”并说暂时不会去探视丈夫，“我现在万念俱灰，也不再相信人间有
情”，最后留下13项照顾老公的重点，“言尽于此，各自珍重！”
琼瑶沉痛表示，没想到因为想写有关病人权利的书，导致两家人分裂，文中提到继子女
捏造事实，“说我说过‘没有灵魂的肉体，就不值得活下去’等等，让我欲哭无泪”，
激动写道“人在做，天在看，不要如此残忍和恶毒！”
文中澄清没说过要去过自己日子的话，不断地向继子女平莹、平珩、平云道歉，并说愿
意成全，让继子女接平鑫涛回去照顾。她强调今后不会再回应继子女，最后列出13项丈
夫日常所需用品和注意事项，包括尿布、营养品、凡士林、换洗衣服、床单的次数和天
数等，“我现在万念俱灰，也不再相信人间有情，我跟你们爸爸之间五十几年的感情，
在你们的攻击下，也变得苍白薄弱!我暂时不会再去探视他了，免得情绪决堤而崩溃！”
琼瑶所写全文
给平莹、平珩、平云的一封公开信
早上起床，看到铺天盖地的新闻，才知道你们对我有这么大的反应!我向你们三个认错
，我错了！
1963年不该把我的《窗外》寄给皇冠！
更不该接受你们爸爸的安排，从高雄到台北接受採访！
然后也不该继续在皇冠写《几度夕阳红》！
接着又在你们父亲主编的联副写《烟雨濛濛》！
那些写作的日子，我几乎在你们爸爸的鞭策之下，日夜无休的工作，相信也给皇冠带来
了荣景，给你们的父亲带来骄傲！
我再也没有想到，当你们父亲躺在医院，最后为了我想写一部呼吁《病人权利自主法》
和《善终权》的书，让我们两家分裂到这个地步！
你们捏造的事实，说我说过：“没有灵魂的肉体，就不值得活下去”等等，让我欲哭无
泪。至于你们杜撰的“对我来说，你们的父亲已经是一具没有灵魂的肉体，从今以后，
请你们自己照顾，我要去过我自己的生活了!”更是荒谬绝伦，如果我曾经说过那些话
，我还会活在每天数日子的煎熬中，一周叁次奔赴医院探视吗？如果我说过那些话，你
们怎么没有把父亲接回，到四百多天后才提出来？如果我说过那些话，怎么每次出国旅
行的是你们？而我始终守在台北？
人在做，天在看，不要如此残忍和恶毒！
你们毕竟是鑫涛的孩子！自从他2002年生病后，身体就不好了，是我在每天照顾他！他
能如此长寿，我没有功劳，也有苦劳！
把你父亲送到H医院，是因为它是一家有规模的医院，有各科医生，会照顾得比较周到
，总比送到安养中心好。因为你父亲插了鼻胃管，需要各种专业照护，不是我能够居家
照护的。当时，平莹还问我为什么不能接回家？让我当场傻住，我已经老了，我不是神
，我也不是万能啊！
总之，我错了，我向你们三个郑重道歉认错，我不该认识你爸爸，不该写出让你们不愉
快的文字，很多很多不该！请你们三位高抬贵手，饶了我吧！(我不会再回应你们，你
们无论再说什么，都算你们对!我错!)
至于你们想把爸爸接回自己照顾，我成全你们!虽然现在已经过了“照顾期”，躺在医
院里的鑫涛，有我训练好的哈达照顾，有我拜托的院长和护理长照顾，有医生照顾，你
们只要探视就好了！
至于在你们父亲身边服务了17年的淑玲，最终也没有落得你们一句好话，也就不需要她
再处理你们父亲的大小事了吧!我会让她把看护的事情交接清楚，让你们好接手后续工
作。
我现在万念俱灰，也不再相信人间有情，我跟你们爸爸之间五十几年的感情，在你们的
攻击下，也变得苍白薄弱!我暂时不会再去探视他了，免得情绪决堤而崩溃!但是，关于
你爸爸现在需要的东西，我还是要清楚交待一下：
鑫涛日常所需用品和注意事项
1、安加适尿布L号最好最透气的尿布
(只要湿了就立刻换，否则会长褥疮)
2、安安看护垫XXL号垫床以防漏尿弄脏床垫
3、亚培葡胜纳惟一的食物，医师开的
(每日五至六罐，要抽胃液看胃是否出血而定)
4、美耐林擦澡手套因为无法洗澡，靠清水加依必朗洁肤水，长久还是会不干净且对皮
肤不好，所以改用此款进口抛弃式手套擦澡
5、海绵洁牙棒要每日至少清洁口腔10次
(务必要哈达做到，否则喉咙有痰容易引起肺发炎)
6、PROTA手套M号哈达使用帮鑫涛清理大小便时使用
7、化妆棉帮鑫涛清洁眼睛用
8、棉花棒清洁耳朵
9、凡士林(擦皮肤，避免皮肤干燥)
10、丽眼舒人工泪液(一日三次，湿润眼睛)
11、泪膜(每晚使用)
12、每日带鑫涛更换的衣物回家换洗，第二日送回。
13、床单枕头套两日需带回家换洗一次，第二日送回。
希望你们也能如先前我照顾你们父亲，这样的照顾他到终了，这也就是他的福气了!言
尽于此，各自珍重!
琼瑶
写于可园
2017.05.02
鑫涛住院427日

s*f2011-09-01 07:09

4 楼

RT，我有一台03年的笔记本，一直用的不错，主要就是接电视机，放youtube什么的。
最近硬盘坏了。准备换一块，家里有若干SATA的笔记本硬盘，不知道用网上的SATA to
IDE adapter for laptop能不能将SATA的硬盘装到IDE的插槽里用。有没有同鞋有过类
似的经验，分享一下谢了。

r*t2011-09-01 07:09

5 楼

连接后转化，有菌落长出，但是提不出质粒
我试了买的感受态细菌和自己做的电转的菌，都是一样的结果，有菌落，提不出质粒
提质粒用的是ｑｉａｇｅｎ的ｍｉｎｉｐｒｅｐ，应该没问题
摇的菌好像不太对，长的不够浓，离心下来只得到一点菌，而且看起来不太对劲，比较
＂粘＂，正常离下来的像一堆沙子，这个像粥
还有就是我的载体质粒比较大，有１４ｋ
到底怎么回事啊？愁死我了

b*k2011-09-01 07:09

6 楼

haha

少5

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

A*s2011-09-01 07:09

7 楼

笔记本的那点空间基本没希望
倒是光驱位硬盘架可以考虑

to

【在 s*******f 的大作中提到】

: RT，我有一台03年的笔记本，一直用的不错，主要就是接电视机，放youtube什么的。
: 最近硬盘坏了。准备换一块，家里有若干SATA的笔记本硬盘，不知道用网上的SATA to
: IDE adapter for laptop能不能将SATA的硬盘装到IDE的插槽里用。有没有同鞋有过类
: 似的经验，分享一下谢了。

r*t2011-09-01 07:09

8 楼

有可能是噬菌体感染么？怎么证明？如果是，该怎么办？

f*h2011-09-01 07:09

9 楼

呵呵，别的不说，最后一点不敢苟同，基本上我看招聘广告上没有达到他们要求60～70
%以上，连面试机会都没有。我也是EE的。还有很多情况，overqualify的也照样不行。
比如PHD申master设置BS的职位也很多没戏，就是他的要求都能满足

f*y2011-09-01 07:09

10 楼

我的老t42p就用光驱托盘装了个sata ssd，效果不错

i*g2011-09-01 07:09

11 楼

这确实很头痛
我知道有时会有楼主说的这个麻烦，也说不清楚原因或者准确说，不值得划6个月去玩
这个
有时是maxi有这个麻烦，但楼主是mini，很麻烦了
楼主只好多换些菌株，mini culture不要摇过头了

C*Y2011-09-01 07:09

12 楼

总结一句话：
牛，是吹出来的

s*f2011-09-01 07:09

13 楼

好像明白了，楼上两位的意思是硬盘槽空间不够，只有用光驱的位置，对吧？那怎么装
操作系统呢？我到是有系统光盘。

【在 f*y 的大作中提到】

: 我的老t42p就用光驱托盘装了个sata ssd，效果不错

m*u2011-09-01 07:09

14 楼

用新鲜的加抗生素板子

【在 r*****t 的大作中提到】

: 连接后转化，有菌落长出，但是提不出质粒
: 我试了买的感受态细菌和自己做的电转的菌，都是一样的结果，有菌落，提不出质粒
: 提质粒用的是ｑｉａｇｅｎ的ｍｉｎｉｐｒｅｐ，应该没问题
: 摇的菌好像不太对，长的不够浓，离心下来只得到一点菌，而且看起来不太对劲，比较
: ＂粘＂，正常离下来的像一堆沙子，这个像粥
: 还有就是我的载体质粒比较大，有１４ｋ
: 到底怎么回事啊？愁死我了

m*32011-09-01 07:09

15 楼

那FRESH GRADUATE怎么找工作啊？

N*d2011-09-01 07:09

16 楼

哪里寻? 光驱位硬盘架

m*M2011-09-01 07:09

17 楼

After how long incubation did you get the colonies? It's not real bacteria
containing your plasmid, probably satellite colonies if you got them after
longer incubation.

s*k2011-09-01 07:09

18 楼

那能不能把phd不写进去？

70

【在 f**h 的大作中提到】

: 呵呵，别的不说，最后一点不敢苟同，基本上我看招聘广告上没有达到他们要求60～70
: %以上，连面试机会都没有。我也是EE的。还有很多情况，overqualify的也照样不行。
: 比如PHD申master设置BS的职位也很多没戏，就是他的要求都能满足

A*s2011-09-01 07:09

19 楼

怎么装操作系统也好意思上这儿问。。。

【在 s*******f 的大作中提到】

: 好像明白了，楼上两位的意思是硬盘槽空间不够，只有用光驱的位置，对吧？那怎么装
: 操作系统呢？我到是有系统光盘。

s*t2011-09-01 07:09

20 楼

high copy or low copy number plasmid?
maybe miniprep wasn't enough.

s*k2011-09-01 07:09

21 楼

我的简历都是100%真实的，所以一共公司的面试都没有。莫非逼着我们吹牛？不是说在
美国造假后果很严重吗?

少5

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

A*s2011-09-01 07:09

22 楼

没用过，问了一圈，用了的都说好 lol

【在 N**********d 的大作中提到】

: 哪里寻? 光驱位硬盘架

x*u2011-09-01 07:09

23 楼

Just plate your bacteria on LB agar. Observe the morphology of your colony.
If the colony lookes like dissolved, then it must be bacteriophage plaque.

x*g2011-09-01 07:09

24 楼

我也收到过match不到50%的职位的面试
不过我估计那职位没什么人申，
基本上其他面试都是至少match了80%以上吧

70

【在 f**h 的大作中提到】

: 呵呵，别的不说，最后一点不敢苟同，基本上我看招聘广告上没有达到他们要求60～70
: %以上，连面试机会都没有。我也是EE的。还有很多情况，overqualify的也照样不行。
: 比如PHD申master设置BS的职位也很多没戏，就是他的要求都能满足

f*y2011-09-01 07:09

25 楼

我ebay 上10来刀的光驱硬盘托架，加上intle ssd 80G,非常快啊。win7完全启动50秒
够了，photoshop不到10秒（Pm 1.8G 估计拖了后腿），原来5年高寿的日立60G要弄上5
倍以上的时间。
装系统的话，不是太老的电脑都应该支持usb启动吧。用U盘就可以了。我是按照下面的
方法装的，大概装了4台电脑了，没有问题。
http://www.intowindows.com/how-to-install-windows-7vista-from-u

r*t2011-09-01 07:09

26 楼

谢谢大家。如果是phage，有什么办法去掉？用这个MAX Efficiency® DH5α
8482; T1 Phage Resistant Competent Cells做转化？
另外摇菌的时间不到20小时，菌落应该不是卫星菌，

O*d2011-09-01 07:09

27 楼

美国的很多大公司的HR要对接受了的雇员进行工作背景调查。一般是外包给专门做背
景调查的公司，一般两个星期就可以拿到结果。假造的学历，假造的工作经历可以被
查出来。

a*e2011-09-01 07:09

28 楼

你这个是黑ssd
win7启动50sec很快，你都装了什么东西？

上5

【在 f*y 的大作中提到】

: 我ebay 上10来刀的光驱硬盘托架，加上intle ssd 80G,非常快啊。win7完全启动50秒
: 够了，photoshop不到10秒（Pm 1.8G 估计拖了后腿），原来5年高寿的日立60G要弄上5
: 倍以上的时间。
: 装系统的话，不是太老的电脑都应该支持usb启动吧。用U盘就可以了。我是按照下面的
: 方法装的，大概装了4台电脑了，没有问题。
: http://www.intowindows.com/how-to-install-windows-7vista-from-u

i*g2011-09-01 07:09

29 楼

还有个可能，是你LB污染了
你拿LB用时，不要摇，在灯下仔细看，如果底部有些灰尘那样的沉淀，就是污染了，不
要用了

G*92011-09-01 07:09

30 楼

原来如此。怪不得当年找工作总找不着呢。放人堆里觉得比我强的比例很低啊，怎么条
件比我差的反而进了好公司了。原来果然是撑死胆大的，饿死胆小的。

f*y2011-09-01 07:09

31 楼

T42p电脑太老了，没办法。以前用原装hdd启动个xp都要磨蹭三分钟呢

【在 a***e 的大作中提到】

: 你这个是黑ssd
: win7启动50sec很快，你都装了什么东西？
:
: 上5

f*e2011-09-01 07:09

32 楼

virual plasmid?

【在 r*****t 的大作中提到】

: 谢谢大家。如果是phage，有什么办法去掉？用这个MAX Efficiency® DH5α
: 8482; T1 Phage Resistant Competent Cells做转化？
: 另外摇菌的时间不到20小时，菌落应该不是卫星菌，

b*r2011-09-01 07:09

33 楼

实习, 美国人高中开始就在外面工作, 大学的时候哪个美国学生没有在外面实习过, 工
作过? 所有的外国留学生都有1年的CPT, 可以在任何公司实习, 再有一年OPT, 任何公
司实习. 两年的实习经验下来还找不到工作? 美国国情就是这样, 所以美国学生一毕业
就有工作经验的不要太多.

A*s2011-09-01 07:09

34 楼

T42内存再小点还真差不多，估计系统还没load完，就要开始往缓存里写东西了。。。

【在 a***e 的大作中提到】

: 你这个是黑ssd
: win7启动50sec很快，你都装了什么东西？
:
: 上5

T*t2011-09-01 07:09

35 楼

摇20小时有可能太久了，如果菌长太密了，养分和氧气耗尽的话，菌体自身含有的溶原
性噬菌体可能会进入裂解周期，这样就会出现类似噬菌体感染的菌液变清，菌量减少的
情况。你把摇菌时间减半试试。或者降低摇菌温度，这样细菌长得慢。

a*n2011-09-01 07:09

36 楼

现在工作形势不好，失业率都在10%以上，公司为了节约成本，一般愿意招有一定工作
经验的人。同时学校教育的东西跟公司干的东西毕竟有些差别。

s*f2011-09-01 07:09

37 楼

谢谢了，回头看看可行不，我的电脑是2003年的，够老吧。LP当时花了2000个大洋买的
，搁现在
很好配置的都能买两台了不是？

上5

【在 f*y 的大作中提到】

: 我ebay 上10来刀的光驱硬盘托架，加上intle ssd 80G,非常快啊。win7完全启动50秒
: 够了，photoshop不到10秒（Pm 1.8G 估计拖了后腿），原来5年高寿的日立60G要弄上5
: 倍以上的时间。
: 装系统的话，不是太老的电脑都应该支持usb启动吧。用U盘就可以了。我是按照下面的
: 方法装的，大概装了4台电脑了，没有问题。
: http://www.intowindows.com/how-to-install-windows-7vista-from-u

h*12011-09-01 07:09

38 楼

以前也遇到过类似的情况，总是看到菌也很厚重就是没有质粒
后来发现原因是葡萄球菌的感染，楼主可以检测一下。看看是怎么回事。
要是你的感受态细胞就有问题，那么你后续的所有的实验都会有问题。

l*c2011-09-01 07:09

39 楼

Are your from China?
For EE, CS high tech job, China has very strict requirements:
below 28 years old for programmer, below 35 years old for manager;
for office clerk, must be 1.75m+ for man, 1.62m + for woman
Also, no liver problem.......................................

少5

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

h*12011-09-01 07:09

40 楼

首頁 > 期刊首頁 > 江蘇大學學報(醫學版) > 2002年5期 > 表皮葡萄球菌污染對質粒
轉化和抽提影響的實驗研究
《人力資源管理》雜志
第九屆（2011）全國核心期刊與期刊國際化、網絡化研討會征文通知
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表皮葡萄球菌污染對質粒轉化和抽提影響的實驗研究
Staphylococcus Epidermidis Contamination: A Special Cause of Plasmid
Extraction Failure
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摘要：
目的:探討導致部分質粒轉化和抽提失敗的原因.方法:使用同一批DH5-α細菌制備
感受態,轉化、堿裂解法抽提和鑒定兩種質粒,經抗性LB瓊脂平板篩選和菌落分析,對照
成功抽提和鑒定的質粒,分析部分質粒反復轉化和抽提失敗的原因.結果:發現在該抽提
失敗的質粒所轉化的抗性LB瓊脂平板上存在兩種菌落,大量白色菌落為表皮葡萄球菌,其
過夜振搖產物經堿裂解法抽提質粒失敗;極少數淡黃色菌落為大腸桿菌,經鑒定,質粒抽
提成功.結論:隱蔽的表皮葡萄球菌污染可能是導致部分質粒反復抽提失敗的重要原因
这个是国内的一个文章介绍的，你可以检测一下。我觉得葡萄球菌感染的几率比较大

y*n2011-09-01 07:09

41 楼

谁再写个把中国骂一通的? 其实是各有优劣了. 我当年找intern的时候看一个找人的.
需要8年的php经验,那个时候php出来也7年,估计就是inventor合格.

少5

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

G*O2011-09-01 07:09

42 楼

用TB试试，加大体积.什么Vector?

【在 r*****t 的大作中提到】

: 连接后转化，有菌落长出，但是提不出质粒
: 我试了买的感受态细菌和自己做的电转的菌，都是一样的结果，有菌落，提不出质粒
: 提质粒用的是ｑｉａｇｅｎ的ｍｉｎｉｐｒｅｐ，应该没问题
: 摇的菌好像不太对，长的不够浓，离心下来只得到一点菌，而且看起来不太对劲，比较
: ＂粘＂，正常离下来的像一堆沙子，这个像粥
: 还有就是我的载体质粒比较大，有１４ｋ
: 到底怎么回事啊？愁死我了

O*o2011-09-01 07:09

43 楼

1，这么多打击你的人是因为你道出了皇帝的新衣，那些大臣们面子上挂不住了。
2，其实进了公司还是要经历淘汰的，所以有人推荐起码假设这人会比较好相处一点
吧。
3，公司要人急的时候，就成了吸尘器，你说的 40-50%= 90% 是完全可能的。现在不
景气，要人不急，那估计有人提到的 80%的match也是对目前来说比较现实的评价。
哈哈，LOL.

感
少5
的
验
因
些

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

l*d2011-09-01 07:09

44 楼

1 培养基污染
2 抗生素失效
3 培养时间过长
4 连接有问题，有菌落无质粒，挑菌落做个快速检测，看看有无insert
5 insert稍大，可手提看看

b*y2011-09-01 07:09

45 楼

我在美国读的本科, 楼主有一些地方你可能没有注意到:
第一, 美国基本大公司对于没毕业的或者刚毕业的新生都有单独的University一栏, 是
专门提供给学生internship和New Graduate的position, 基本要求很少, 但是需要证明
是在校学生或者刚毕业.
第二, 我本科毕业的时候, 已经做了2个大公司的internship和一个Co-op(全职实习),
而且这些都是可以算在工作经验的, 基本4年的本科, 我已经有至少2年的工作经验.
所以这些可能是引起你没有看全问题根本的地方. 其实在美国, New Graduate是很好找
工作的, 对于international students会有一些语言上和身份上的限制,所以稍微增加
了难度. 但是总体来说美国的New Graduate就业形式还是不错的.

r*t2011-09-01 07:09

46 楼

我前几天试了只摇8个小时左右
菌也长，但是看起来还是不太对，离心后用枪头去吸残余的培养基的时候，会很容易吸
起细菌的pellet，就像我说的，细菌看来比较“粘”我会看看有没有质粒这次。估计够
呛。

d*z2011-09-01 07:09

47 楼

以偏概全。
现在很多公司都是雷掉工作年限长的，工资高的，再招刚毕业的。

m*y2011-09-01 07:09

48 楼

基本可以认为是污染，重新做LB板重新来吧，也许是最快的途径，minipre摇个12-15小
时足够了

b*v2011-09-01 07:09

49 楼

那么程序员年纪大了，是不是饭碗就容易不保？

【在 d**z 的大作中提到】

: 以偏概全。
: 现在很多公司都是雷掉工作年限长的，工资高的，再招刚毕业的。

l*n2011-09-01 07:09

50 楼

楼长几个高人说的很透彻了，重新做吧。关键是做on culture的时候最少pick 10个
colony,长的稀得不能用的

c*k2011-09-01 07:09

51 楼

多和老印在一起，就能把我美国文化的精髓了

【在 s*****k 的大作中提到】

: 我的简历都是100%真实的，所以一共公司的面试都没有。莫非逼着我们吹牛？不是说在
: 美国造假后果很严重吗?
:
: 少5

f*g2011-09-01 07:09

52 楼

i met the same problem as you had. finally, it turned out that my competent
cells is contaminated.
Based on your statement, it looks like that your LB medium or plate or '
curvetee' which is used to do electro-transformation is contaminated.
I suggest you order new LB medium and new plate and autoclave your curvetee.
One more improtant thing is re-purify your plasmid which could be
contaminated as well by gel-purification.

S*i2011-09-01 07:09

53 楼

graduate student的话不是自己想实习就能去实习的

【在 b*******r 的大作中提到】

: 实习, 美国人高中开始就在外面工作, 大学的时候哪个美国学生没有在外面实习过, 工
: 作过? 所有的外国留学生都有1年的CPT, 可以在任何公司实习, 再有一年OPT, 任何公
: 司实习. 两年的实习经验下来还找不到工作? 美国国情就是这样, 所以美国学生一毕业
: 就有工作经验的不要太多.

b*j2011-09-01 07:09

54 楼

it could be simple that the mini kit doesn't work.

【在 r*****t 的大作中提到】

: 连接后转化，有菌落长出，但是提不出质粒
: 我试了买的感受态细菌和自己做的电转的菌，都是一样的结果，有菌落，提不出质粒
: 提质粒用的是ｑｉａｇｅｎ的ｍｉｎｉｐｒｅｐ，应该没问题
: 摇的菌好像不太对，长的不够浓，离心下来只得到一点菌，而且看起来不太对劲，比较
: ＂粘＂，正常离下来的像一堆沙子，这个像粥
: 还有就是我的载体质粒比较大，有１４ｋ
: 到底怎么回事啊？愁死我了

b*t2011-09-01 07:09

55 楼

嗯；有RA的是这样，得跟老板商量；自费的，好像无所谓，想去，拍拍屁股就去了，
呵呵

, 工
何公
毕业

【在 S*******i 的大作中提到】

: graduate student的话不是自己想实习就能去实习的

P*62011-09-01 07:09

56 楼

我也是.
其实美国人是非常虚伪狡诈的, 这已经融入到他们的血液中去了.

【在 s*****k 的大作中提到】

: 我的简历都是100%真实的，所以一共公司的面试都没有。莫非逼着我们吹牛？不是说在
: 美国造假后果很严重吗?
:
: 少5

l*s2011-09-01 07:09

57 楼

楼主估计拿奖学金出来读博士的，暑假也是要给要老板干活的。而且，实习机会也要看
年景。最近及以后两三年内，美国大约会和中国一样，“毕业就是失业的开始”

,

【在 b*******y 的大作中提到】

: 我在美国读的本科, 楼主有一些地方你可能没有注意到:
: 第一, 美国基本大公司对于没毕业的或者刚毕业的新生都有单独的University一栏, 是
: 专门提供给学生internship和New Graduate的position, 基本要求很少, 但是需要证明
: 是在校学生或者刚毕业.
: 第二, 我本科毕业的时候, 已经做了2个大公司的internship和一个Co-op(全职实习),
: 而且这些都是可以算在工作经验的, 基本4年的本科, 我已经有至少2年的工作经验.
: 所以这些可能是引起你没有看全问题根本的地方. 其实在美国, New Graduate是很好找
: 工作的, 对于international students会有一些语言上和身份上的限制,所以稍微增加
: 了难度. 但是总体来说美国的New Graduate就业形式还是不错的.

b*82011-09-01 07:09

58 楼

有时候entry level的工作也是要招有一定工作经验的，不是招刚毕业学生，只是说所
招职位的级别不会很高。另外招人的总希望能招到最好的，特别是技术要求比较高的职
位，要求会写得比较全面，很多公司也会注明具体工资待遇会跟经验挂钩。如果它要求
很高但没有合适的人，它也会很头疼的。另外公司招人，最主终目的是希望找到能做好
那项工作的人，而不是找到曾经做过类似工作的人（如果一个人曾经做过类似工作但做
得很糟那还不是没用）。个人的简历就是要提供证据证明你能做好那项工作，所以简历
根据每一个职位要做适当的调整，比如哪些要提到，哪些没有必要提到，哪些要详细，
哪些要简略。另外职位要求中有一些的关键词，如自己的背景符合那个职位的要求，那
么那些些关键词就要在简历中反映出来。因为初步筛选中可能会先看那些关键词是否有。
简历中写的东西要真实，经得住验证应该是最起码的要求吧。

少5

【在 s******8 的大作中提到】

: 我是学电子工程的，最近看了一下美国各大网站的招聘，和国内的招聘对比了一下，感
: 触颇深。归纳出以下要点：
: （1）美国招聘网站几乎根本见不到有公司招聘刚毕业的学生，几乎无一例外要求至少5
: 年以上工作经验甚至十年以上。而在国内，网站上的很多公司招聘都可以接受新毕业的
: 学生的。
: （2）美国招聘列出的各种要求简直就是变态，各种专业技能的要求之全面和精深令人
: 咂舌。甚至一些招聘ENTRY LEVEL的要求在国内完全就可以是一个对十年以上工作经验
: 的资深人士的要求。什么技能你都要会，其实我根本不相信有这种人在世界上存在，因
: 为即使每天除了吃饭睡觉就是工作学习，连续10年不休息也不可能真正达到大多数那些
: 公司的要求。

q*n2011-09-01 07:09

59 楼

我在美国找工作, 就是极其的难找,
偶然找到几份工作, 进去工作一看, 哇, 发现美国佬的公司的最大特点是草包成群, 笨
猪瞎搞, 上至老板, 中至经理, 下至小临时工, 都是这样的. 难怪我老是不被录取呢,
他们看我不顺眼就不录取我, 但是, 猪的眼睛看人什么时候能看得顺眼?

a*u2011-09-01 07:09

60 楼

严重同意！呵呵。
我现在就是在猪堆里工作，干点猪活，要不是公司sponsor eb1b绿卡，我
早就奔了。
最有意思是想招一个testing engineer，竟然要10年工作经验，我当时
就faint。测试工程师都是刚毕业的学生干的活，然后有几年工作经验，就
转为设计和开发工程师。如果是一直干测试干了10年，这说明这个家伙的水
平很有问题，伸不上去。招工程师也一定要10年，招了几个老头，经验是
有，不过水平太差哦！

是草包成群, 笨
是不被录取呢,

【在 q*******n 的大作中提到】

: 我在美国找工作, 就是极其的难找,
: 偶然找到几份工作, 进去工作一看, 哇, 发现美国佬的公司的最大特点是草包成群, 笨
: 猪瞎搞, 上至老板, 中至经理, 下至小临时工, 都是这样的. 难怪我老是不被录取呢,
: 他们看我不顺眼就不录取我, 但是, 猪的眼睛看人什么时候能看得顺眼?

d*e2011-09-01 07:09

61 楼

我实习的公司，有个职位，我想不如我不如就就试一下吧，只要它帮我办身份
去问公司，却说不要毕业生，要有几年经验的……
我还惊死了 -_-!!! 还要几年经验？那种工作……
然后半年过去，还没招到人，我猜不是它看不上人家就是人家看不到它

【在 a******u 的大作中提到】

: 严重同意！呵呵。
: 我现在就是在猪堆里工作，干点猪活，要不是公司sponsor eb1b绿卡，我
: 早就奔了。
: 最有意思是想招一个testing engineer，竟然要10年工作经验，我当时
: 就faint。测试工程师都是刚毕业的学生干的活，然后有几年工作经验，就
: 转为设计和开发工程师。如果是一直干测试干了10年，这说明这个家伙的水
: 平很有问题，伸不上去。招工程师也一定要10年，招了几个老头，经验是
: 有，不过水平太差哦！
:
: 是草包成群, 笨

m*s2011-09-01 07:09

62 楼

狭隘～

l*c2011-09-01 07:09

63 楼

这个你就胡说了，测试工程师和开发工程师是不一样的。起码测试工程师英语要好些。
测试年头越多越好，开发不一定。

【在 a******u 的大作中提到】

: 严重同意！呵呵。
: 我现在就是在猪堆里工作，干点猪活，要不是公司sponsor eb1b绿卡，我
: 早就奔了。
: 最有意思是想招一个testing engineer，竟然要10年工作经验，我当时
: 就faint。测试工程师都是刚毕业的学生干的活，然后有几年工作经验，就
: 转为设计和开发工程师。如果是一直干测试干了10年，这说明这个家伙的水
: 平很有问题，伸不上去。招工程师也一定要10年，招了几个老头，经验是
: 有，不过水平太差哦！
:
: 是草包成群, 笨

d*e2011-09-01 07:09

64 楼

挺偏激的，明显对北美职场的理解不深